牛蒡苷元通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路减轻急性脑梗死大鼠的神经元损伤

目的探究牛蒡苷元(AG)能否通过抑制高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)通路的活化,从而减轻急性脑梗死大鼠神经元损伤。方法通过大脑中动脉栓塞(MCAO)建立大鼠急性脑梗死模型后,将50只大鼠随机分为模型组、尼莫地平组(30mg/kg)以及AG低(25mg/kg)、中(50mg/kg)、高(100mg/kg)剂量组,每组10只,另取10只为假手术组(仅麻醉、游离血管,不进行插线操作)。Morris水迷宫实验评估大鼠认知功能;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平;HE染色与TUNEL染色观察大脑皮层病理学变化与神经元凋亡情况,Western blot检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达情况。结果与假手术组比较,模型组认知功能下降,血清TNF-ɑ、IL-1β、IL-6水平升高,神经元凋亡指数及大脑皮层HMGB1、TLR4蛋白表达和p-NF-κB/NF-κB比值升高(P<0.05),大脑皮层神经元排列紊乱,出现严重空泡化和水肿现象,细胞核固缩;与模型组比较,AG各剂量组和尼莫地平组大鼠认知功能部分恢复,血清TNF-ɑ、IL-1β、IL-6水平下降,神经元凋亡指数及大脑皮层HMGB1、TLR4蛋白表达和p-NF-κB/NF-κB比值降低(P<0.05),大脑皮层神经元损伤减轻。结论AG可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路活化,减轻急性脑梗死大鼠神经元损伤。

牛蒡子中牛蒡苷的研究进展

牛蒡苷是中药材牛蒡子的主要有效成分,属于木脂素类化合物。研究表明,牛蒡苷具抗肿瘤、抗炎、抗病毒等药理作用,用于治疗风热表证、温病卫分证等疾病。为更深入地研究牛蒡苷这一成分,查阅相关文献后,现对牛蒡苷的提取、分析、纯化制备和结构表征这些方面展开系统性论述。

牛蒡不同部位、牛蒡子不同产地中牛蒡苷和牛蒡苷元含量比较及指纹图谱分析

目的:应用HPLC同时测定采集于全国34份牛蒡子和牛蒡不同部位中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量;建立牛蒡子药材HPLC指纹图谱。方法:采用AgilentTC-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-水(水:0min,55%;10min,46%;20min,30%线性梯度),检测波长为280nm。结果:牛蒡苷的线性方程为Y=540.83X-937.02(r=0.9999),n=6,平均回收率为97.86%,RSD=1.58%;牛蒡苷元的线性方程为Y=38.257X-24.926(r=0.9998),n=6,平均回收率为98.33%,RSD=1.74%。本实验建立的牛蒡子药材HPLC指纹图谱相似度均在0.90～1.00。结论:本方法简便、准确、灵敏,可同时测定牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,可用作牛蒡子药材的质量控制方法。本实验建立的HPLC指纹图谱分析方法可用于评价牛蒡子药材的内在质量。牛蒡不同部位所含牛蒡苷和牛蒡苷元考察结果表明,牛蒡绒毛、果皮、总苞、芽较其他部位含有较多牛蒡苷和牛蒡苷元。

超高压辅助离子液体提取/HPLC分析牛蒡子中牛蒡苷与牛蒡苷元

通过离子液体类型与浓度、提取压力、时间、料液比等单因素实验确定了超高压辅助离子液体提取牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的最佳工艺。结果表明,超高压离子液体提取最佳工艺为以0.80 mol/L溴化1-十二烷基-3-甲基咪唑溶液为溶剂,提取压力200 MPa,提取时间2 min,料液比1∶20(g/mL),牛蒡苷和牛蒡苷元的提取率分别为37.15、8.04 mg/g。与传统提取方法相比,超高压提取时间只需2 min,是超声方法的1/15、加热回流方法的1/60,极大地节省了提取时间,提高了工作效率,且不污染环境,是提取牛蒡苷和牛蒡苷元的一种简单有效的方法。

