不同采收期山里红叶总黄酮及牡荆素-2″-O-鼠李糖苷含量研究

目的:比较山里红叶不同采收期总黄酮的含量及主成分牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的含量,确定山里红叶最佳采收期。方法:通过正交试验筛选工艺,采用紫外分光光度法(检测波长509nm)测定不同采收期山里红叶中总黄酮类化合物的含量;采用高效液相色谱法(HPLC)测定不同采收期山里红叶中单体有效成分-牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的含量,色谱柱为Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈-四氢呋喃(97:3),B为1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1mL/min;柱温:室温;对照品:牡荆素-2″-O-鼠李糖苷;进样量:10μL。结果:综合考虑在1～23周期间山里红叶的总黄酮与牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的含量以7～9月含量较高。结论:通过实验确定7～9月为山里红叶最佳采收期,为科学合理采收山里红叶提供了科学依据。

表面活性剂对山楂叶总黄酮中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的肠道吸收促进作用

目的:考察非离子表面活性剂对山楂叶总黄酮中主要活性成分牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠道的吸收促进作用。方法:配制含表面活性剂聚山梨酯-80(吐温-80)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH40)和泊洛沙姆(F68)的山楂叶总黄酮溶液,分别在大鼠肠道上段(十二指肠和空肠)和下段(回肠和结肠)循环灌流,采用HPLC法测定溶液中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的浓度,计算吸收率。结果:加入3种表面活性剂后,牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠内的吸收均显著增加(P<0.05),比不加表面活性剂时提高50%以上。且随表面活性剂的浓度从0.01%提高到0.1%,牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠道上段和下段的吸收均显著增加。在表面活性剂的浓度较低(0.01%)时,吐温-80对药物的吸收促进作用强于RH40和F68。结论:表面活性剂吐温-80,RH40和F68均可促进山楂叶总黄酮中牡荆素-2″-O-鼠李糖在大鼠肠道上段和下段的吸收。

牡荆素-2'-O-鼠李糖苷对大鼠急性心肌缺血的药效研究

目的对牡荆素-2'-O-鼠李糖苷进行'大鼠急性心肌缺血'药效研究,阐明牡荆素-2'-O-鼠李糖苷的药效作用特点。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、丹参滴丸组(85 mg/kg)、低剂量组(20 mg/kg)、中剂量组(40 mg/kg)、高剂量组(80 mg/kg)。以上各组灌胃1次/d,连续15 d,最后3 d灌胃后1 h采用腹腔(ip)注射盐酸异丙肾上腺素(Iso)(5 mg/kg)诱导大鼠实验性心肌缺血,末次注射Iso 6 h后,用10%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血。测定血清心肌酶,即肌酸酶同工酶(CK-MB)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果与空白组比较,模型组CK-MB、LDH和HBDH含量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,牡荆素-2'-O-鼠李糖苷组CK-MB,LDH,HBDH含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);与丹参滴丸组比较,牡荆素-2'-O-鼠李糖苷组CK-MB,LDH,HBDH含量差异无统计学意义。结论牡荆素-2'-O-鼠李糖苷能明显改善急性心肌缺血大鼠的血清心肌酶损伤程度,降低CK-MB,LDH,HBDH的含量,对异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血损伤具有显著的保护作用。

牡荆素-2''-O-鼠李糖苷滴丸制备工艺及质量标准研究

目的：确立牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸的最佳成型工艺并建立牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸的质量标准。方法：采用正交试验设计，以丸重差异、溶散时限、外观质量为评价指标，对滴丸成型的工艺进行优选。采用高效液相色谱法对滴丸中牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷进行含量测定。结果：最佳工艺条件为：PEG6000：PEG4000=1：1为基质．滴制温度90℃，液体石蜡为冷却剂，温度为-5～0℃，滴距为4cm，滴速50滴·min-1。牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷在2．0～20μg·mL。范围的内有良好线性，平均回收率为97．33％，RSD为0．93％。结论：制备工艺简单、合理，含量测定准确、重复性好，为牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸新药开发提供科学依据。

用核磁共振二维谱确定芫花素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖基(2→1)-O-α-L-吡喃鼠李糖苷的双糖结构

[目的]确定一种黄酮双糖苷中双糖的结构。[方法]用1H-1HCOSY-45、HSQC和HMBC谱确定双糖的联接位置。[结果]鼠李糖联连在葡萄糖的2位上(1→2)。[结论]采用核磁共振二维谱能明确该双糖的1H,13C核的化学位移归属。

