牛O型口蹄疫灭活疫苗效力检验方法的改进

以10000 ID50剂量的乳鼠肌肉毒通过颈部肌肉注射途径攻击牛,取代用牛舌皮强毒在牛舌面涂抹和上唇划痕各1ml的方法,进行了牛O型口蹄疫灭活疫苗效力检验试验。结果对照组牛3/3发病,免疫组牛均100%保护。

猪口蹄疫O型灭活疫苗质量控制与安全性评估的技术研究

在生猪养殖业的发展过程中,猪疫病对产业的健康发展产生了严重威胁。疫苗作为生猪疫病防控的重要手段,其质量控制与安全性评估显得尤为重要。以猪口蹄疫O型灭活疫苗为研究对象,从质量控制和安全性评估2个方面进行了技术分析,验证了其质量。

猪瘟活疫苗-猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗联合免疫效果的评价

为建立一种既有效又简便的猪瘟活疫苗(CSF)和猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗(FMD O-A)联合免疫方法,达到“一针多防”的目的,通过动物免疫试验,评价了CSF和FMD O-A联合免疫的可行性。采用左、右各一针同步2点接种试验猪群(联合免疫),以2种疫苗分别单独免疫的猪群为对照,在免疫前0 d、免疫后14、40、60和90 d采集血清检测2种疫苗对应的抗体。经统计学分析发现,2种疫苗的联合免疫不影响其抗体的产生,并且能够保持抗体在猪群个体间的稳定分布。

牛O型A型口蹄疫双价灭活疫苗研究──—A型毒种的选择

收集保藏的６株口蹄疫（ＦＭＤ）Ａ型牛源强毒，适应乳鼠５代，转适８ＨＫ—２１细胞单层１０代，用弗氏完全佐剂制成疫苗免疫豚鼠。综合分析其对实验动物及制苗细胞的适应性、病毒感染性滴度、豚鼠抗强毒攻击的免疫原性、血清中和抗体应答的抗原广谱杜表明，在６株毒中ＡＦ／７２具有更好的适应性，病毒滴度高，免疫原性好，抗原谱广。

猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗的临床免疫效果评价

为了评价猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗的临床免疫效果,使用该疫苗对36头健康仔猪进行免疫,并于首免后28 d进行二次免疫,采用液相阻断法检测免疫前后血清中的O型及A型中和抗体的滴度,同时采用ELISA法检测免疫前后猪只中IFN-γ、IL2、IL4、IL18这四种细胞因子的表达情况。结果显示,首免后O型、A型抗体滴度相对免疫前极显著提高(P<0.01),二免28 d后O型、A型抗体滴度相对二免前显著提高(P<0.05);首免后IFN-γ、IL2两种细胞因子的浓度相对免疫前显著提高(P<0.05),IL4、IL18两种细胞因子的浓度相对免疫前极显著提高(P<0.01),二免28 d后IFN-γ、IL2、IL4、IL18四种细胞因子的浓度相对二免前极显著提高(P<0.01)。本研究表明,在免疫猪口蹄疫O型、A型二价灭活疫苗后,可以快速激发特异性的免疫应答,O型、A型的中和抗体及IFN-γ、IL2、IL4、IL8细胞因子都获得显著提高,并且二免后提高更为显著。

奶牛口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗免疫效果对比试验

为了解兰州地区奶牛口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗的免疫效果,科学评价免疫质量以及合理制定口蹄疫疫苗免疫程序,本研究应用液相阻断ELISA和O型正向间接血凝检测方法分别对目前兰州地区使用的4种口蹄疫二价灭活疫苗的免疫效果进行了对比。结果表明,兰州地区使用的4种口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗的O型和亚洲Ⅰ型口蹄疫保护性抗体诱导能力参差不齐,其中以B公司O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗的抗体诱导能力最强,其他3个公司的疫苗则相对较差。

牛羊注射口蹄疫O型-亚洲Ⅰ型二价灭活疫苗免疫抗体消长检测与分析

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的以偶蹄动物为主的急性、热性、高度传染性疫病,对畜牧业危害极大.为了科学制定免疫程序,有效防控疫病,2012年春防中,我们开展了牛羊注射口蹄疫O型—亚洲1型二价灭活疫苗免疫抗体消长检测试验.现将检测结果分析报告如下：

牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活疫苗免疫持续期试验

对自行研发的实验室条件下制备的牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活苗进行了3个批次疫苗免疫持续期试验,同时设置现行常用的油佐剂灭活苗作为对照组。其评估方法为在首免后每间隔第15天采用液相阻断ELISA试剂盒检测血清中O型口蹄疫抗体水平,并选择在一定免疫时段进行攻毒保护试验以确认疫苗的免疫效果,真实评价牛O型口蹄疫AD10新型佐剂灭活苗免疫牛的免疫持续期和对口蹄疫的抗感染能力。试验结果表明,本次试验AD10佐剂免疫组与现行常用油佐剂组免疫抗体水平和免疫持续期大致相同,对幼畜的免疫程序应在首次免疫60d后进行第二次加强免疫,免疫效果可达到6个月的免疫持续期。

