牛血小板衍化生长因子的提取和纯化

用酸醇抽提、离子交换吸附和凝胶层析方法，从新鲜牛血小板中提取、纯化牛血小板衍化生长因子（Ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，简称ＰＤＧＦ）。牛ＰＤＧＦ是一种热稳定的阳离子多肽，分子量为２．７８×１０＋４～３．１７×１０＋４ｕ，经巯基乙醇还原后分解为两条多肽链，分子量分别为１．５９×１０＋４ｕ和１．３９×１０＋４ｕ。

牛血小板衍化生长因子盖髓的实验研究

目的：观察牛血小板衍化生长因子（ｂＰＤＧＦ）覆盖狗暴露牙髓后的盖髓效果。方法：用活体狗牙作直接盖髓实验，并用组织学方法评价其效果。结果：术后６周，ｂＰＤＧＦ能够诱导牙髓成纤维细胞、内皮细胞增殖及抑制炎症反应，提高牙髓修复能力。结论：ｂＰＤＧＦ促进狗牙髓组织修复。

牛血小板衍化生长因子促进小鼠伤口愈合的研究

切除小白鼠背部皮肤制作创伤模型，人造皮肤覆盖伤口，并在人造皮肤下注射牛血小板衍化生长因子（ＰＤＧＦ）２μｇ／ｄ，共注射３ｄ．然后于术后３、７、１０ｄ对伤口新生上皮、肉芽组织生长情况进行观察，结果表明牛ＰＤＧＦ能促进肉芽组织生长、上皮再生，使伤口加速愈合。提示牛ＰＤＧＦ可应用于临床创伤治疗。

牛血小板衍化生长因子盖髓的临床研究

近年来，国内外动物试验均已表明：人血小板纯化的血小板衍化生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ简称ＰＤＧＦ），可诱导牙髓成纤维细胞发生趋化作用，并促进细胞的ＤＮＡ合成，对细胞基质有调节作用［１］。但是，牛ＰＤＧＦ对牙髓牙本...

牛血小板衍化生长因子等电点的分析

目的：测定分析牛血小板衍化生长因子的等电点。方法；用薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦的方法。结果：牛血小板衍化生长因子的等电点为９．６～１０．０。结论：牛血小板衍化生长因子是一种强碱性蛋白质，即强阳离子多肽，可能含有相对较多的碱性氨基酸。

牛血小板衍化生长因子的氨基酸组成分析

目的：测定分析牛血小板衍化生长因子的氨基酸组成。方法：采用酸水解方法。结果：牛血小板衍化生长因子含有１７种不同量的氨基酸，其中含有相对较多的碱性氨基酸。结论：该因子与人血小板衍化生长因子的氨基酸组成基本相近。

牛血小板衍化生长因子的高效液相色谱分析

目的：测定牛血小板衍化生长因子的分子量和纯度。方法：采用高效液相色谱法。结果：牛血小板衍化生长因子的分子量为２．７×１０４ｕ，纯度为８６．３４％。结论：与ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的测定结果基本一致。

血管通对实验性动脉粥样硬化家兔血管壁血小板衍化生长因子A、B及c－myc基因表达的影响

本实验采用斑点印迹杂交和原位杂交技术，进一步探讨血管通对与血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增生相关基因表达的影响。结果表明，高脂组家兔血管壁血小板衍化生长因子（ＰＤＧＦ）－Ａ的ｍＲＮＡ呈高表达，杂交阳性颗粒主要分布在动脉粥样硬化（ＡＳ）斑块边缘区及新生斑块区的ＳＭＣ胞浆内，而血管通组家兔血管壁ＰＤＧＦ－ＡｍＲＮＡ表达水平明显低于高脂组；高脂组血管斑块组织ｃ－ｍｙｃ的ｍＲＮＡ表达水平亦比正常组高，血管通组血管壁ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达水平下降。上述结果初步说明血管通可能是通过影响血管壁ＰＤＧＦ－Ａ、ｃ－ｍｙｃ的ｍＲＮＡ表达水平，以抑制ＶＳＭＣ增生，阻止ＡＳ形成。