HPLC测定山楂叶中牡荆素-4″-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量

目的:用高效液相法同时测定山楂叶中牡荆素-4〃-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:Sepax HP C18柱(4.6 mm×250mm,5μm);流动相:A为乙腈-四氢呋喃(20:1),B为0.5%甲酸溶液,采用梯度洗脱;0～10min,A为14%～17%;10～26min,A为17%～18%;26～28min,A为18%～14%;检测波长:360nm,流速:1.0mL/min;柱温:32℃。结果:该方法加样回收率牡荆素-4″-O-葡萄糖苷:99.59%(RSD=0.50%),牡荆素鼠李糖苷:99.57%(RSD=0.96%),牡荆素:98.70%(RSD=1.10%),芦丁:99.35%(RSD=1.16%),金丝桃苷:99.28%(RSD=0.88%)。结论:该方法准确可靠,重现性好,可用于山楂叶的质量控制。

HPLC同时测定鸭跖草提取物中咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素的含量

采用高效液相色谱法同时测定鸭跖草提取物中咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素的含量。色谱条件为:色谱柱为Phenomenex C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,以甲醇(A)-体积分数0.1%甲酸水(B)梯度洗脱:0~17 min,22%A^42%A;17~28 min,42%A^56%A;28~40 min,56%A^90%A,检测波长为350 nm,流速为1 m L/min,柱温为35℃。咖啡酸、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷和异荭草素分别在2.16~86.4 mg/L、6.445~257.8 mg/L和3.293~131.7 mg/L范围内线性关系良好,平均回收率分别为98.36%,99.42%和98.00%。该方法准确、可靠、重复性好,可用于鸭跖草提取物的质量评价与控制。

HPLC同时测定柿叶提取物中槲皮素-7-O-β-D-鼠李糖苷和染料木素含量的方法研究

目的：建立柿叶提取物中槲皮素-7-O-β-D-鼠李糖苷和染料木素的HPLC同时测定方法。方法：采用HPLC法,Phenomenex-C18（250mm×4.6mm,5μm）,甲醇-0.02%磷酸水为流动相梯度洗脱,检测波长：368nm,流速：1mL/min;柱温30℃。结果：槲皮素-7-O-β-D-鼠李糖苷和染料木素分别在7.44-297.4μg/mL范围和1.10-109.8μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.20%和98.77%。结论：该方法准确、可靠,重复性好,可用于柿叶提取物的质量评价与控制标准,为柿叶功能性产品的研究开发奠定基础。

高效液相色谱法测定大鼠血浆中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷浓度及药动学研究

目的:建立测定大鼠血浆中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷(VOR)浓度的HPLC法,研究体内的药动学过程。方法:血浆样品加内标物橙皮苷,以甲醇沉淀蛋白;采用Diamonsil ODS C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.1%甲酸(20:80)为流动相,流速为1.0mL.min-1;检测波长为270nm。柱温:室温;进样量:20μL。结果:最低检测限为0.04022μg.mL-1,线性范围0.1070～21.41μg.mL-1,平均提取回收率(n=6)为97.9%,日内、日间精密度试验的RSD分别小于7.4%和8.5%;大鼠静脉注射VOR15,30,60mg.kg-13个剂量后,发现VOR的AUC0?90与给药量之比呈线性关系,测得消除半衰期(t1/2β)、系统清除率(CL)及表观分布容积(Vc)无显著性差异。结论:建立的测定大鼠体内VOR含量的HPLC方法简单、专属性强,适用于VOR在大鼠体内的药代动力学研究。

牡荆素鼠李糖苷在Caco-2细胞模型中的跨膜转运研究

目的研究牡荆素鼠李糖苷(RHV)在Caco-2细胞模型中的跨膜转运机理。方法采用Caco-2细胞模型,考察不同浓度、不同吸收促进剂(十二烷基硫酸钠、牛胆盐)对RHV跨膜转运的影响。结果 RHV从肠腔侧到基底侧的转运与从基底侧到肠腔侧的转运相似,前者表观渗透系数随浓度的增大逐渐降低,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,加入吸收促进剂后,其表观渗透系数增大。结论 RHV在Caco-2细胞模型中主要表现为被动转运,十二烷基硫酸钠和牛胆盐都能增大RHV从肠腔侧到基底膜侧的转运量。

