牛皮肤结节病疑似病例调查及防控措施

牛皮肤结节病是我国重点防控的二类动物疫病。为进一步掌握河南省平顶山市牛皮肤结节病的具体流行情况,于2020年7月至2023年6月开展疑似牛皮肤结节病调查工作。结果表明,2020年7月至2021年6月牛皮肤结节病疑似临床症状病例最多,主要发生在鲁山县,症状多为乳房炎,其次为发热,皮肤结节症状发生最少;利用荧光R-PCR检测,均为牛皮肤结节病阴性,说明利用疑似临床症状并不能作为判断牛皮肤结节病的依据,可为该市牛皮肤结节病的防控提供一定参考。

牛皮肤结节病调查

牛皮肤性结节病又称牛结节疹,由牛结性皮炎或牛疙瘩皮肤病毒(LSDV)引起的一种病毒性传染病,临床上以发热皮肤(黏膜、器官)表面广泛性结节、消瘦、淋巴结皮肤水肿为主要体征。牛皮肤性结节病只会感染牛,不会感染其他动物,但会严重影响牛群正常生长发育。为进一步掌握青海省海南州贵德县牛皮肤结节病的具体流程情况,于2019年9月23日—10月11日开展牛结节性皮肤病紧急排查工作,排查养殖场48个,牛13800头;屠宰场1个,牛359头;散养户4229个,牛51967头。共排查场点数4278个,牛66126头,均未出现皮肤结节、淋巴结肿大、乳房炎等症状。近2个月从甘肃引进牦牛160头、西门塔尔牛46头、黄牛30头,均未发现疑似牛结节性皮肤病症状。但由于青海省西北部和新疆伊犁州紧密相连,疫病的防控压力较大,要采取有效措施,构建完善的防控机制,降低疾病传入流行的可能。

牛皮肤结节病的病原媒介及防控方法探讨

本文以牛结节性皮肤病的病症为研究视角,阐述牛结节性皮肤病的病原特征,总结其中的发病原因,梳理病原传播媒体,归纳传播特征,采取有效的检测方法,及时排查疫情,有效扑杀阳性牛,进行无害处理,配合消毒工作,给予高效免疫接种处理,确保防治效果,降低疫情发展速度,维护牛群健康。

牛结节性皮肤病血清学检测方法研究进展

目前,牛结节性皮肤病对我国养牛业形成较大威胁。血清学方法是便捷、敏感、经济的牛结节性皮肤病检测方法,对于疫病及时发现与疫苗免疫效果评估至关重要。本文着重介绍了牛结节性皮肤病各类常用血清学检测方法的研究进展,分析了各方法的优缺点及适用场景。病毒中和试验(VNT)作为该病的抗体检测金标准,试验周期长,操作要求严格,在基层实验室无法使用,较适用于可疑病例确诊;酶联免疫吸附试验(ELISA)操作简单,反应时间短,适用于大批量样品检测,但蛋白抗原免疫机制研究不足,方法不够成熟;间接免疫荧光抗体试验(IFAT)敏感性较高,但特异性稍低,难以用于临床检测;免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)可以检测一定规模的样品,但其结果需要单孔镜检,不如ELISA结果一目了然;免疫印迹试验(WB)可以鉴别副痘病毒,但操作繁琐,难以用于大批量检测。目前看,ELISA在牛结节性皮肤病临床血清学检测应用上有着绝对优势。今后需要加强牛结节性皮肤病病毒的基础研究,摸清各蛋白的免疫机制,筛选出有效、敏感的抗原,以建立适于基层大规模抗体检测的方法。

牛结节性皮肤病病毒(NMG株)基因组DNA标准物质的研制

为提高牛结节性皮肤病病毒(LSDV)核酸检测结果的准确性,本研究通过病毒核酸提取及质量检测、分装,制备LSDV NMG株基因组DNA标准物质。通过荧光定量PCR(qPCR)检测外源病毒评价其纯净性;采用液滴式数字PCR(ddPCR)方法检测LSDV ORF101基因的拷贝数以评估该标准物质的均匀性、稳定性并与9家实验室协作标定;进一步采用qPCR方法对该标准物质试用。结果显示,本研究制备的标准物质不存在外源病毒污染;组内和组间无显著性差异,均匀性好;标准物质于-20℃稳定保存6个月,4℃稳定保存7d,25℃稳定保存24 h;标准物质ORF101基因最终定值为(8.6±1.3)×10~3拷贝/μL;可以用于qPCR检测。综上,该标准物质定值准确,均匀性好,不仅可以用于LSDV核酸检测相关实验的质量控制、仪器校准、检测方法评价,还可为研制体外诊断试剂提供物质基础。