白花丹醌对人肝星状细胞肿瘤坏死因子-α、血小板衍化生长因子BB表达的影响

目的:研究白花丹醌对瘦素(Leptin)刺激人肝星状细胞(HSC-LX2)肿瘤坏死因子(TNF-α)、血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)表达的影响。方法:体外培养HSC-LX2,瘦素刺激24 h,各药物与细胞共孵育24 h后,采用荧光实时定量PCR检测各组TNF-αmRNA、PDGF-BB mRNA的表达,免疫印迹法测定各组TNF-α和PDGF-BB蛋白表达情况。结果:白花丹醌作用24 h后,与模型组比较,HSC-LX2细胞中TNF-αmRNA和PDGF-BB mRNA的表达水平显著降低。免疫印记结果显示白花丹醌作用24 h后,HSC-LX2PDGF-BB蛋白表达较模型组显著降低(P<0.01)。结论:白花丹醌抑制HSC-LX,TNF-α、PDGF-BB mRNA和抑制PDGF-BB蛋白水平的表达可能是其抗肝纤维化的主要机制之一。

血小板衍化生长因子及其受体与疾病关系研究进展

血小板衍化生长因子(PDGF)是生长因子家族成员之一,是最早发现的原癌基因之一,被认为在间质细胞的迁移和增殖中起着重要的作用。PDGF及其受体还在胚胎形成时期的血管发生,肾脏、脑、心血管、肺泡的发育中扮演着重要的角色,现在的临床研究也显示,PDGF及其受体的异常表达与肿瘤、冠状动脉粥样硬化、肺纤维化、系膜增生性肾炎、创伤等疾病有关。

血小板衍化生长因子及其受体在糖尿病下肢动脉硬化闭塞症中的表达及意义

目的探讨2型糖尿病伴下肢动脉硬化闭塞症(arteriosclerosis obliterans,ASO)动脉硬化斑块中血小板衍化生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)及其受体(PDGFR)的表达及意义。方法 2007年1月至2009年12月复旦大学附属中山医院血管外科行介入治疗或手术治疗的ASO患者共22例,其中合并2型糖尿病者13例,无糖尿病者9例。共获取动脉硬化标本27个。对行手术治疗的ASO患者留取动脉内膜斑块,分别进行苏木精-伊红(HE)染色及免疫组化染色,通过光学显微镜了解PDGFR-α和PDGFR-β在动脉硬化标本中的表达。RT-PCR法检测PDGF A、B链mRNA。结果无糖尿病的ASO患者下肢动脉硬化斑块经HE染色可见少量脂质浸润,免疫组化染色见PDGFR-α、β少量表达;2型糖尿病伴下肢ASO患者下肢动脉硬化斑块,HE染色可见大量脂质浸润,免疫组化染色可见PDGFR-α、β均大量表达。2型糖尿病伴下肢ASO患者髂、股动脉段动脉硬化标本中PDGF B链mRNA的表达远远高于其在无糖尿病者中的表达,PDGF B链在腘动脉段的表达较髂、股动脉段明显增加。结论 2型糖尿病伴ASO患者下肢动脉硬化标本中存在PDGFR-α、β高表达,腘动脉标本中PDGF B链数量增多,提示该因子在此类患者中的病情进展中发挥重要作用。

高糖对肝星状细胞T_6表达结缔组织生长因子、血小板衍化生长因子BB及层黏蛋白和透明质酸的影响

目的研究高糖对肝星状细胞T(6HSC-T6)表达结缔组织生长因子(CTGF)、血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)及层黏蛋白(LN)、透明质酸(HA)的影响。方法按不同葡萄糖浓度进行分组,并设葡萄糖对照组和高渗对照组。处理HSC-T648和72h后,用免疫组织化学方法及放射免疫分析法测胞浆内CTGF和PDGF-BB的表达及细胞上清液中LN和HA的表达。结果HSC-T6在高糖环境中培养48h后,高浓度组(4500和6000mg/L)胞浆中CTGF和PDGF-BB表达较对照组和高渗对照组明显增加;在高糖环境中培养72h后,高浓度组(4500和6000mg/L)细胞上清液中HA及LN表达较对照组和高渗对照组增加。结论高血糖作为糖尿病的重要表现,可能通过刺激HSC分泌CTGF、PDGF-BB、HA及LN促进肝纤维化。