山楂叶总黄酮在大鼠体内的药动学研究

目的建立HPLC同时测定大鼠血浆中山楂叶总黄酮(HLF)的两个主要有效成分4″-O-牡荆素葡萄糖苷(GLV)和2″-O-牡荆素鼠李糖苷(RHV)的浓度,并用此方法对HLF在大鼠体内的药动学进行研究。方法大鼠尾静脉注射HLF,于不同时间点断尾取血,甲醇直接沉淀蛋白,HPLC测定GLV和RHV的血药浓度。色谱柱为DiamonsilTMC18(4.6mm×200mm,5μm),流动相为四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.5%冰醋酸(19.4∶1∶1∶78.6),检测波长为330nm。结果样品中GLV和RHV被成功分离,线性范围分别为0.23~138.42mg.L-1(r=0.9990)和0.36~218.49mg.L-1(r=0.9995)。在测定浓度范围内,GLV和RHV的日内精密度(n=5)分别为0.69%~3.91%和0.51%~3.89%;日间精密度(n=5)分别为1.09%~5.03%和1.45%~2.16%;平均方法回收率(n=5)分别为(96.70±5.29)%^(102.20±1.15)%和(96.39±1.44)%^(103.64±2.23)%;平均提取回收率(n=5)分别为(92.68±2.19)%^(95.74±1.19)%和(93.45±1.85)%^(99.26±2.85)%。结论该分析方法简便快速,专属灵敏,精密度和回收率高,可满足药动学研究需要。静注HLF10~40mg.kg-1,GLV和RHV在大鼠体内药动学特征相似,均符合三室开放药动学模型。

骨碎补中2个黄酮苷类化合物的NMR研究

从骨碎补(Drynaria fortunei)的乙酸乙酯萃取物中分离得到了2个黄酮苷类化合物,结合其理化性质,并通过ESI-MS,IR,1 H NMR,13 C NMR,1 H-1 H COSY,HSQC,HMBC等多种波谱学方法进行结构鉴定,鉴定化合物1和2分别为山奈酚-3-O-β-D-6″′-乙酰基-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖苷及山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖苷,并对二者的1 H NMR化学位移信号进行了全归属,纠正了文献中C-5和C-9的归属错误.

炮制前后王不留行中3种黄酮苷在大鼠体内药动学的变化

目的考察炮制前后王不留行中3种黄酮苷在大鼠体内药动学的变化。方法大鼠分别灌胃给予生品、炮制品提取液(0.01 mL/g),于5、10、20、30、45 min及1、2、4、8、12、24 h采血,UPLC-MS/MS法测定王不留行黄酮苷、肥皂草苷、异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷血药浓度,计算主要药动学参数。结果炮制后,王不留行黄酮苷MRT_(0~24 h)、t_(1/2)缩短(P<0.05);异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷C_(max)、AUC_(0~24 h)升高(P<0.05),MRT_(0~24 h)、t_(1/2)缩短(P<0.05);肥皂草苷MRT_(0~24 h)缩短(P<0.05)。结论炮制后,王不留行中异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷含量增加。在服用相同剂量提取物时,异牡荆素-2″-O-阿拉伯糖苷暴露量增加,并且该成分及王不留行黄酮苷、肥皂草苷的消除加快。

倒心盾翅藤中的1个新鼠李糖苷

目的研究傣药倒心盾翅藤Aspidopterys obcordate的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS等色谱分离技术,对倒心盾翅藤茎醇提物的醋酸乙酯相和正丁醇相进行分离纯化,经现代波谱技术及物理常数测定等方法对所分离的化学成分进行结构鉴定。结果从倒心盾翅藤95%乙醇提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为3,4-二羟基苯甲酸-3-O-α-L-鼠李糖苷(1)、3,4-二羟基苯酚乙酸酯(2)、3,4-二羟基苯甲酸(3)、儿茶素(4)、β-谷甾醇(5)、胡萝卜苷(6)、cinnacasolide C(7)、尿囊素(8)。结论所有化合物均为首次从倒心盾翅藤中分离。其中,化合物1为新化合物,命名为倒心盾翅藤苷。

厚皮菜总黄酮对小鼠高脂血症的预防及作用机制

目的探讨厚皮菜总黄酮对小鼠高脂血症的预防作用及机制。方法采用高效液相色谱法对厚皮菜总黄酮浸膏中的牡荆素-2′′-O-木糖苷(VOX)进行含量测定。选取60只雄性昆明小鼠,其中取10只为空白组(普通饲料喂养),其余50只建立高糖高脂饲料诱导的小鼠高脂血症模型,分为模型组、瑞舒伐他汀组、厚皮莱总黄酮高、中、低剂量组。建模过程以厚皮菜黄酮200、100、50 mg/(kg·d)3个剂量灌胃给药进行干预,给药28 d后检测血清中糖脂代谢、炎症和氧化作用的相关生化指标,包括空腹血糖(FPG)、胰岛素(INS)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6含量;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量。结果厚皮菜总黄酮浸膏中的VOX含量为30.84%。实验第21及28天,模型组体质量与其他各组相比显著升高(P<0.05)。各组血清中FPG、INS、ALT和AST水平均无显著性差异(P>0.05)。与空白组相比,模型组TC、TG、LDL-C和HDL-C水平显著升高(P<0.01)。与模型组相比,厚皮菜总黄酮高、中剂量组和瑞舒伐他汀组TC、TG和LDL-C水平显著降低(P<0.05,P<0.01),厚皮菜总黄酮低剂量组仅LDL-C水平显著降低(P<0.05)。与空白组相比,厚皮菜总黄酮各剂量组和瑞舒伐他汀组HDL-C水平均显著升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,厚皮菜总黄酮高、中剂量组的TNF-α、IL-1β、MAD水平显著降低,SOD及GSH-Px水平显著升高(P<0.05,P<0.01);厚皮菜低剂量组IL-1β及MAD水平显著降低(P<0.05)。结论厚皮菜总黄酮具有小鼠高脂血症的作用,VOX可能是其主要有效成分,其作用机制可能与抑制部分炎症因子和抗脂质过氧化损伤相关。

