HPLC法同时测定牛黄清感胶囊中8种有效成分的含量

[目的]建立牛黄清感胶囊HPLC含量测定,用于该制剂的质量控制。[方法]运用Waters Alliance 2695高效液相色谱仪,采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液,梯度洗脱,柱温40℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为350 nm。[结果]建立同时测定牛黄清感胶囊8个成分隐绿原酸,绿原酸,异绿原酸C,连翘酯苷A,黄芩苷,黄芩素,汉黄芩苷和汉黄芩素的方法。[结论]该方法稳定、准确、重现性好,专属性强,可用于牛黄清感胶囊的质量控制。

牛黄清感胶囊治疗急性咽喉炎的临床价值探究

选择2011年1月1日~2012年12月20日我院急性咽喉炎患者208例,随机分成对照组96例和治疗组112例。治疗组112例患者采用牛黄清感胶囊进行治疗,对照组96例患者使用常规西药（乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸苯那敏等复合制剂）进行治疗,观察比较两组患者治疗有效率。结果两组患者临床疗效比较,治疗组治疗有效率为93.75%,对照组治疗有效率为79.17%。治疗组优于对照组,组间差异有统计学意义（P〈0.05）。牛黄清感胶囊治疗急性咽喉炎,效果显著,安全可靠,值得临床推广。

UPLC-Q-TOF/MS法分析牛黄清感胶囊成分

目的采用UPLC-Q-TOF/MS法分析牛黄清感胶囊的化学成分。方法分析采用BEH C_(18)色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 7μm);流动相0. 1%甲酸水-0. 1%甲酸乙腈,梯度洗脱。质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正离子模式下采集数据。通过Peakview 2. 0/masterview1. 0软件,依据精确质量数和同位素峰度比确定分子式。通过二级谱图比对、对照品裂解规律分析,结合文献报道确定结构式。结果从中鉴定推断了54个化合物,其中14个化合物来自黄芩,15个化合物来自金银花,8个化合物来自连翘,2个化合物为金银花与连翘共有,9个化合物来自人工牛黄,2个化合物来自珍珠母,其余4个化合物来源于数据库检索。结论该方法检测快速、准确,为牛黄清感胶囊的化学成分鉴定提供新思路,物质基础的确定为质量评价指标选择及作用机制深入研究奠定基础。

牛黄清感胶囊HPLC指纹图谱研究

目的:建立牛黄清感胶囊HPLC指纹图谱,用于该制剂的质量控制。方法:运用Waters Alliance 2695高效液相色谱仪,采用C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液,梯度洗脱,柱温40℃,流速为1.0 mL,min-1,检测波长为350 nm。结果:测定10批牛黄清感胶囊的HPLC指纹图谱,建立了17个特征共有峰,其中9个成分为新绿原酸,绿原酸,异绿原酸A、B和C,咖啡酸,连翘酯苷A,黄芩苷和黄芩素。结论:该方法稳定、准确、重现性好,专属性强,可用于牛黄清感胶囊的质量控制。

基于超高效液相-四极杆飞行质谱联用技术的牛黄清感胶囊有效成分含量测定方法研究

目的:建立同时测定牛黄清感胶囊中7种成分的含量的方法,进而用于该制剂的质量控制。方法:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)联用技术。Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100mm×2.1mm,1.7μm),AQUITY UPLC BEH C18 VanGuard Pre-Column预柱(100mm×2.1mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水(A)-0.1%甲酸乙腈(B),梯度洗脱,流速为0.3mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL。质谱采用电喷雾(ESI)离子源,离子化模式为电喷雾正离子模式。一级质谱母离子扫描范围为80~1500数据采集软件为Analyst TF1.6 software;数据处理软件系统为Peakview 2.0/masterview 1.0software、Markerview 1.2.1。结果:3批次牛黄清感胶囊中7个成分,白杨素、异亮氨酸、当药苷、金丝桃苷、牛黄胆酸钠、咖啡酸、苯丙氨酸进样量检测线性范围分别为0.0206~0.309、0.0106~0.159、0.021~0.315、0.021~0.315、1.03~15.45、0.041~0.615、0.0105~0.1575mg(r≥0.9994),含量分别为0.158、0.0418、0.2345、0.2489、9.6476、0.0189、0.0139mg/g。精密度、稳定性(24h)、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6),平均加样回收率为99.2%~100.7%,RSD<2.0%(n=6)。结论:该方法稳定、准确、重现性好,专属性强,可用于牛黄清感胶囊的质量控制。

