不同采收期山里红叶总黄酮及牡荆素-2″-O-鼠李糖苷含量研究

目的:比较山里红叶不同采收期总黄酮的含量及主成分牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的含量,确定山里红叶最佳采收期。方法:通过正交试验筛选工艺,采用紫外分光光度法(检测波长509nm)测定不同采收期山里红叶中总黄酮类化合物的含量;采用高效液相色谱法(HPLC)测定不同采收期山里红叶中单体有效成分-牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的含量,色谱柱为Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm);流动相A为乙腈-四氢呋喃(97:3),B为1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1mL/min;柱温:室温;对照品:牡荆素-2″-O-鼠李糖苷;进样量:10μL。结果:综合考虑在1～23周期间山里红叶的总黄酮与牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的含量以7～9月含量较高。结论:通过实验确定7～9月为山里红叶最佳采收期,为科学合理采收山里红叶提供了科学依据。

表面活性剂对山楂叶总黄酮中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的肠道吸收促进作用

目的:考察非离子表面活性剂对山楂叶总黄酮中主要活性成分牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠道的吸收促进作用。方法:配制含表面活性剂聚山梨酯-80(吐温-80)、聚氧乙烯氢化蓖麻油(RH40)和泊洛沙姆(F68)的山楂叶总黄酮溶液,分别在大鼠肠道上段(十二指肠和空肠)和下段(回肠和结肠)循环灌流,采用HPLC法测定溶液中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷的浓度,计算吸收率。结果:加入3种表面活性剂后,牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠内的吸收均显著增加(P<0.05),比不加表面活性剂时提高50%以上。且随表面活性剂的浓度从0.01%提高到0.1%,牡荆素-2″-O-鼠李糖苷在大鼠肠道上段和下段的吸收均显著增加。在表面活性剂的浓度较低(0.01%)时,吐温-80对药物的吸收促进作用强于RH40和F68。结论:表面活性剂吐温-80,RH40和F68均可促进山楂叶总黄酮中牡荆素-2″-O-鼠李糖在大鼠肠道上段和下段的吸收。

牡荆素-2'-O-鼠李糖苷对大鼠急性心肌缺血的药效研究

目的对牡荆素-2'-O-鼠李糖苷进行'大鼠急性心肌缺血'药效研究,阐明牡荆素-2'-O-鼠李糖苷的药效作用特点。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、丹参滴丸组(85 mg/kg)、低剂量组(20 mg/kg)、中剂量组(40 mg/kg)、高剂量组(80 mg/kg)。以上各组灌胃1次/d,连续15 d,最后3 d灌胃后1 h采用腹腔(ip)注射盐酸异丙肾上腺素(Iso)(5 mg/kg)诱导大鼠实验性心肌缺血,末次注射Iso 6 h后,用10%水合氯醛麻醉,腹主动脉取血。测定血清心肌酶,即肌酸酶同工酶(CK-MB)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果与空白组比较,模型组CK-MB、LDH和HBDH含量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,牡荆素-2'-O-鼠李糖苷组CK-MB,LDH,HBDH含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);与丹参滴丸组比较,牡荆素-2'-O-鼠李糖苷组CK-MB,LDH,HBDH含量差异无统计学意义。结论牡荆素-2'-O-鼠李糖苷能明显改善急性心肌缺血大鼠的血清心肌酶损伤程度,降低CK-MB,LDH,HBDH的含量,对异丙肾上腺素所致大鼠急性心肌缺血损伤具有显著的保护作用。

牡荆素-2''-O-鼠李糖苷滴丸制备工艺及质量标准研究

目的：确立牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸的最佳成型工艺并建立牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸的质量标准。方法：采用正交试验设计，以丸重差异、溶散时限、外观质量为评价指标，对滴丸成型的工艺进行优选。采用高效液相色谱法对滴丸中牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷进行含量测定。结果：最佳工艺条件为：PEG6000：PEG4000=1：1为基质．滴制温度90℃，液体石蜡为冷却剂，温度为-5～0℃，滴距为4cm，滴速50滴·min-1。牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷在2．0～20μg·mL。范围的内有良好线性，平均回收率为97．33％，RSD为0．93％。结论：制备工艺简单、合理，含量测定准确、重复性好，为牡荆素-2＂-O-鼠李糖苷滴丸新药开发提供科学依据。