HPLC同时测定山楂叶提取物中的5种主要成分

目的同时测定山楂叶提取物中2″-O-牡荆素葡萄糖苷（Glv）、2″-O-牡荆素鼠李糖苷（Rhv）、芦丁（Rut）、牡荆素（Vit）和金丝桃苷（Hps）的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为DiamonsilTMC18柱（200 mm×4.6 mm,5μm）,流动相A为甲醇,B为乙腈-四氢呋喃（1：19）,C为0.5%冰醋酸,梯度洗脱。0-15 min,流动相A由1%-21%,B由19%-21%;15-17 min,A由21%-65%,B保持5%;17-20 min,A由65%-1%,B由5%-19%;流速1.0 ml·min^-1;检测波长360 nm;柱温30℃。结果Glv、Rhv、Rut、Vit、Hps的平均加样回收率分别为99.72%、100.27%、99.48%、99.31%和100.83%,其RSD分别为1.26%、1.69%、1.61%、1.70%和1.31%（n=6）。结论所建方法简便、快速、准确、可靠,可用于山楂叶提取物的质量控制。

高效液相色谱法同时测定楠竹叶提取物中的4种黄酮

采用高效液相色谱法同时测定楠竹叶提取物中的4种主要黄酮成分:荭草苷、牡荆苷、牡荆苷-4′-O-葡萄糖苷、牡荆苷-2′-O-鼠李糖苷。通过实验,得到了同时测定4种主要黄酮成分的最佳条件。采用Kromasil-C18(5μm,4.6 mm×250 mm,Akzol Nobel,Sweden)进行测定,最佳检测条件为:以四氢呋喃:乙腈:甲醇:0.5%醋酸水溶液=10.3:1:0.7:88为色谱流动相等度洗脱;检测波长360 nm;柱温25℃,流速:1.0 mL·min^(-1)。荭草苷、牡荆苷、牡荆苷-4′-O-葡萄糖苷和牡荆苷-2′-O-鼠李糖苷的平均回收率分别为98.5%、98.1%、99.1%和98.7%,相对标准偏差分别为0.8%、0.7%、0.8%和0.6%(n=5)。该方法分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高、重复性好,可用于楠竹叶成分的检测分析。

兔尾草化学成分的研究

目的:研究兔尾草(Uraria lagopodioides(Linn.)Desv.ex DC.)的化学成分。方法:以各种柱色谱分离兔尾草的乙醇浸出物,对所得化合物以理化性质和波谱分析的方法鉴定其结构。并对其中黄酮成分进行了体外抗病毒试验。结果:所得到8个化合物分别鉴定为硬脂酸(Ⅰ),正二十四烷酸(Ⅱ),β-谷甾醇(Ⅲ),正三十烷醇(Ⅳ),水杨酸(Ⅴ),β-谷甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ),当药黄酮(Swertisin,Ⅶ),当药黄酮-2″-O-α-L-鼠李糖苷(Ⅷ)。结论:所有8个化合物均为首次从该植物中分离得到。

马齿苋抗糖尿病活性成分的研究

目的研究马齿苋抗糖尿病的活性成分。方法马齿苋全草用75%乙醇提取,利用硅胶、凝胶等柱色谱及制备液相色谱进行分离,并根据有机波谱技术鉴定了化合物结构,进一步通过测定各个化合物对胰岛素抵抗的Hep G2细胞葡萄糖消耗量的影响以及黄酮苷类化合物对Akt磷酸化水平的影响来评价其抗糖尿病活性。结果从马齿苋中分离鉴定了9个化合物,分别为芹菜素-4’-O-α-L-鼠李糖苷（1）,橙皮苷（2）,山柰酚（3）,木栓酮（4）,6,7-二羟基香豆素（5）,反式-对香豆酸（6）,金莲花碱（7）,咖啡酸（8）,二十八烷酸（9）,此外化合物1~4能够显著提高胰岛素抵抗Hep G2细胞葡萄糖消耗,其中化合物1的效果最为显著并能降低该细胞Akt的磷酸化水平。结论化合物1为首次从该植物中分离得到并且具有较强的抗糖尿病活性。