乌鲁木齐地区牛口蹄疫O型Asia-Ⅰ型双价灭活疫苗免疫效果的检测与分析

[目的]研究乌鲁木齐地区牛口蹄疫O型Asia-Ι型双价灭活疫苗的免疫效果。[方法]应用液相阻断ELISA法检测492份口蹄疫O型Asia-Ι型双价灭活疫苗的免疫效果。[结果]免疫牛群对牛口蹄疫O型的平均免疫合格率为97.6%,对Asia-Ι型的平均免疫合格率为97.7%。[结论]牛口蹄疫O型Asia-Ι型双价灭活疫苗可以使免疫牛产生有效的免疫保护。

不同厂家猪O型口蹄疫灭活疫苗免疫效果监测

为准确掌握投放安徽省的A、B、C、D 4个厂家的猪O型口蹄疫灭活疫苗在实际生产中的免疫效果,2008年秋季至2011年春季,共采集了844个猪场10 439份免疫接种后1个月左右血清样,采用液相阻断ELISA检测了O型口蹄疫抗体滴度。结果显示,4个厂家疫苗的免疫接种效果差异明显,B厂疫苗免疫效果最好,D厂疫苗次之;不同年份疫苗的免疫接种效果差异显著,2010年的疫苗免疫接种效果最好。

猪口蹄疫O型合成肽与油乳灭活疫苗免疫后抗体水平的比较

为明确猪口蹄疫O型合成肽疫苗与油乳灭活疫苗免疫后的抗体水平,将65头51日龄四元杂交猪随机分为5组(13头/组),其中AA组和DD组分别为油乳灭活疫苗A及合成肽疫苗D的二次免疫组,AAA组及DDD组为相应疫苗的3次免疫组,在首免或二免后4周加强免疫,采用阻断ELISA方法检测首免后2、4、6、8、10周及12周(WPI)特异性抗体的阻断率。研究结果表明,在6 WPI,DD组及DDD组抗体阻断率开始上升,接近或达到峰值,其阻断率分别为94.5%(13/13)和97.1%(13/13),随后DD组抗体水平基本维持稳定,而DDD组抗体水平在10 WPI缓慢攀升至峰值,随后下降至65.7%(11/13);AA组和AAA组在6 WPI尽管抗体阻断率也呈上升趋势,且在10 WPI达到或接近峰值,分别为53.0%(8/13)及45.3%(6/13);综上,与猪口蹄疫O型油乳灭活疫苗2次免疫或者3次免疫相比,合成肽疫苗不仅可使机体获得较高水平的抗体,且抗体维持时间较长。

牛O-A型口蹄疫双价灭活苗研究——疫苗制备及其安全效力试验

选择的牛O和A型口蹄疫(FMD)制苗毒种,通过转瓶BHK-21细胞浓缩培养制备病毒。经二乙烯亚胺(BEI)不同浓度条件下灭活A型病毒的动力学测定,确定了灭活最低安全水平。用拟定配方和工艺制备的油佐剂O-A型双价灭活疫苗大剂量(10 ml)接种敏感小公牛安全无害。4 ml剂量接种牛,于免疫后30 d用10000 ID_(50)同源强毒攻击,结果O型8/9保护,A型8/8保护。所有疫苗接种牛对2个病毒型均有良好的抗体应答,O型血清中和滴度达1:20(1.31)的接种牛抗强毒攻击获得保护超过了88%,高于1:20未获得保护的不足12%;A型血清中和滴度达1:76(1.88)的接种牛抗强毒攻击100%获得保护。

口蹄疫O-A-AsiaⅠ型三价灭活疫苗免疫效力和最小免疫剂量的研究

为确定口蹄疫O-A-AsiaⅠ型三价灭活疫苗的安全性和免疫效果，按OIE口蹄疫疫苗效检标准和我国口蹄疫灭活疫苗质量标准，对实验室条件下制备的4批疫苗进行了安全性试验、免疫效力试验、免疫持续期试验、疫苗保存期试验和最小免疫剂量试验。结果显示，4批疫苗均对靶动物和实验动物安全，无任何毒副反应；对O、A、AsiaⅠ型口蹄疫的平均免疫效力分别为4．73、6．84和8．10PD50／头份；一次接种的有效免疫期达6个月；2～8℃下的疫苗保存期为12个月；适宜的免疫剂量为，6月龄以上牛每头3．0mL，6月龄以下牛每头1．5mL。该疫苗对接种动物安全，免疫效果良好，一次接种可同时预防O、A、AsiaⅠ型3个血清型的口蹄疫。