用核磁共振二维谱确定芫花素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖基(2→1)-O-α-L-吡喃鼠李糖苷的双糖结构

[目的]确定一种黄酮双糖苷中双糖的结构。[方法]用1H-1HCOSY-45、HSQC和HMBC谱确定双糖的联接位置。[结果]鼠李糖联连在葡萄糖的2位上(1→2)。[结论]采用核磁共振二维谱能明确该双糖的1H,13C核的化学位移归属。

HPLC测定山楂叶中牡荆素-4″-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量

目的:用高效液相法同时测定山楂叶中牡荆素-4〃-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱:Sepax HP C18柱(4.6 mm×250mm,5μm);流动相:A为乙腈-四氢呋喃(20:1),B为0.5%甲酸溶液,采用梯度洗脱;0～10min,A为14%～17%;10～26min,A为17%～18%;26～28min,A为18%～14%;检测波长:360nm,流速:1.0mL/min;柱温:32℃。结果:该方法加样回收率牡荆素-4″-O-葡萄糖苷:99.59%(RSD=0.50%),牡荆素鼠李糖苷:99.57%(RSD=0.96%),牡荆素:98.70%(RSD=1.10%),芦丁:99.35%(RSD=1.16%),金丝桃苷:99.28%(RSD=0.88%)。结论:该方法准确可靠,重现性好,可用于山楂叶的质量控制。

高效液相色谱法测定大鼠血浆中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷浓度及药动学研究

目的:建立测定大鼠血浆中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷(VOR)浓度的HPLC法,研究体内的药动学过程。方法:血浆样品加内标物橙皮苷,以甲醇沉淀蛋白;采用Diamonsil ODS C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.1%甲酸(20:80)为流动相,流速为1.0mL.min-1;检测波长为270nm。柱温:室温;进样量:20μL。结果:最低检测限为0.04022μg.mL-1,线性范围0.1070～21.41μg.mL-1,平均提取回收率(n=6)为97.9%,日内、日间精密度试验的RSD分别小于7.4%和8.5%;大鼠静脉注射VOR15,30,60mg.kg-13个剂量后,发现VOR的AUC0?90与给药量之比呈线性关系,测得消除半衰期(t1/2β)、系统清除率(CL)及表观分布容积(Vc)无显著性差异。结论:建立的测定大鼠体内VOR含量的HPLC方法简单、专属性强,适用于VOR在大鼠体内的药代动力学研究。

牡荆素鼠李糖苷在Caco-2细胞模型中的跨膜转运研究

目的研究牡荆素鼠李糖苷(RHV)在Caco-2细胞模型中的跨膜转运机理。方法采用Caco-2细胞模型,考察不同浓度、不同吸收促进剂(十二烷基硫酸钠、牛胆盐)对RHV跨膜转运的影响。结果 RHV从肠腔侧到基底侧的转运与从基底侧到肠腔侧的转运相似,前者表观渗透系数随浓度的增大逐渐降低,但差异不具有统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,加入吸收促进剂后,其表观渗透系数增大。结论 RHV在Caco-2细胞模型中主要表现为被动转运,十二烷基硫酸钠和牛胆盐都能增大RHV从肠腔侧到基底膜侧的转运量。

山楂叶总黄酮在大鼠体内的药动学研究

目的建立HPLC同时测定大鼠血浆中山楂叶总黄酮(HLF)的两个主要有效成分4″-O-牡荆素葡萄糖苷(GLV)和2″-O-牡荆素鼠李糖苷(RHV)的浓度,并用此方法对HLF在大鼠体内的药动学进行研究。方法大鼠尾静脉注射HLF,于不同时间点断尾取血,甲醇直接沉淀蛋白,HPLC测定GLV和RHV的血药浓度。色谱柱为DiamonsilTMC18(4.6mm×200mm,5μm),流动相为四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.5%冰醋酸(19.4∶1∶1∶78.6),检测波长为330nm。结果样品中GLV和RHV被成功分离,线性范围分别为0.23~138.42mg.L-1(r=0.9990)和0.36~218.49mg.L-1(r=0.9995)。在测定浓度范围内,GLV和RHV的日内精密度(n=5)分别为0.69%~3.91%和0.51%~3.89%;日间精密度(n=5)分别为1.09%~5.03%和1.45%~2.16%;平均方法回收率(n=5)分别为(96.70±5.29)%^(102.20±1.15)%和(96.39±1.44)%^(103.64±2.23)%;平均提取回收率(n=5)分别为(92.68±2.19)%^(95.74±1.19)%和(93.45±1.85)%^(99.26±2.85)%。结论该分析方法简便快速,专属灵敏,精密度和回收率高,可满足药动学研究需要。静注HLF10~40mg.kg-1,GLV和RHV在大鼠体内药动学特征相似,均符合三室开放药动学模型。