牛结节性皮肤病病毒荧光定量PCR方法的建立与应用

为了建立牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的快速诊断方法,本试验依据LSDV GCPR基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速诊断LSDV的荧光定量PCR方法。结果表明,建立的LSDV荧光定量PCR方法在3.67×10^(1)~3.67×10^(7) copies/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9905;该方法具有良好的敏感性,其检测病毒系列含量下限为3.67×10 copies/μL;该方法特异性良好,与山羊痘病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、牛副流感病毒3型、牛病毒性腹泻病毒、牛呼吸道合胞体病毒等病毒不存在交叉反应;该方法重复性较好,批内和批间的变异系数均介于0.133%~1.81%。该方法,临床样品的检测符合率达90%。本试验所建立的LSDV荧光定量PCR方法为临床诊断牛结节性皮肤病提供了一种快速、灵敏的检测方法,为LSDV流行病学调查和监测提供了技术支持。

牛结节性皮肤病病毒ORF123基因缺失重组病毒的构建及增殖能力分析

旨在通过缺失牛结节性皮肤病病毒(LSDV)ORF123基因,分析其增殖能力,为LSDV ORF123功能研究奠定基础。本研究利用同源重组,以ORF123基因作为靶标,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,采用融合PCR方法,扩增同源左右臂序列以及EGFP基因表达框,克隆至pUC-19T载体,构建基因缺失转移载体pH5-LSDVΔORF123-EGFP质粒。然后将pH5-LSDVΔORF123-EGFP质粒转染至Vero细胞,并感染LSDV/CHA/FJ/2021毒株,利用蚀斑、梯度稀释和挑取绿色荧光单克隆细胞筛选纯化重组毒株,并鉴定其遗传稳定性和增殖能力。结果显示,利用EGFP筛选标记,通过多次挑斑筛选纯化获得ORF123基因缺失的重组病毒株LSDVΔORF123-EGFP。该重组病毒至少在8代细胞传代中能稳定表达绿色荧光蛋白,接种MDBK细胞后绘制一步增殖曲线表明该重组病毒滴度略低于亲本毒株。本研究成功获得ORF123基因缺失的重组病毒株LSDVΔORF123-EGFP,为LSDV ORF123蛋白生物学功能研究以及减毒活疫苗的研制奠定基础。

基于牛结节性皮肤病病毒ORF61基因荧光定量检测方法的建立

基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列,建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物,并进行特异性和灵敏性筛选验证。最终,筛选得到靶向于LSDV ORF61基因的一对qPCR引物;利用pCAGGS-ORF61真核表达质粒,获得标准曲线y=-3.287 5x+47.87,线性相关系数R^(2)=0.998 6,扩增效率达101%;荧光定量PCR特异性、重复性和灵敏性试验结果表明,该引物的特异性高、重复性良好和灵敏度高等优点;该引物的最低检测限为6.71拷贝·μL^(-1),各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%。以上结果表明,作者建立特异性LSDV的荧光定量PCR检测方法,为LSD预防和控制提供有效的检测手段。

应用Cre-LoxP系统构建牛结节性皮肤病病毒缺失TK基因毒株

利用同源重组技术及Cre-LoxP系统平台,构建牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)缺失TK基因毒株,为研制出安全、高效的LSDV基因工程疫苗提供备选毒株。以TK基因为靶基因,利用Cre-LoxP系统平台,红色荧光蛋白(RFP)为筛选标记,采用重叠PCR方法扩增左、右同源臂以及RFP基因表达框并进行融合,将其克隆至pUC19T载体,构建基因缺失转移载体pUC19T-LSDV-ΔTK-RFP。将转移载体重组质粒转染至Vero细胞,并感染LSDV/CHA/FJ/2021毒株,构建LSDV-ΔTK-RFP重组病毒。采取蚀斑法、有限稀释法纯化LSDV-ΔTK-RFP。然后,利用Cre-LoxP系统,在MDBK-Cre细胞中从病毒基因组中切除RFP标签,采取蚀斑法和有限稀释法筛选并纯化LSDV-ΔTK毒株。利用PCR及测序方法对重组毒株进行鉴定,并测定其一步生长曲线。结果表明成功构建缺失TK基因的重组毒株(LSDV-ΔTK),重组毒株复制力略低于野生毒株。应用Cre-LoxP系统构建的缺失TK基因LSDV毒株,具有良好的遗传稳定性和复制生长特性,为后续LSDV基因工程疫苗的研制提供了候选毒株,同时拓展了Cre-LoxP系统的应用范围。