HPLC波长切换法测定牛黄清感胶囊中3个成分的含量

目的建立HPLC波长切换法测定牛黄清感胶囊中绿原酸、黄芩苷、连翘苷3个成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5min,5%A;5~15min,5%~18%A;15~25 min,18%~28%A);波长:0~10.0 min,327nm;10.0~16.5 min,280nm;16.5~25.0min,277nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃;进样量:10μl。结果绿原酸、黄芩苷、连翘苷的线性范围分别是0.1063~2.126μg(r=0.9998)、0.3007~6.013μg(r=0.9999)、0.05180~1.036μg(r=0.9996);平均加样回收率(n=6)分别为98.01%、98.83%、98.04%,RSD分别为1.31%、0.77%、1.29%。结论该方法操作简单,重复性好,可用于牛黄清感胶囊的质量控制。

高效液相色谱法测定牛黄清感胶囊中连翘苷的含量

目的采用高效液相色谱法测定牛黄清感胶囊中连翘苷的含量。方法C18化学键合硅胶柱分离连翘苷,Kramasil C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),乙腈-水(25:75)为流动相,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:277 nm。结果连翘苷峰与其他组分峰的分离度为6.0,理论塔板数以连翘苷峰计算为12 500;平均回收率为98.6%,RSD为0.5%(n=5),连翘苷进样量与吸收面积分值呈良好的线性关系,线性范围0.1～2.0μg。结论该法测定牛黄清感胶囊中连翘苷的含量,结果准确,重复性好。

牛黄清感胶囊对呼吸道合胞病毒体外预防作用的实验研究

检测牛黄清感胶囊对呼吸道合胞病毒(RSV)的预防的作用,为抗病毒药物的筛选、研发提供实验依据。在VERO细胞培养内,采用病毒细胞形态变化CPE法、MTT染色法,检测不同浓度的牛黄清感胶囊对呼吸道合胞病毒(RSV)的预防作用。实验分一次用药组和三次用药组,计算药物的半数有效浓度IC50,最小有效浓度MIC及治疗指数TI。体外抑制和预防呼吸道合胞病毒的药效实验结果显示"牛黄清感胶囊"具有抑制和预防呼吸道合胞病毒的作用。

牛黄清感胶囊对甲型H3N2流感病毒抑制和预防作用的实验研究

目的检测牛黄清感胶囊对甲型A/Brisban/10/2008(H3N2)流感病毒抑制和预防的作用,为抗病毒药物的筛选、研发提供实验依据。方法在MDCK细胞培养内,采用病毒细胞形态变化CPE法、MTT染色法,检测不同浓度的牛黄清感胶囊对甲型A/Brisban/10/2008(H3N2)流感病毒的抑制和预防作用。实验分1次用药组和3次用药组,计算药物半数有效浓度IC50,最小有效浓度MIC及治疗指数TI。结果体外抑制甲型H3N2流感病毒实验中,"牛黄清感胶囊"单次用药组TI为27,三次用药组为TI为43。体外预防甲型H3N2流感病毒实验中,"牛黄清感胶囊"单次用药组TI为21.3,三次用药组为TI为27。结论体外抑制甲型A/Brisban/10/2008(H3N2)流感病毒的药效实验结果显示"牛黄清感胶囊"具有抑制和预防甲型流感病毒的作用。

基于聚类分析的牛黄清感胶囊HPLC指纹图谱研究

目的:建立牛黄清感胶囊的指纹图谱,采用相似度计算和聚类分析的方法评价牛黄清感胶囊的质量,为其真伪鉴别及质量控制提供依据。方法:采用HPLC法。色谱柱为Waters Sunfire ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;检测波长:210 nm,柱温:30℃,进样量:10μl,对15批牛黄清感胶囊样品进行分析,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统结合聚类分析对其质量进行评价。结果:建立了牛黄清感胶囊的指纹图谱,确定了19个共有峰,指认了其中5个色谱峰,15批牛黄清感胶囊与对照图谱的相似度为0.924~0.999,聚类分析可将不同生产时间段的牛黄清感胶囊很好的分为3类,且分类结果与相似度结果一致。结论:所建立的牛黄清感胶囊指纹图谱分析方法全面、准确、稳定,结合聚类分析研究可有助于牛黄清感胶囊的整体质量评价,同时为其质量评价提供一种有效手段。