HPLC法同时测定山楂叶提取物中4种成分的含量

目的建立HPLC法同时测定山楂叶提取物中牡荆素-2″-O-鼠李糖苷、金丝桃苷、槲皮素、山奈酚的含量。方法色谱柱为DIAMONSIL C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-体积分数为0.5%乙酸水溶液,梯度洗脱[0～15 min,φ(甲醇)=40%～65%;15～20 min,φ(甲醇)=65%～100%;20～40 min,φ(甲醇)=100%];流速为1.0 mL.min-1;波长为365 nm。结果牡荆素-2″-O-鼠李糖苷、金丝桃苷、槲皮素、山奈酚的线性关系良好,其质量浓度分别在14.0～112 mg.L-1、3.50～28.0 mg.L-1、6.25～50.0 mg.L-1、0.550～4.40 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系。平均回收率分别为101.3%、98.6%、107.0%、98.1%,RSD分别为1.1%、2.2%、2.6%、2.1%(n=5)。结论该法简便、可行,重现性好,结果准确,可作为山楂叶提取物的含量测定方法,为其质量控制提供参考依据。

HPLC同时测定山楂叶提取物中的5种主要成分

目的同时测定山楂叶提取物中2″-O-牡荆素葡萄糖苷（Glv）、2″-O-牡荆素鼠李糖苷（Rhv）、芦丁（Rut）、牡荆素（Vit）和金丝桃苷（Hps）的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为DiamonsilTMC18柱（200 mm×4.6 mm,5μm）,流动相A为甲醇,B为乙腈-四氢呋喃（1：19）,C为0.5%冰醋酸,梯度洗脱。0-15 min,流动相A由1%-21%,B由19%-21%;15-17 min,A由21%-65%,B保持5%;17-20 min,A由65%-1%,B由5%-19%;流速1.0 ml·min^-1;检测波长360 nm;柱温30℃。结果Glv、Rhv、Rut、Vit、Hps的平均加样回收率分别为99.72%、100.27%、99.48%、99.31%和100.83%,其RSD分别为1.26%、1.69%、1.61%、1.70%和1.31%（n=6）。结论所建方法简便、快速、准确、可靠,可用于山楂叶提取物的质量控制。

高效液相色谱法同时测定楠竹叶提取物中的4种黄酮

采用高效液相色谱法同时测定楠竹叶提取物中的4种主要黄酮成分:荭草苷、牡荆苷、牡荆苷-4′-O-葡萄糖苷、牡荆苷-2′-O-鼠李糖苷。通过实验,得到了同时测定4种主要黄酮成分的最佳条件。采用Kromasil-C18(5μm,4.6 mm×250 mm,Akzol Nobel,Sweden)进行测定,最佳检测条件为:以四氢呋喃:乙腈:甲醇:0.5%醋酸水溶液=10.3:1:0.7:88为色谱流动相等度洗脱;检测波长360 nm;柱温25℃,流速:1.0 mL·min^(-1)。荭草苷、牡荆苷、牡荆苷-4′-O-葡萄糖苷和牡荆苷-2′-O-鼠李糖苷的平均回收率分别为98.5%、98.1%、99.1%和98.7%,相对标准偏差分别为0.8%、0.7%、0.8%和0.6%(n=5)。该方法分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高、重复性好,可用于楠竹叶成分的检测分析。

山里红叶化学成分分离

目的:研究山里红叶中(Crataegue pinnatifida Bge.var major)的化学成分。方法:用大孔树脂、硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、薄层色谱、葡聚糖柱色谱等技术进行分离纯化,根据紫外吸收,液相色谱和核磁共振进行结构鉴定。结果:得到化合物牡荆素-2″-O-鼠李糖苷及牡荆素-4″-O-葡萄糖苷。结论:牡荆素-2″-O-鼠李糖苷及牡荆素-4″-O-葡萄糖苷纯度经高效液相色谱归一化法达99%。