2018-2022年全球牛结节性皮肤病流行状况

牛结节性皮肤病(LSD)是由牛结节性皮肤病病毒(LSDV)感染引起的一种急性、亚急性传染病,2019年传入我国。为了解全球LSD疫情流行形势,根据世界动物卫生(WOAH)全球动物卫生信息系统(WAHIS)及有关文献资料,分析了近5年全球LSD流行状况。2018—2022年全球共有64个国家/地区累计报告发生75555起LSD疫情,其中亚洲占45.31%(29/64),非洲占53.12%(34/64),共有3552637头动物被感染;亚洲报告发生LSD疫情的国家/地区数量整体呈上升态势,疫情流行强度呈加剧之势,尤其是我国周边国家;非洲LSD疫情趋于稳定,每年的疫情报告数量较为均衡,整体呈下降趋势;欧洲疫情得到有效控制,仅俄罗斯报告发生零星散发疫情。鉴于周边国家疫情严重,以及LSD的传播与畜产品贸易流通、动物迁徙、媒介生物、免疫屏障等因素息息相关,我国应从监测预警、虫媒消杀、流通控制和疫苗免疫等方面进一步加强LSD防控,防止该病对我国养牛业造成重大损害。

牛结节性皮肤病免疫抗体监测的Meta分析

疫苗接种是预防牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)的重要措施,但是疫苗接种后诱导的体液免疫应答水平参差不齐,目前尚缺乏评价疫苗免疫效果的有效手段。本文使用R软件利用Meta分析对已发表的LSD免疫抗体监测结果进行统计,并进行亚组分析,综合评价免疫抗体监测的意义。通过计算机分别检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普中文科技期刊数据库、PubMed、Web of science等中英文数据库,检索时限截止至2023年7月,收集LSD免疫抗体监测的相关文献,根据制定的文献纳入与排除标准,共纳入符合筛选条件的文献24篇,涉及羊痘疫苗的文献共有13篇,涉及LSD疫苗的文献共有13篇,其中2篇文献同时涉及羊痘疫苗和LSD疫苗,包含8 638例样本,其中阳性样本2 782份,结局指标为免疫抗体阳性率。Meta分析结果显示,羊痘疫苗的免疫抗体水平为41%(95%CI:27%~55%),LSD疫苗的免疫抗体水平为73%(95%CI:64%~86%),各文献间的同质性较低,两种疫苗之间无显著性差异(P=0.59),与羊痘疫苗接种(P=0.12)和LSD疫苗接种(P=0.077)相关的文献均提示未存在明显发表偏移;按养殖环境和检测方法分类进行亚组分析,不同养殖环境(P=0.84)和检测方法(P=0.40)均无显著性差异,两亚组均非异质性的主要来源。本文结果提示,使用免疫抗体监测方法评价免疫效果存在较大的不确定性,在实际工作中需要综合分析研判。

牛结节性皮肤病的研究进展

牛结节性皮肤病(lumpy skin disease,LSD)是一种由痘病毒科、山羊痘病毒属中的结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)导致的牛传染病,该病会引起牛体温升高、皮肤黏膜及内脏结节样病变等,进而导致牛生产性能下降,甚至死亡,给畜牧业造成严重的经济损失。该文从牛结节性皮肤病的病原学、流行病学、临床症状及病理变化、诊断方法、防治措施等多个方面进行综述,以期对牛结节性皮肤病的防控提供参考。

浅谈牛结节性皮肤病的临床特点及防控措施

牛结节性皮肤病是在牛养殖过程中常见的一种病害问题,属于一种皮肤性传染疾病。发病初期,对牛的影响较小,但该病症无法做到自愈,随着病情的深入,会对牛支气管、肺部、刍胃等造成影响,甚至威胁到牛的生命健康,从而影响养殖户的经济效益。为了更好地促进牛养殖工作发展,保障养殖户的经济效益,需对牛结节性皮肤病的临床特点、防治措施进行深入的了解,做到早发现、早治疗,尽可能的降低该病症对于牛群的影响。基于此,本文首先阐述了牛结节性皮肤病的症状,最后提出了一系列防控措施,以期为促进牛的健康生长提供借鉴。

