毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达牛白细胞介素2

利用含有强启动子 PAOX1 和 α-因子信号肽序列的巴斯德毕赤酵母载体 p PICZαA,构建出含牛白细胞介素 2(Bo IL - 2 )基因的重组质粒 Bo IL 2 - p PICZαA。线性化的重组表达载体转化到巴斯德毕赤酵母 X- 33及 KM71H中 ,筛选Zeocin高抗性酵母菌株 ,甲醇诱导目的蛋白表达。经 SDS- PAGE和 Western blot检测表明 ,Bo IL- 2以融合蛋白形式在胞内表达 ,但没能分泌到胞外。通过 Bo IL- 2在巴斯德毕赤酵母中的表达 ,重点讨论了信号肽。

白细胞介素-2在牛感染性疾病中的作用

白细胞介素-2(IL-2)是Th1型细胞因子家族中重要的成员之一,主要由CD4^(+)T细胞和CD8^(+)T细胞产生,具有促进T细胞增殖的作用,同时还具有调节B细胞、NK细胞及巨噬细胞等的功能。IL-2的生成是机体受微生物感染时免疫应答的一部分,以区别“自己”与“非己”,其在牛结核病、牛传染性鼻气管炎、口蹄疫、布鲁菌病、巴氏杆菌病、白血病等感染性疾病中发挥重要的作用。深入了解牛IL-2的结构、功能及其在感染性疾病中的作用机制,有利于对牛IL-2的进一步的研究和应用。

大肠杆菌表达重组牛IL-2复性技术的研究(英文)

研究了重组牛白介素2复性条件,如pH,蛋白浓度,DTT浓度,氧化剂(GSSG)和还原剂(GSH)的比例,Cu2+及L-Arg,低浓度的盐酸胍的添加,复性方法等。结果表明,复性液中添加20 mmol/mL DTT可以提高rBoIL-2的复性效率;利用尿浓度梯度复性法3.5 mg/mL的rBoIL-2蛋白溶液复性率可达50%以上,测定活性效价达9.6×104IU/mL。