双佐剂口蹄疫A型、O型和亚洲Ⅰ型三价灭活疫苗的临床试验

对中试生产的3批双佐剂口蹄疫A型、O型和亚洲Ⅰ型三价灭活疫苗在新疆的阿克苏、伊犁、昌吉等地区进行了临床试验,以进一步评估疫苗的安全性、效力和免疫持续期。结果显示,所有免疫的3 682头牛和33 240只羊（包含怀孕动物和幼畜）食欲、精神均正常,孕期动物无流产,对幼畜生长无影响,无其他不良反应,整个试验期内入试牛羊无口蹄疫发生。经200多头免疫牛6个月的定期采血,用液相阻断ELISA方法检测,显示免疫后第1~2个月内抗体滴度达到最高峰,几何均值最高A型可达1∶558、O型可达1∶332、亚洲Ⅰ型可达1∶381;随后抗体水平有所下降,在第3个月后维持在一定的滴度直至第6个月。结果表明,该疫苗安全、可靠。

最新4种猪口蹄疫O型灭活疫苗及O型-A型二价灭活疫苗免疫效果评估

试验选用政府招标的2家公司生产的猪口蹄疫O型灭活疫苗及猪口蹄疫O型-A型二价灭活疫苗共4种疫苗对健康仔猪按免疫程序进行试验,采用ELISA方法检测不同阶段抗体水平,以期评估不同猪口蹄疫疫苗的免疫效果。试验结果表明,2种O型疫苗免疫21 d后,其抗体阳性率就达70%,二免后抗体效价可达8log2~9log2,抗体合格率高达100%,抗体保护力持久;O型-A型二价灭活苗需2次以上免疫,才能产生较好的抗体保护力度。政府招标购买的疫苗均能产生较好的免疫效果,O型灭活苗免疫效果优于O型-A型二价灭活苗;建议口蹄疫免疫实行二次免疫,间隔28~30 d,必要时进行三免。

猪口蹄疫O型灭活疫苗PD_(50)效检攻毒剂量试验

采用PD50 效检方法 ,对 0 30 4 0 4 1 2批猪口蹄疫O型灭活疫苗 (I型苗 )进行不同攻毒剂量的PD50 检测。结果表明 ,分别用 5 0 0ID50 、10 0 0ID50 、2 0 0 0ID50 和 4 0 0 0ID50 的病毒进行攻毒 ,疫苗每头份分别含 5 .2、3.6、2 .1和 1.0个PD50 。该项试验的攻毒毒株ORMF8的ID50 为 10 - 7.0 /2mL ,MID为10 - 6 .0 /2mL。

3种猪口蹄疫O型油乳灭活疫苗的体液免疫效果比较

为了确定3种猪口蹄疫O型油乳灭活疫苗的体液免疫效果,将91头51日龄四元杂交猪随机分为7组（13头/组）,除1组作为健康对照组外,AA、BB及CC分别为A、B及C 3种油乳灭活疫苗的二次免疫组,AAA、BBB及CCC为上述3种疫苗的3次免疫组,在首免或二免后4周加强免疫,采用阻断ELISA方法检测首免后2、4、6、8、10及12周（WPI）特异性抗体的阻断率。研究结果表明,在8WPI,AA、BB及CC组抗体阻断率达到峰值,分别为60.1%、39.0%及45.2%,随后抗体水平迅速下降,在12WPI,AA、BB及CC组抗体阻断率分别降至19.7%、25.2%及31.0%;AAA、BBB及CCC组疫苗免疫的6组在8WPI后抗体阻断率呈现上升趋势,在12WPI,AAA、BBB及CCC组抗体阻断率分别为46.3%、48.1%及50.1%,且在10～12WPI抗体阳性率始终维持在46%以上;综上,6组疫苗免疫效果的次序为AA〉CCC〉BBB〉CC〉AAA〉BB。

猪口蹄疫O型灭活疫苗PD_(50)效检攻毒方式探索

用10000TCID50的OR/80株F13细胞毒或用10000LD50的OR/80株乳鼠组织毒(ORMF8),通过肌肉注射途径、蹄踵球部或趾间皮内注射途径接种O型口蹄疫抗体阴性架子猪进行攻毒试验,三种途径均不能使试验猪产生规律性发病。

猪注射O型口蹄疫灭活疫苗后引起应激反应的调查

2007年3月到4月,通过对青海省湟中县共和镇7307头猪注射O型口蹄疫灭活疫苗后进行了应激反应的调查,出现应激反应的猪4898头,发生率达67%,死亡率达3.8%。