HPLC法考察60Co辐照对牛黄清感胶囊中4种有效成分的影响

目的:考察60Co辐照灭菌对牛黄清感胶囊中4种有效成分含量的影响。方法:选择0,5,8,10 k Gy 4种辐照剂量对牛黄清感胶囊进行辐照,比较辐照前后需氧菌总数和霉菌、酵母菌总数的变化;采用HPLC法,Agilent ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,波长:210,447 nm;流速:1.0 ml·min^-1;柱温:30℃,进样量:10μl,比较有效成分绿原酸、黄芩苷、连翘苷、胆红素辐照前后含量的变化,并将所得数据用SPSS 22.0软件分析。结果:绿原酸、黄芩苷、连翘苷、胆红素线性范围分别为0.011~0.443μg·ml^-1(r=0.9995)、0.470~18.785μg·ml^-1(r=0.9997)、0.015~0.601μg·ml^-1(r=0.9989)、0.024~0.961μg·ml^-1(r=0.9991);平均加样回收率分别为100.79%、102.20%、99.43%、100.39%,RSD均小于2.0%(n=9)。牛黄清感胶囊经5 k Gy辐照剂量灭菌可达到中国药典2015年版微生物限度要求;经60Co辐照(0,5,8,10k Gy)后,牛黄清感胶囊中的绿原酸、黄芩苷、连翘苷含量辐照前后变化均无统计学意义(P>0.05);胆红素含量在辐照剂量8k Gy时辐照前后含量差异有统计学意义(P<0.05)。结论:低剂量60Co辐照对牛黄清感胶囊的灭菌效果显著,在辐照剂量不超过5 k Gy时,绿原酸、黄芩苷、连翘苷、胆红素的含量变化不显著,可为牛黄清感胶囊辐照灭菌手段提供参考。

一测多评法同时测定牛黄清感胶囊中5个指标性成分的研究

目的:建立一测多评(QAMS)法测定牛黄清感胶囊中5个成分(绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)的含量。方法:采用HPLC法,以Agilent XDB C_(18)(2)柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 ml·min^(-1);检测波长为278 nm,柱温为35℃,进样量为10μl。以汉黄芩素为参照物,应用QAMS法测定5个指标性成分之间的相对校正因子,分别采用外标法和QAMS法测定牛黄清感胶囊中5个指标性成分的含量,并对2种方法计算结果进行对比分析,以验证一测多评法的实用性与稳定性。结果:建立QAMS法用于测定牛黄清感胶囊中5个指标性成分的含量,并对6批牛黄清感胶囊进行测定,其计算值与测定值的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:所建立的QAMS法简单、有效、结果准确,可用于牛黄清感胶囊的质量控制,并为后续的一测多评的研究提供参考价值。

牛黄清感胶囊毒理研究

考察长期应用受试制剂牛黄清感胶囊毒副作用。受试制剂较长时间(3个月)服用未见明显的肝脏、血液系统、胃、肠等损伤和毒副作用。

牛黄清感胶囊血中移行成分经时变化规律研究

目的:通过分析牛黄清感胶囊血中移行成分的经时变化规律,明确牛黄清感胶囊体内直接作用物质基础。方法:以中药血清药物化学理论为指导,以UPLC-Q-TOF-MS技术为核心,对大鼠口服牛黄清感胶囊后体内相对含量较高的12个血中移行成分经时变化规律进行研究,分析阐明其体内变化规律。结果:木犀草素、胆酸、苯丙氨酸、绿原酸、牛黄胆酸、甘氨胆酸具有易于检测,吸收较快,血药浓度较大,消除时间较长等特点,且具有良好的药理活性,初步确定这些成分为牛黄清感胶囊潜在的有效成分。结论:通过血中移行成分的经时变化规律分析为牛黄清感胶囊的药效物质基础研究提供备选化合物。