血小板衍化生长因子在细胞增殖和组织修复中的作用及机制

背景:细胞增殖和组织修复是一个复杂的过程,这期间有大量生长因子参与,并且这些因子在发挥本身功效时,同时还相互影响和制约,从而更好地促进细胞增殖和组织修复。目的:总结血小板衍化生长因子在细胞增殖和组织修复愈合过程中发挥的作用及其机制。方法:检索PubMed数据库、EMbase数据库1960-01/2010-10期间相关文章,检索词为"platelet-derived growth factor,cell proliferation,tissue repair"。同时检索中国生物医学文献数据库、中文科技期刊全文数据库、中文学术期刊全文数据库2000-01/2010-10期间相关文章,检索词为"血小板衍化生长因子"。结果与结论:血小板衍化生长因子是一种重要的促细胞分裂剂,可刺激各种类型细胞的分裂增殖。血小板衍化生长因子及其受体存在于机体的多种组织细胞,当机体受到一定的刺激时,血小板衍化生长因子与其受体结合,发挥作用,因此许多研究发现,在外科手术后和损伤修复过程中常伴随有局部血小板衍化生长因子基因表达量的升高和受体的上调,被称为损伤修复因子。但是它的具体作用机制尚不太明确,对细胞组织的增殖修复的认识还处于起始、发展阶段,还有许多的问题需要去探索研究。

中药调控血小板衍化生长因子逆转早期糖尿病肾病机制的实验研究

目的 :观察益气活血补肾的治糖保肾冲剂对早期糖尿病肾病 (DN)大鼠肾皮质血小板衍化生长因子 -β(PDGF - β)蛋白及PDGF - βmRNA表达的影响 ,探讨其作用机理。 方法 :实验采用链脲佐菌素 (STZ)及福氏佐剂(CFA)诱发糖尿病肾病大鼠模型 ,造模成功后随机分为正常组、模型组、中药组 (治糖保肾冲剂 )、西药组 (苯那普利 ) ,治疗 4周后检测大鼠肾皮质PDGF - β蛋白及PDGF - βmRNA表达。 结果 :中药组治疗后尿微量白蛋白 (Ualb)明显低于模型组 ,有统计学差异 (P <0 .0 5 ) ;中药组治疗后PDGF - β蛋白及PDGF - βmRNA表达均明显低于模型组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 )。结论 :提示治糖保肾冲剂治疗早期DN的机理与抑制PDGF - β蛋白及PDGF -

原位杂交检测胰腺癌血小板衍化生长因子及其受体的基因表达

用原位杂交（ＩＳＨ）法，采用ｃＤＮＡ探针（ＰＤＧＦＡ、Ｂ，ＰＤＧＦＲα、β）对１５例胰腺癌手术切除标本和８例正常胰腺组织标本进行检测。旨在观察胰腺组织和胰腺癌标本中血小板衍化生长因子（ＰＤＧＦ）及其受体（ＰＤＧＦＲ）的基因表达，探讨其在肿瘤侵袭和转移过程中的作用。结果表明，正常胰腺组织中ＰＤＧＦＡ较多，ＰＤＧＦＢ未检出，与胰腺癌组织相比较无明显差异。胰腺癌细胞中ＰＤＧＦ和ＰＤＧＦＲ均有表达，而ＰＤＧＦＲβ则比较多地定位于结缔组织中的纤维细胞和内皮细胞。结果提示，ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦＲ可能通过对胰腺癌细胞外基质蛋白降解代谢的影响。

