用阴离子交换层析纯化牛皮蝇素A蛋白的研究

建立了用阴离子交换层析AKTAFPLC纯化果蝇S2细胞分泌的重组牛皮蝇素A(HypodermotinA,HA)的方法。将诱导培养3天的S2细胞上清液浓缩后,经25mMpH8.5Tris-HCl缓冲液透析,在MonoQ柱上以Tris-HCl+NaCl为流动相进行分离。在检测波长280nm处获得蛋白峰。经SDS-PAGE分析,第一峰的分子量与原重组蛋白HA分子量相符,并对明胶大分子具有酶活性;用斑点免疫金渗滤法检测证实对牛皮蝇抗体具有免疫原性。用阴离子交换层析纯化HA的方法具有获得的蛋白质纯度高、操作简便、生产效率高等特点。