牛骨胶原肽对成骨细胞分化的影响

目的研究3 mg/ml牛骨胶原肽(Bovine collagen peptides,BCP)对人成骨细胞(Human osteoblast,HOB),小鼠前成骨细胞系MC3T3分化的影响。方法 Western blot检测MC3T3细胞中BCP对Runx2表达的影响;分离培养HOB,利用对硝基苯磷酸比色法检测3 mg/ml BCP对碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)含量的影响;骨钙素(osteocalcin,OC)ELISA法测定BCP对OC含量的影响;茜素红矿化染色检测BCP对HOB矿化,然后用5%高氯酸进行脱色,用吸光度法检测BCP对人成骨细胞矿化程度。结果 Western blot检测表明,14 d后BCP处理的MC3T3细胞中Runx2蛋白表达水平(0.178±0.201)与CN组(0.146±0.582,P>0.05)比较,有增高趋势。ALP染色结果表明,BCP混合物处理组的ALP的染色面积(33859±8221)在第10d与CN组(19900±2796)相比,显著增加(P<0.05),表明BCP混合物能促进人成骨细胞早期的ALP表达量。BCP混合物处理组的OC吸光度值(0.137±0.014)在第14d高于CN组(0.086±0.023,P<0.05),表明BCP混合物能促进人成骨细胞晚期阶段的OC含量。茜素红矿化染色结果表明,3mg/ml BCP能显著促进HOB的矿化骨基质的形成。当使用5%的高氯酸脱色后,BCP处理组在490 nm处测吸光度值(0.579±0.093)显著高于CN组(0.193±0.021,P<0.01),表明BCP混合物能促进人成骨细胞的矿化。结论 BCP在成骨细胞分化和矿化骨基质的形成中发挥了积极作用。综合上述结果,本文为BCP混合物在骨关节炎和骨质疏松症潜在的预防和治疗提供了分子机理。

牛骨胶原低聚肽促进皮肤切口手术模型小鼠术后伤口愈合的机制研究

探讨牛骨胶原低聚肽促进皮肤切口手术模型小鼠术后伤口愈合的可能机制。96只SPF级ICR雄性小鼠随机分为空白对照组和3个牛骨胶原低聚肽剂量组(低剂量、中剂量、高剂量,灌胃剂量分别为0.375、0.75、1.5 g/kg·bw),每组24只。建立小鼠背部皮肤切口手术模型,术后连续灌胃11 d,并在术后第3、7、11 d分批处死8只小鼠进行相关指标的检测。结果发现,术后第11 d,牛骨胶原低聚肽高剂量组小鼠抗张力强度显著高于空白对照组(p<0.05);术后第3、7和11 d,低剂量、中剂量和高剂量牛骨胶原低聚肽能够显著增加小鼠血清中白蛋白和前白蛋白浓度(p<0.05);术后第3、7和11 d,中剂量和高剂量牛骨胶原低聚肽能够显著促进血清白细胞介素-10的表达水平(p<0.05),术后第7、11 d,牛骨胶原低聚肽能够显著抑制肿瘤坏死因子-α的表达水平(p<0.05)。因此,牛骨胶原低聚肽可以有效促进小鼠伤口愈合,其作用机制可能与其提高小鼠营养状况及抑制炎症反应有关。

牛骨胶原低聚肽对术后小鼠伤口愈合作用初步探讨

目的:探讨牛骨胶原低聚肽对小鼠术后伤口愈合的影响。方法:将180只ICR雄性小鼠随机分为6组,包括1个空白对照组(蒸馏水)和5个BCOPs剂量组(0. 375、0. 75、1. 5、3. 0、6. 0g/kg·BW),每组30只。进行深达腹腔的背部切口手术,并分别于术后第3、7、11d处死动物,每个时间点10只。术后观察小鼠一般情况并进行皮肤切口抗张力强度检测、血清PA、IL-10、TNF-α检测以及HE染色。结果:牛骨肽剂量组切口抗张力强度呈现大于对照组的趋势; POD3,牛骨肽剂量组血清PA浓度明显大于对照组(P <0. 05);与对照组相比,牛骨肽剂量组可见小鼠血清IL-10浓度明显高于对照组(P <0. 05),TNF-α浓度明显低于对照组(P <0. 05)。结论:牛骨肽可在术后早期提供营养支持,并可能通过促进IL-10表达、抑制TNF-α表达的方式促进伤口愈合。

牛骨胶原低聚肽对小鼠伤口愈合作用的研究

目的:研究牛骨胶原低聚肽对正常小鼠伤口愈合的影响及探讨其可能作用机制。方法:SPF级ICR雄性小鼠240只,随机分为1个对照组和5个BCOPs剂量组(0.375、0.75、1.5、3.0、6.0g/kg·BW)。用打孔器建立皮肤打孔手术模型,术后连续灌胃16 d,并在术后第4、8、12、16 d分批处死老鼠,测量不同时间点小鼠伤口剩余面积,检测血清中基质细胞衍生因子(SDF-1α)浓度,并进行HE染色行病理组织学观察。结果:与对照组相比,牛骨胶原低聚肽组小鼠术后伤口面积明显缩小(P<0.05),血清SDF-1α浓度显著增加(P<0.05)。并且同一时间点HE染色显示,牛骨胶原低聚肽组小鼠皮肤伤口上皮化水平、血管增生及纤维母细胞水平均优于对照组。结论:牛骨胶原低聚肽具有促进小鼠术后伤口愈合的作用,其机制可能与提高血清SDF-1α浓度有关。