化浊通脉散对下肢动脉硬化闭塞症家兔血小板衍化生长因子-a、-b表达的影响

目的研究化浊通脉散对下肢动脉硬化闭塞症(ASO)家兔的动脉硬化斑块中血小板衍化生长因子(PDGF)-a、-b表达的影响。方法选纯种新西兰雄性白兔50只,随机分为5组,每组10只:即正常组(A组)、模型组(B组)、化浊通脉散组(C组)、西洛他唑组(D组)、通塞脉片组(E组),予高脂饮食及股动脉球囊扩张术建立ASO家兔模型,检测药物干预前后家兔血脂的变化,应用实时荧光定量PCR技术测定药物干预后家兔股动脉标本PDGF-a、PDGF-b的相对表达量。结果化浊通脉散能有效地降低血脂如总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC),但升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)作用不明显,可以显著降低动脉硬化斑块中细胞间黏附分子(ICAM)-1表达的阳性率(P<0.01)。结论化浊通脉散具有保护动脉血管内膜,抑制动脉粥样硬化形成的作用。

移植肾慢性排斥反应与血小板衍化生长因子及胰岛素样生长因子表达的关系

目的 :探讨慢性排斥反应移植体动脉硬化与血小板衍化生长因子 A(PDGF A)链、胰岛素样生长因子 1(IGF 1)表达的关系。 方法 :采用免疫组化S P法研究 2 2 2只大鼠的移植动脉 ,用RIA法及S P法研究 2 0例慢性排斥反应移植肾组织及动脉中PDGF A、IGF 1的表达。 结果 :实验组 :术后 3天 ,PDGF A、IGF 1在大鼠移植动脉壁各层出现阳性表达 ;术后 7天 ,PDGF A在动脉壁各层表达为最高峰 ,IGF 1术后 2 1天达最高峰 ;术后 2 1天 ,内膜明显增生 ,面积比为 (2 6 4± 3 12 ) %。临床组 :移植肾动脉PDGF A表达主要集中在内膜 ,其次为外膜 ,中层较少 ,IGF 1在肾动脉血管壁全层中均呈阳性表达 ;而在肾组织中PDGF A与IGF 1的表达均主要集中在远曲小管、远直小管上皮细胞及肾小球毛细血管上皮细胞。 结论 :移植体动脉硬化过程中 ,细胞增生、内膜增厚、血管及肾组织纤维化与PDGF A、IGF 1表达关系密切。慢性排斥反应的移植肾动脉及肾组织中PDGF A、IGF 1呈高表达 ,且与术后早期排斥反应的发生频率及程度等因素密切相关。

胃癌组织血小板衍化内皮细胞生长因子、环氧化酶2的表达与血管生成和细胞凋亡的关系

目的:探讨血小板衍化内皮细胞生长因子(platelet-derived endothelial cell growth factor,PD-ECGF)和环氧化酶2 (Cox-2)在胃癌组织中的表达及与血管生成和细胞凋亡的关系. 方法:应用免疫组化技术对67例胃癌组织进行PD-ECGF、Cox-2及肿瘤组织微血管密度(microvascular density, MVD)检测,流式细胞术检测胃癌细胞凋亡指数(apoptosis index,AI). 结果:PD-ECGF的表达与胃癌淋巴结转移(P<0.05)、分化程度(P<0.05)及组织分型(P<0.05)显著相关,Cox-2的表达与胃癌淋巴结转移(P<0.01)显著相关;二者与MVD (P<0.01)显著正相关,与AI(P<0.01)显著负相关,二者共同表达阳性者MVD显著高于共同表达阴性者(P<0.01), 二者共同表达阳性者AI显著低于共同表达阴性者(P<0.01). 结论:胃癌组织中PD-ECGF和Cox-2可促进血管生成, 抑制胃癌细胞凋亡,二者起协同作用,促进胃癌的增生与转移.