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牛fabp3和fabp4基因真核表达载体的构建及在小鼠成肌细胞中的表达
被引量:
1
1
作者
王杰
奥旭东
+3 位作者
李文斌
白海栋
岳永莉
于海泉
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期136-145,共10页
【目的】分别构建牛fabp3和fabp4基因真核表达载体,并观察载体转染小鼠成肌细胞后基因的表达以及对内源fabp3和fabp4基因表达的影响,检测肉质性状形成相关基因在转基因细胞中的表达及对内源功能基因的影响。【方法】以pDsRED质粒为骨架...
【目的】分别构建牛fabp3和fabp4基因真核表达载体,并观察载体转染小鼠成肌细胞后基因的表达以及对内源fabp3和fabp4基因表达的影响,检测肉质性状形成相关基因在转基因细胞中的表达及对内源功能基因的影响。【方法】以pDsRED质粒为骨架载体,分别将人肌红蛋白启动子与目的基因相连、CMV启动子与红色荧光蛋白报告基因相连构建肌肉特异性表达fabp3基因的载体pDsHF3和表达fabp4基因的载体pDsHF4;用脂质体瞬时转染小鼠成肌细胞,72 h后用2%孕马血清诱导成肌细胞向肌管的分化;利用real-time PCR技术检测转染前后成肌细胞中外源牛fabp3和fabp4基因和内源小鼠fabp3和fabp4基因的表达量。【结果】与对照组相比,小鼠成肌细胞分别转染pDsHF3和pDsHF4表达载体,24 h后外源牛fabp3和fabp4基因均获得高水平的表达,48 h后有所回落;而内源小鼠fabp3和fabp4基因在成肌细胞和诱导分化的肌管细胞中的表达均受到不同程度的影响。【结论】构建的真核表达载体能在成肌细胞中高效表达,外源牛fabp3或fabp4基因的转入能够影响小鼠成肌细胞及肌管中内源fabp3和fabp4基因的表达。
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关键词
牛
fabp
3
基因
牛fabp4基因
成肌细胞
肌管
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职称材料
题名
牛fabp3和fabp4基因真核表达载体的构建及在小鼠成肌细胞中的表达
被引量:
1
1
作者
王杰
奥旭东
李文斌
白海栋
岳永莉
于海泉
机构
内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室
出处
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期136-145,共10页
基金
国家"973"计划项目(2010CB134410)
转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08010-006)
文摘
【目的】分别构建牛fabp3和fabp4基因真核表达载体,并观察载体转染小鼠成肌细胞后基因的表达以及对内源fabp3和fabp4基因表达的影响,检测肉质性状形成相关基因在转基因细胞中的表达及对内源功能基因的影响。【方法】以pDsRED质粒为骨架载体,分别将人肌红蛋白启动子与目的基因相连、CMV启动子与红色荧光蛋白报告基因相连构建肌肉特异性表达fabp3基因的载体pDsHF3和表达fabp4基因的载体pDsHF4;用脂质体瞬时转染小鼠成肌细胞,72 h后用2%孕马血清诱导成肌细胞向肌管的分化;利用real-time PCR技术检测转染前后成肌细胞中外源牛fabp3和fabp4基因和内源小鼠fabp3和fabp4基因的表达量。【结果】与对照组相比,小鼠成肌细胞分别转染pDsHF3和pDsHF4表达载体,24 h后外源牛fabp3和fabp4基因均获得高水平的表达,48 h后有所回落;而内源小鼠fabp3和fabp4基因在成肌细胞和诱导分化的肌管细胞中的表达均受到不同程度的影响。【结论】构建的真核表达载体能在成肌细胞中高效表达,外源牛fabp3或fabp4基因的转入能够影响小鼠成肌细胞及肌管中内源fabp3和fabp4基因的表达。
关键词
牛
fabp
3
基因
牛fabp4基因
成肌细胞
肌管
Keywords
bovine
fabp
3 gene
bovine
fabp
4
gene
myoblasts
myotubes
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S823 [农业科学—畜牧学]
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出处
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1
牛fabp3和fabp4基因真核表达载体的构建及在小鼠成肌细胞中的表达
王杰
奥旭东
李文斌
白海栋
岳永莉
于海泉
《中国农业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
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