牛膝有效部位含药血清联用对损伤软骨细胞的增效作用

目的观察牛膝多糖(ABP)含药血清、牛膝甾酮皂苷(ABTS)含药血清联合应用于损伤的软骨细胞的增效作用。方法提取纯化ABP、ABTS,大鼠灌胃7 d后腹主动脉取血,制备含药血清;培养C28/I2软骨细胞系,优化细胞铺板数、硝普钠造模浓度;分别加入体积分数5%、10%、15%ABP或ABTS或ABP/ABTS(生药比1∶1)含药血清与硝普钠共培养24、48、72 h,确定药物活性、给药浓度和时间;5%以下不同浓度ABP、ABTS配比组合,与硝普钠共培养24 h,确定增效活性及药物浓度配比;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性。结果 ABP、甾醇、皂苷含量分别为(34.7±0.03)%、(16.7±0.03)%、(66.5±0.01)%;C28/I2细胞最佳损伤模型条件为铺板数15×10~3个/孔、硝普钠1.00 mmol/L培养24 h;与模型组相比,ABP、ABTS、ABP/ABTS含药血清均显著提高细胞增殖活性(P<0.05);以ABTS为基础,配伍ABP均能提高细胞增殖活性,ABP-ABTS最佳配比1.25%-5.00%。结论 ABP、ABTS联合应用于损伤的软骨细胞有增效作用,对防治骨关节炎的新药开发具有重要意义。