牛蒡子提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量测定研究

目的:建立牛蒡子提取物中牛蒡苷及其苷元的含量测定方法。方法:采用HPLC,以牛蒡苷、牛蒡苷元为含量测定指标,测定了牛蒡子提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量。色谱柱为KromasilC18100A(150mm×4.6mm,5μm)。流动相:甲醇-水(采用梯度洗脱的方式:0～7min,35%～45%甲醇;7～9min,45%～48%甲醇;9～15min,48%～53%甲醇;15～24min,53%～80%甲醇;24～30min,80%～100%甲醇);检测波长为280nm。结果:牛蒡苷及牛蒡苷元的平均回收率分别为97.7%,96.9%。RSD分别为1.3%,0.9%(n=5);线性方程分别为Y=782.6X-64.11(r=0.9998),Y=1220.217X-35.26(r=0.9998)。结论:该方法快速准确,可同时测定牛蒡提取物中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量,可用作牛蒡子提取物的质量控制方法。

牛蒡苷元制备方法的研究

目的:对在体外仿生提取牛蒡苷元的制备方法进行研究,优化筛选牛蒡苷元的酶水解条件、提取工艺等,得到最适工艺流程。方法:以酶浓度、酶解时间、底物浓度为考察因素,用Box-Behnken设计-响应面分析法对牛蒡苷元水解条件进行优化。结果:牛蒡苷元最佳制备条件:转化温度50℃,pH4.8,酶液浓度0.44 U/mL,反应时间46.81 min,底物浓度0.29 mg/mL,牛蒡苷元转化率可达到90.94%。结论:该研究为体外制备牛蒡苷元提供了一定的借鉴价值。

高效液相色谱法测定牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量

目的:测定牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量。方法:采用Agilent-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:甲醇-水二元梯度洗脱,流速0.8ml/min,检测波长280nm。结果:牛蒡苷和牛蒡苷元分别在0.36~2.8μg(r=0.9995),0.006~0.56μg(r=0.9996)范围内线性关系良好。平均回收率牛蒡苷为100.3%,RSD为2.3%;牛蒡苷元为99.5%,RSD为2.9%。结论:该方法简便、准确,实验结果可为牛蒡子的质量控制提供参考。

牛蒡子水煎液、牛蒡苷和牛蒡苷元体外抗菌实验

目的：对照研究牛蒡子水煎液、牛蒡苷和牛蒡苷元的体外抗菌作用。方法：采用系统溶剂提取法提取牛蒡苷，再用水浴水解法制得牛蒡苷元，以双黄连粉针为对照，用纸片扩散法进行抗菌实验。结果：牛蒡苷元和双黄连粉针的抑菌圈直径均大于15mm，对5种菌株均有高度敏感，具有很强的抑菌能力。牛蒡苷的抑菌圈稍小，直径为10～14mm，但也比较明显，属于中等敏感，抑菌能力良好。浓度为2：1、1：1和1：2的牛蒡子水煎液的抑菌圈较小，直径均小于10mm，属于低度敏感，抑菌能力较差。稀释至1：4的牛蒡子水煎液，对试验菌株基本无抑菌效果。结论：牛蒡子具有一定的抗菌作用，可以开发为一种新型的抗感染药物。

牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的测定

目的测定牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的含量。方法采用Agilent-C18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱;流动相：甲醇-水二元梯度洗脱,流速0.8m L·min-1,检测波长280nm。结果牛蒡苷和牛蒡苷元分别在0.36~2.8μg（r=0.9995）,0.006~0.56μg（r=0.9996）范围内线性关系良好。平均回收率牛蒡苷为100.3%,RSD为2.3%;牛蒡苷元为99.5%,RSD为2.9%。结论该方法简便、准确,实验结果可为牛蒡子的质量控制提供参考。

