意大利牛舌草总黄酮及四种化学成分对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制研究

目的探讨意大利牛舌草总黄酮及四种化学成分对心肌细胞缺氧/复氧损伤(hypoxia-reoxygenation,H/R)的保护作用及作用机制。方法分离并培养原代乳鼠心肌细胞,随机分组,建立H/R模型,给药后测定相关指标。结果与模型组相比,总黄酮及四种化学成分均能增加心肌细胞缺氧/复氧损伤后的存活率(P<0.01),降低LDH漏出量(P<0.01),减少细胞内MDA的含量(P<0.01),且SOD活力显著性提高(P<0.01),可显著降低心肌细胞早期凋亡指数,提高线粒体膜电位(P<0.01)。给药组NF-κB信号通路关键蛋白的激活受到抑制,Bax/Bcl-2比例明显降低(P<0.01),Beclin-1蛋白表达量明显降低而p62表达上调(P<0.01),焦亡相关蛋白NLRP3、IL-1β以及GSDMD明显降低(P<0.01)。结论意大利牛舌草总黄酮及四种化学成分可通过抑制NF-κB信号通路的激活及心肌细胞的过度自噬,缓解细胞焦亡,减少心肌细胞凋亡,减轻H/R对心肌细胞造成的损伤。

牛舌草总黄酮通过ROS/TXNIP/NLRP3抑制炎症小体活化抗心肌缺血再灌注损伤

目的考察牛舌草总黄酮(TF)抗心肌缺血再灌注(I/R)损伤作用及其机制,探讨炎症小体活化和活性氧/硫氧还蛋白互作蛋白/NOD样受体蛋白3(ROS/TXNIP/NLRP3)通路是否参与其中。方法采用冠状动脉左前降支结扎制备小鼠I/R损伤模型。将模型制备成功的30只小鼠随机分为I/R模型组和I/R+TF(30和100 mg·kg^(-1))处理组,再灌同时给予生理盐水或TF。于再灌注24 h时,检测小鼠心功能,测定心肌梗死范围和血清心肌酶谱,心肌冰冻切片染色观察ROS水平,Western印迹法分析NLRP3炎症小体活化以及TXNIP与NLRP3相互作用的变化。结果TF 30和100 mg·kg^(-1)均可明显改善心功能,减少心肌梗死范围,降低血清心肌酶水平。另外,TF处理减少心肌炎症因子IL^(-1)β,IL-6和TNFα含量,降低心肌ROS水平。TF 30和100 mg·kg^(-1)均显著降低TXNIP、NLRP3、活化的胱天蛋白酶1和活化的IL^(-1)β,并抑制TXNIP与NLRP3相互作用。结论TF通过抑制ROS/TXNIP/NLRP3通路减轻NLRP3炎症小体活化,从而发挥抗心肌I/R损伤作用。

牛舌草总黄酮通过ROS/TXNIP/NLRP3抑制炎症小体活化抗心肌缺血再灌注损伤

目的从炎症小体活化和活性氧/硫氧还蛋白互作蛋白/NOD样受体蛋白3(ROS/TXNIP/NLRP3)通路考察牛舌草总黄酮(total flavonoids of Anchusa italica Retz.,TF)抗心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法小鼠采用冠状动脉左前降支结扎模型模拟心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤。将模型制备成功的30只小鼠随机分为模型组(I/R)、TF 30 mg·kg^(-1)处理组(I/R+TF30)和100 mg·kg^(-1)处理组(I/R+TF100),再灌同时给予生理盐水、TF。于再灌注24 h时,检测小鼠心功能,测定心肌梗死范围和血清心肌酶谱,心肌冰冻切片染色观察活性氧(ROS)水平,Western blotting分析NLRP3炎症小体活化以及TXNIP与NLRP3相互作用的变化。结果TF在剂量为30和100 mg·kg^(-1)时均可改善心功能,减少心肌梗死范围,降低血清心肌酶水平。另外,TF处理减少心肌炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)α含量,降低心肌ROS水平。TF在30和100 mg·kg^(-1)均显著降低TXNIP、NLRP3、cleaved caspase-1和cleaved IL-1β,并抑制TXNIP/NLRP3相互作用。结论牛舌草总黄酮通过抑制ROS/TXNIP/NLRP3通路,从而减轻NLRP3炎症小体活化,发挥抗心肌缺血再灌注损伤作用。