牛结节性皮肤病的临床特征及防控措施

牛结节性皮肤病,是近年来新流行起来的牛传染性疾病。牛感染之后,可导致奶牛产奶量下降、怀孕期母牛流产、公牛不育、肉牛生产性能下降,病牛体表皮毛失去经济价值,严重影响牛养殖业的经济效益。为有效防控牛结节性皮肤病的发生和流行,笔者结合工作实践,基于牛结节性皮肤病的临床特征、病理变化,并根据流行特点,总结探索其综合防控措施。以期望能为牛结节性皮肤病的防治工作提供参考。

牛结节性皮肤病的诊断防控研究

2019年8月10日,第一例牛结节性皮肤病在我国新疆伊犁哈萨克自治州确诊,此后疫情迅速蔓延至国内其他多个省份,牛群感染后严重影响皮张质量和产奶量,给养殖户造成重大经济损失。该文梳理了现有牛结节性皮肤病应用较为广泛的诊断方法及防控措施的研究进展,主要从临床综合诊断、实验室诊断、防控难点和防控建议等方面进行阐述。

牛结节性皮肤病防治

牛结节性皮肤病是一种由牛结节性皮肤病病毒引起的近年从中亚传入我国的非人畜共患病。其特征性临床症状主要表现为皮肤、黏膜、器官等表面出现硬实、圆形隆起、界限清楚的结节,其中黏液性分泌物也易引发角膜炎、鼻炎、结膜炎,继而形成溃疡,导致出现流涎症状,并伴有皮肤水肿、淋巴结肿大。病理变化主要表现为表皮增生及上皮样细胞浸润,真皮和皮下组织的淋巴管或血管形成栓塞,从而形成淋巴管炎或血管炎。一旦发生将严重制约畜牧业的发展,造成经济损失。为充分认识和做好该病的防控工作,现将该病的流行特点、传播特征及防治措施进行概括介绍,为有效控制和减少该病提供指导。

牦牛结节性皮肤病防控

1牦牛结节性皮肤病概述牦牛结节性皮肤病(LSD)是由痘病毒科的结节性皮肤病病毒引起的一种急性或亚急性传染病,又称牛结节性皮炎、结节疹等。隐性带毒牦牛和患病牦牛是传染源,病毒主要存在于牦牛的皮肤结节、精液、唾液以及血液当中。该病各年龄和品种的牛均易感,发病潜伏期一般为2~4周。患牛头颈部、四肢及裸露皮肤部位易发生感染,病部破溃后形成结痂并出现继发感染情况。

牛结节性皮肤病临床症状及防控措施分析

牛结节性皮肤病一种常见传染病,由牛结节性皮肤病病毒所引起,显著特点是传染性强,牛群健康可因此受到危害。养殖户要高度重视牛结节性皮肤病的诊断与防控,最大程度降低发病风险与降低死亡率。在进行牛结节性皮肤病的防控时,要注意方式方法的科学与有效,加强饲养管理力度、坚持进行定期驱虫、严格处置染疫病牛、严格落实免疫程序均是防控牛结节性皮肤病的有效措施,要强调全过程落实好防控措施。

牛结节性皮肤病及综合防控措施分析

牛结节性皮肤病(LSD)又称牛结节疹,是一种由牛结节性皮肤病毒(LSDV)引起的急性、亚急性、慢性的传染病,是由媒介传播的家牛和亚洲水牛的痘病,临床主要特征为皮肤出现结节。目前,牛结节性皮肤病没有特效药物治疗,接种痘病毒疫苗是预防牛结节性皮肤病的主要措施,国内尚未研发出该病预防疫苗。本文主要介绍牛结节性皮肤病的病原特点、临床症状、流行特点、实验室诊断及防控措施,旨在为养牛业中牛结节性皮肤病的防控提供参考。

牛结节性皮肤病的防治措施

随着养牛产业的快速发展,养殖规模进一步的扩大,养殖数量进一步增多,牛结节性皮肤病发病频次逐渐增加,对牛的生长发育造成了极大的威胁。该文介绍了牛结节性皮肤病的防治措施,旨在为相关从业人员提供参考。