骨胶原肽与柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失的预防及治疗效果

目的将牛骨胶原肽(collagen peptides,CP)与柠檬酸钙(calcium citrate,CC)联用给去卵巢(ovariectomy,OVX)大鼠进行灌胃以评价对OVX大鼠骨丢失预防及治疗是否比单独给药更有效。方法将80只12周龄Sprague-Dawley大鼠分为预防(术后2周开始灌胃,1次/d,连续3个月)及治疗(术后3个月开始灌胃,1次/d,连续3个月)2种给药方案,每种给药方案分为以下5组(n=8):假手术组(Sham),去卵巢组(OVX),OVX大鼠服用CP组(750 mg/kg CP),OVX大鼠服用CP(750 mg/kg)和CC(75 mg/kg),去卵巢大鼠服用CC(75 mg/kg)。采用全自动生化分析仪检测血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量,放射免疫法检测血清骨钙素(osteocalcin,OC)含量,双能X射线骨密度仪(dual energy X-ray absorptiometry,DXA)检测大鼠股骨骨密度(bone mineral density,BMD),骨生物力学测定股骨生物力学指标。结果CP-CC处理预防及治疗组OVX大鼠后呈现出骨保护效果:显著抑制OVX大鼠增加的血清ALP含量,显著抑制OVX大鼠股骨BMD的降低,显著抑制治疗组OVX大鼠股骨断裂强度的降低(P<0.05)。CP处理OVX大鼠CP后,显著抑制OVX大鼠增加的血清ALP含量,显著抑制治疗组OVX大鼠股骨BMD的降低;CC处理OVX大鼠后,显著抑制预防组OVX大鼠股骨BMD的降低,股骨断裂强度显著增加(P<0.05)。结论柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失预防具有抑制效果,而骨胶原肽联合柠檬酸钙对去卵巢大鼠骨丢失预防及治疗具有更好的效果,该结果为绝经后骨质疏松妇女骨丢失的防治提供了理论依据。

不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的影响研究

比较研究了海蜇、牛骨和鳕鱼皮3种不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的修复作用。发现3种胶原肽均可显著提高光老化细胞的细胞增殖活性,经紫外照射后,人皮肤成纤维细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及透明质酸合成量明显降低,表现为差异性极显著(P<0.01),同时细胞内抗氧化酶系T-SOD、CAT和GSH-Px的抗氧化酶活力也都降低。当加入3种胶原肽后,光老化细胞的Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及透明质酸合成量与细胞内T-SOD、CAT和GSH-Px酶活力均有所增加,且改善光老化细胞内抗氧化酶活力与增加细胞胶原分泌效果较好的是海蜇胶原肽。

胶原蛋白肽与柠檬酸钙联用抑制去卵巢大鼠骨丢失

胶原蛋白肽与柠檬酸钙是治疗骨质疏松最广泛应用的骨骼健康补充剂。目前,普遍的用药方式通常是只服用其中的一种,而胶原蛋白肽与柠檬酸钙联合服用,是否更有利于阻止骨质流失,还未见报道。本文采用胶原蛋白肽与柠檬酸钙联用,考察两者之间的协同作用对治疗去卵巢大鼠骨质流失的影响。经双能量X射线骨密度仪(DXA)和微机断层扫描检测(μCT)结果分析,结果表明:胶原蛋白肽与柠檬酸钙的协同作用,导致小鼠股骨密度增加,股骨远端微结构强度增强。由于去卵巢大鼠模型与女性绝经期骨质流失类似,因此本研究对治疗绝经期后女性的骨质酥松也具有潜在的指导意义。

小麦肽提升胶原肽抑制酪氨酸酶活性能力的研究

由于激素或环境刺激导致的黑色素过量累积会引起皮肤色素沉着类的病症,甚至可诱发黑色素瘤的生成。而皮肤细胞中活性氧的过度积累会导致线粒体及DNA损伤,造成皮肤的快速衰老。从天然产物中筛选具有抑制黑色素合成及抗氧化的活性因子成为皮肤美白的关键。以牛骨胶原肽和小麦肽为原料制备了复合肽,并对其体外酪氨酸酶抑制活性及抗氧化性进行了测定,结果表明在30g胶原肽中加人1g的小麦肽(WPCP-1.0)时,复合肽表现出稳定的协同作用,可显著抑制酪氨酸酶活性(IC_(50)=4.96mg/mL),且清除过氧自由基的IC_(50)值为7.10mg/mL。通过胃肠模拟消化发现消化后消化的复合肽的酪氨酸酶抑制活性和抗氧化活性仍能保持较高水平。细胞实验结果表明复合肽对B16细胞有较强的清除效果,从而具有较高的美白潜力。本研究为牛骨胶原肽和小麦肽在保护皮肤中的应用提供了新策略。

玉米肽/胶原蛋白肽解酒作用的研究

酒精的大量摄入会引起酒精性肝炎、肝硬化等疾病的发生,并且在酒精代谢过程中产生的过量自由基会进一步造成酒精性疾病的加剧。玉米肽具有解酒保肝功能,能够有效解决饮酒对人体造成的不良影响。本文通过将玉米肽和牛骨胶原蛋白肽进行复合,进一步探究了复合肽对乙醇脱氢酶活性和模拟胃中乙醇渗透吸收的影响,并对复合肽的羟自由基清除能力和模拟消化稳定性进行了研究。结果表明,复合肽表现出较两种肽更好的乙醇脱氢酶活性促进作用,有效降低了模拟胃液中乙醇的吸收速率,并对羟自由基具有明显的清除能力。同时,复合肽能够在模拟消化过程中保持良好的乙醇脱氢酶活性和羟自由基清除能力,表明所制备的复合肽能够应用在解酒功能食品中,发挥其解酒潜力。