用微囊牛肾上腺髓质细胞移植治疗恶性肿瘤疼痛研究

用胶原酶消化法分离牛肾上腺髓质细胞,用海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)法包埋牛肾上腺髓质细胞,将微囊牛肾上腺髓质细胞植入恶性肿瘤病人的珠网膜下腔,移植后不使用免疫抑制剂。结果显示在30例恶性肿瘤患者中,显效率为67％(20例),有效率为27％(8例),无效率为6％(2例),镇痛作用维持时间长达150天,除个别病人发烧和腰痛外未发现其它明显副作用。

开窍中药对牛肾上腺髓质细胞儿茶酚胺分泌的影响

目的探讨开窍中药冰片、牛黄、麝香、石菖蒲及苏合香对牛肾上腺髓质细胞儿茶酚胺分泌的影响。方法体外培养牛肾上腺髓质细胞,HPLC-ECD检测其分泌儿茶酚胺的含量,分别考察5种开窍药对乙酰胆碱、藜芦定碱和56 mmol·L-1高钾溶液诱导的儿茶酚胺分泌的影响。结果5种开窍中药均显著抑制乙酰胆碱、藜芦定碱诱导的儿茶酚胺分泌(P<0.05或P<0.01)而对高钾溶液诱导的儿茶酚胺分泌均无显著影响;对乙酰胆碱诱导的儿茶酚胺分泌的抑制作用随浓度升高而增强(P<0.05或P<0.01)。结论开窍中药具有抑制交感活性作用,且通过乙酰胆碱受体途径和电压依赖型钠离子通道发挥作用。

荷叶生物碱对牛肾上腺髓质细胞儿茶酚胺分泌的影响

目的探讨荷叶生物碱对牛肾上腺髓质细胞儿茶酚胺分泌的影响。方法采用体外培养牛肾上腺髓质细胞,通过HPLC-ECD、FlexstationⅢ荧光法分别检测细胞培养液中儿茶酚胺的含量、细胞内钙含量,考察荷叶生物碱对不同刺激剂诱导的儿茶酚胺分泌的影响,以及在不同刺激剂下荷叶生物碱浓度变化对儿茶酚胺的分泌和钙流的影响。结果荷叶生物碱能明显抑制乙酰胆碱、藜芦定碱、高钾诱导的儿茶酚胺分泌(P<0.05或P<0.01),呈现剂量依赖性;且能抑制乙酰胆碱诱导的细胞外钙离子内流。结论荷叶生物碱通过烟碱型乙酰胆碱受体、电压依赖型钠离子通道、钙离子通道发挥抑制交感活性作用。

经冻存的APA微囊牛肾上腺髓质细胞功能研究

目的观察海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(alginate-polylysine-alginate,APA)微囊牛肾上腺髓质细胞经液氮冻存前后的微囊形态、细胞活性和儿茶酚胺分泌功能变化。方法APA微囊牛肾上腺髓质细胞(牛嗜铬细胞,bevine chromaffin cell,BCC)的冻存以DMSO为保护剂,冻存采取循序缓慢降温,复苏采取快速复温。通过微囊形态、细胞活性和儿茶酚胺分泌量检测观察细胞功能变化。结果与冻存前相比,冻存复苏后的APA微囊BCC形态及细胞活性无明显变化,儿茶酚胺分泌量约为冻存前的80%。结论经冻存复苏的APA微囊BCC仍然保持了较好的形态、细胞活性和儿茶酚胺分泌功能。