牛蒡苷与牛蒡苷元的荧光性质及中药牛蒡子中牛蒡苷的荧光法测定

牛蒡苷和牛蒡苷元的三维荧光图谱中均呈现2个荧光峰，激发波长λex分别为230nm和280nm，发射波长（λem）均为310nm。牛蒡苷的荧光远强于牛蒡苷元的荧光。溶液酸度对牛蒡苷和牛蒡苷元的荧光强度有明显影响。在pH〉13．0时，牛蒡苷的荧光增强，而牛蒡苷元的荧光猝灭。牛蒡子药材的三维荧光图谱和薄层荧光色谱表明，牛蒡子的荧光成分主要为牛蒡苷，而牛蒡苷元及其他共存组分在强碱性条件下对牛蒡苷的荧光无影响。据此，以甲醇为溶剂制备牛蒡子样品提取液，用水适当稀释并调节至pH13．0，在λex／λem=280nm／310nm波长下测定牛蒡苷的含量。在0．0145～2．03mg·L-1范围内，荧光强度与牛蒡苷浓度问呈良好线性，其线性方程为I-F=2．7＋148．7p（mg·L-1），相关系数（r）为0．999。用本法测得牛蒡子对照药材中牛蒡苷的含量为6．01％，平均加标回收率为98．1％。用薄层荧光扫描法对本方法进行验证，结果表明，本法结果可靠，可用于牛蒡子药材的质量检验。

牛蒡苷元体外抗流感病毒活性

目的 体外观察牛蒡苷元 (arctigenin,ACT)抗甲 1流感病毒作用 ,为进一步确认 ACT是牛蒡子 Fructusarctii解表功能有效成分提供实验依据。方法 采用 MDCK细胞培养法 ,通过红细胞凝集实验 ,以流感病毒血凝滴度为指标 ,观察 ACT对流感病毒复制的抑制作用。结果 ACT浓度 (m mol/ L )为 6 .7,13.4 ,2 6 .8和 5 3.6的血凝滴度抑制率 (% )分别为 0 .75 ,87.5和 10 0。结论 ACT在体外有直接抑制流感病毒复制的作用 ,是牛蒡子解表功能的有效成分 ,对其进行含量测定作为牛蒡子质量标准的定量指标是适宜和可行的。

维药毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元提取方法的筛选

目的确定维药毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的最佳提取方法。方法分别采用索氏提取法、超声波提取法、超声细胞粉碎提取法、微波提取法提取毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元,采用高分离度快速液相色谱仪测定牛蒡苷和牛蒡苷元的含量。结果通过不同提取方法的考察,发现超声细胞粉碎提取法提取的牛蒡苷与牛蒡苷元含量分别为65.852 5、5.127 8 mg/g,微波提取法提取的牛蒡苷与牛蒡苷元含量分别为105.977 5、3.835 0 mg/g,索氏提取法提取的牛蒡苷与牛蒡苷元含量分别为54.182 5、2.24 85 mg/g,超声波提取法提取的牛蒡苷与牛蒡苷元含量分别为33.727 5、1.225 1 mg/g,通过对比最终确定采用微波提取法为最佳提取方法。结论微波提取法简单、可靠、准确,可用于毛头牛蒡子中牛蒡苷和牛蒡苷元的提取。

响应面法优化闪式提取牛蒡苷的工艺优化

采用响应面分析法优化牛蒡苷闪式提取的工艺条件。以牛蒡苷得率为指标,在单因素试验基础上,应用Box-Benhnken中心组合设计试验,对提取工艺影响较大的乙醇体积分数、提取时间和液料比3个工艺参数进行优化。最佳工艺条件为:乙醇体积分数83%、提取时间93s、液料比17:1(mL:g)、牛蒡子粒径≤1.0mm,在此工艺条件下,牛蒡苷得率为31.62mg/g,与预测值31.72mg/g基本相符。闪式提取法是一种快速有效的提取牛蒡苷的方法。

AB-8型树脂对牛蒡苷吸附分离性能的研究

目的研究大孔吸附树脂分离纯化牛蒡子中牛蒡苷的性能。方法采用HPLC法测定牛蒡苷的含量。考察大孔吸附树脂对牛蒡苷的吸附性能及洗脱参数。结果AB-8型大孔吸附树脂对提取液中的牛蒡苷的最佳分离条件为:上柱液浓度为5.5mg/ml;流速为2BV/h,牛蒡苷的比吸附量为52.08mg/g,50%乙醇洗脱率为93.8%;牛蒡苷纯度可达55.2%。结论AB-8型大孔吸附树脂可用于牛蒡苷的分离富集。