HPLC法同时测定牛黄清感胶囊中6个成分的含量

目的:建立同时测定牛黄清感胶囊中绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷6个成分的方法。方法:采用Platisil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~20 min,10%A→16%A;20~40 min,16%A→30%A;40~60 min,30%A→40%A;60~80 min,40%A),流速1mL·min^(-1),变换波长检测(278 nm处检测绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素;210 nm处检测连翘苷)。结果:绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷的线性范围分别为0.016 4~0.328μg(r=0.999 6)、0.106~2.12μg(r=0.999 6)、0.042~0.84μg(r=0.999 7)、0.026 3~0.526μg(r=0.999 8)、0.015~0.3μg(r=0.999 4)、0.033 3~0.666μg(r=0.999 4),平均回收率(n=9)分别为99.6%(RSD=1.2%)、99.3%(RSD=1.1%)、100.7%(RSD=1.4%)、99.6%(RSD=1.2%)、100.2%(RSD=1.5%)、99.6%(RSD=1.8%)。3批样品中绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、连翘苷的含量分别在0.755~0.762、34.218~34.230、1.401~1.404、0.774~0.788、0.511~0.522、0.732~0.740 mg·g^(-1)。结论:经方法学验证,本法可作为牛黄清感胶囊质量控制的一个有效的方法。

牛黄清感胶囊溶液体外抑制新型冠状病毒活性效果分析

目的研究中药制剂牛黄清感胶囊对新型冠状病毒的抑制作用,可为药物筛选和新冠肺炎治疗提供实验依据。方法用Vero-E6细胞分离和培养新型冠状病毒GS048株,制备的牛黄清感胶囊溶液体外与新冠病毒共孵育后测定病毒滴度改变;将含有药物的培养液作用于新型冠状病毒接种的细胞,测定牛黄清感胶囊溶液在细胞培养中对新型冠状病毒增殖的抑制作用。结果实验发现药物浓度低于274.3μg/ml时对细胞无毒害作用,药物和新型冠状病毒共孵育后可使病毒滴度从10^(4.4)TCID_(50)/ml下降至10^(2.8)TCID_(50)/ml;体外新冠病毒细胞培养实验中,加入药物使细胞病变数减少,病毒滴度对数值下降了40%~50%。结论牛黄清感胶囊在体外具有部分抑制新冠病毒的能力,可作为候选药物进一步验证对新冠肺炎的治疗作用。

牛黄清感胶囊HPLC特征指纹图谱研究及多成分含量测定

目的建立牛黄清感胶囊HPLC指纹图谱,并测定其中7种有效成分的含量。方法采用HPLC,色谱柱为Agilent SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱;检测波长210 nm;柱温30℃。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)"进行相似度分析,并对指认的7个指标成分进行定量测定研究。结果在特征图谱研究中,共确定牛黄清感胶囊HPLC指纹图谱22个共有峰,通过与对照品比较指认其中7个共有峰分别为绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷和汉黄芩素,利用相似度软件对12批样品指纹图谱进行分析,各批样品相似度均>0.90。定量分析条件通过方法学验证,平均加样回收率为99.1%~104.8%,RSD为1.30%~1.88%。结论所建立的HPLC指纹图谱和含量测定分析方法可用于牛黄清感胶囊质量控制。

牛黄清感胶囊质量标准研究

目的：建立牛黄清感胶囊质量控制标准。方法：采用薄层色谱法和紫外-可见分光光度法对制剂中的人工牛黄进行定量控制,从而保证药品的质量。结果：薄层色谱可成功鉴别处方中的人工牛黄,利用紫外-可见分光光度法中的建立本制剂的人工牛黄定量标准;胆酸在0.00677~0.0338mg/ml浓度范围内与吸收度有良好线性关系,r=0.9994。结论：该方法对提高产品质量有一定意义。

牛黄清感胶囊粉末包衣工艺研究

目的:为提高牛黄清感胶囊的稳定性,保证药品的质量。方法:采用正交设计法,以尤特奇EPO水分散体作为包衣材料,对内容物中的中药浸膏粉进行粉末包衣工艺进行优选。结果:中药浸膏粉最佳包衣工艺条件:是采用底喷包衣,包衣进风温度35℃,喷气压力0.1MPa,喷液速率4.5g/min,包衣增重40%,重复包衣4次。结论:可有效提高产品质量。

牛黄清感胶囊包衣粉末质量控制研究

目的：建立牛黄清感胶囊内容物包衣粉末的定量控制标准。方法：采用高效液相色谱法在274nm处测定包衣粉末中黄芩苷的含量,十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇：水：磷酸（40：60：0.2）为流动相;流速0.8ml/min。结果：包衣粉水分控制在2%以下,稳定性良好;黄芩苷含量控制在每粒含10mg以上,黄芩苷在46.88~140.6μg/ml浓度范围内与峰面积有良好线性关系,r=0.9998,回收率为98.9%,RSD为1.3%。结论：用此方法控制包衣粉的质量,操作简便、方法可靠,有良好重现性。