一步离子交换层析法提纯牛视网膜可溶性抗原

目的 :探讨一步离子交换层析法提纯牛视网膜可溶性抗原 (S Ag)。 方法 :利用DEAESepharoseFF凝胶及自动层析系统一步层析分离提纯牛视网膜S Ag ,聚丙烯酰胺凝胶电泳确定分子量 ,等电聚焦电泳确定等电点。结果 :分析证实 ,S Ag分子量 5 2 0 0 0 ,等电点 6.2 0。利用提纯S Ag成功地诱发出实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎 (EAU)动物模型。结论 :经一步层析法提纯的S Ag 。

人视网膜S-AgP35诱发EAU动物模型的建立

目的采用合成的人视网膜S-Ag多肽片断第35段抗原决定簇(HS-AgP35)在Lewis大鼠建立实验性葡萄膜炎(EAU)模型。方法雌性Lewis大鼠30只,随机分成3组,每组10只。两实验组中HS-AgP35和BS-Ag分别与CFA混合,致敏Lewis大鼠,正常对照组不做处理。观察大鼠眼部体征和组织病理学改变;ELISA方法检测大鼠血清中抗HS-AgP35/BS-Ag抗体水平;RT-PCR方法检测大鼠脾组织内IL-4和IFN-γ mRNA表达水平。结果两种抗原均能致Lewis大鼠发生EAU,HS-AgP35组100%发病,BS-Ag组60%发病,两者比较差异无统计学意义(P>0.05);HS-AgP35组大鼠发病早(P<0.01),眼部体征和组织病理学改变严重(P<0.01),持续时间长(P<0.01)。两实验组大鼠血清中抗BS-Ag/HS-AgP35抗体水平均高于正常对照组(P<0.01),HS-AgP35组高于BS-Ag组(P<0.05)。两实验组大鼠脾组织中IFN-γ mRNA表达水平均高于正常对照组(P<0.01);HS-AgP35组IL-4 mRNA表达较高(P<0.01),BS-Ag组无明显变化(P>0.05)。结论抗原特异性高的HS-AgP35能诱导Lewis大鼠发生EAU,可建立具有典型眼部表现和组织病理学改变的动物模型。