RP-HPLC法同时测定桑杏口服液中芦丁、橙皮苷、牛蒡苷和甘草苷的含量

目的:建立同时测定桑杏口服液中芦丁、橙皮苷、牛蒡苷、甘草苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为276、348 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。结果:芦丁、橙皮苷、牛蒡苷、甘草苷检测质量浓度线性范围分别为1.068~10.68μg/m L(r=0.999 3)、9.320~93.20μg/m L(r=0.999 2)、46.91~469.1μg/m L(r=0.999 4)、0.511 0~5.110μg/m L(r=0.999 2);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3%;加样回收率分别为95.10%~101.90%(RSD=2.1%,n=9)、96.75%~101.80%(RSD=1.4%,n=9)、95.69%~100.00%(RSD=1.5%,n=9)、98.22%~104.60%(RSD=2.1%,n=9)。结论:该方法准确、灵敏、重复性好,可用于桑杏口服液中芦丁、橙皮苷、牛蒡苷、甘草苷含量的同时测定。

高压微波辅助提取牛蒡中牛蒡苷的研究(英文)

优化高压微波辅助提取牛蒡中牛蒡苷的最佳工艺参数,然后通过扫描电镜分析高压微波辅助提取对牛蒡籽细胞壁的影响,最后将高压微波提取和其他提取方法进行对比。结果表明:高压微波提取牛蒡苷的最佳工艺参数为微波功率700W、提取时间197s和提取压力0.4MPa,此时牛蒡苷得率为9.010%;与其他提取方法相比,高压微波辅助提取是十分有效的和快速的,因为在高压的环境下微波辐照导致细胞壁的破裂和组织结构的坍塌。因此高压微波辅助提取牛蒡中牛蒡苷是可行的。

不同牛蒡子中牛蒡苷的鉴别及含量考察

目的:采用薄层色谱法和高效液相色谱法对牛蒡子、炒牛蒡子及其免煎剂中主要成分牛蒡苷进行鉴别及含量测定。方法:鉴别采用TLC法,含量测定采用HPLC法。色谱柱:Diamonsil C_(18)柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(1:1.1);柱温:30℃;流速:1 ml·min^(-1);检测波长280 nm。结果:TLC图谱显示,斑点清晰。含量测定方法学考察结果,平均回收率为97.56%,RSD为1.41%(n=6)。牛蒡子生品与炮制品中牛蒡苷的含量均符合药典限度要求,免煎剂中牛蒡苷含量仅为炮制品中的1/3。结论:该实验方法简便、准确、专属性强,可用于牛蒡子及其制剂的质量控制;牛蒡子免煎剂的生产提取工艺有待于进一步完善。

感冒解毒灵颗粒中橙皮苷和牛蒡苷的HPLC法测定

建立了HPLC法同时测定感冒解毒灵颗粒中的橙皮苷和牛蒡苷。采用C18色谱柱,以1%乙酸-甲醇(52︰48)为流动相,检测波长280nm。橙皮苷和牛蒡苷在7.5～150和5～100μg/ml浓度范围内线性关系良好,平均回收率为99.2%和99.6%,RSD为0.64%和0.79%。

HPLC测定芙朴感冒胶囊中牛蒡苷和橙皮苷的含量

目的 :建立芙朴感冒胶囊 (芙蓉叶、牛蒡子、陈皮和原朴 )中有效成分牛蒡苷和橙皮苷的含量测定方法 ;方法 :采用HPLC法 ,C1 8柱 ,甲醇 水 (35 65)为流动相 ,检测波长为 2 80 ;结果 :此方法线性关系良好 ,牛蒡苷平均加样回收率为 1 0 0 .74% ,RSD为 1 .72 % ;橙皮苷 1 0 1 .2 8% ,RSD为 1 .43 % .结论 :本法简便快捷 ,精密度好 ,分离度良好 。