山楂叶提取物微丸制备及其含量测定方法研究

采用挤出滚圆法制备山楂叶提取物微丸,建立测定微丸提取物中牡荆素-2-O-鼠李糖苷含量的方法,评价微丸的溶出情况。采用固定微丸的制备工艺,以粉体学为评价指标,优化载药量、水溶性载体材料、润湿剂种类及用量等微丸的处方,采用高效液相法测定山楂叶提取物中牡荆素-2-O-鼠李糖苷的含量。微丸处方为山楂叶提取物∶微晶纤维素∶乳糖∶润湿剂(60%乙醇)质量比为10∶12∶3∶8;色谱条件:流动相四氢呋喃-乙酸-水-甲醇-乙腈(38∶4∶152∶3∶3),检测波长:330 mm,流速为1.0 mL/min,在蒸馏水中30 min时牡荆素-2-O-鼠李糖苷的溶出量达95.2%。所得山楂叶提取物微丸质量好,牡荆素-2-O-鼠李糖苷的含量测定方法实用性强。

银翘解毒软胶囊治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的网络药理学研究

目的基于网络药理学的方法探索银翘解毒软胶囊治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制。方法将银翘解毒软胶囊所含1418个化合物与48个COVID-19炎症相关靶蛋白进行分子对接,构建药物-靶蛋白网络,阐明银翘解毒软胶囊的关键活性成分和潜在作用靶点。结果通过网络分析获得银翘解毒软胶囊的活性成分有50个,主要为黄酮类和三萜类化合物;潜在作用靶点37个,主要为MTOR、JAK3、ACE、ACE2、PIK3CA、TNF、AKT2和MAP2K1等炎症靶点。分子对接结果显示连翘酯苷及牡荆素-2″-O-鼠李糖苷与新型冠状病毒(SARS-CoV-2)3CL水解酶具有较好的亲和力,甘草酸与血管紧张素转化酶II(ACE2)具有较好的亲和力。结论银翘解毒软胶囊通过干扰SARS-CoV-2病毒复制、调节炎症信号通路表达及炎症因子分泌发挥治疗COVID-19作用。

乌韭的化学成分研究(Ⅱ)

目的进一步研究乌韭的化学成分。方法采用多种柱色谱手段,对乌韭全草的70%乙醇提取物进行分离,根据理化性质和波谱数据等确定单体化合物的结构。结果得到7个单体化合物,分别鉴定为牡荆素鼠李糖苷(Ⅰ)、牡荆素吡喃葡萄糖苷(Ⅱ)、6,7-二羟基香豆素(Ⅲ)、十五烷醇(Ⅳ)、十六烷酸(Ⅴ)、β-谷甾醇(Ⅵ)和胡萝卜苷(Ⅶ)。结论化合物Ⅰ～Ⅶ均为首次从该植物中分离得到。

鸭跖草的化学成分研究

利用常规柱色谱及半制备高效液相色谱等手段相结合对鸭跖草化学成分进行分离纯化,从鸭跖草中分离得到15个化合物,根据其NMR和MS等光谱数据以及理化性质鉴定化合物结构,所分化合物分别鉴定为柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖苷(1),没食子酸甲酯(2),对香豆酸(3),原儿茶酸(4),咖啡酸(5),对羟基苯甲酸(6),2-苯乙基-β-D-葡萄糖苷(7),土大黄苷(8),(7S,8R)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol-9-O-β-D-glucoside(9),异牡荆素(10),芹菜素-6-C-α-L-鼠李糖苷(11),isorhamnetin-3-O-β-D-glucoside(12),槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(13),异槲皮素(14),1,2-dihydro-6,8-dimethoxy-7-1-(3,5-dimethoxy-4-hydroxyphenyl)-N1,N2-bis-[2-(4-hydroxyphenyl)ethyl]-2,3-naphthalene dicarboxamide(15)。化合物2,5-9,11,13等8个化合物为首次从鸭跖草属中分离得到。

三叶青叶化学成分鉴定及其总黄酮含量测定研究

目的:建立超快速液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱法(RRLC-Q-TOF-MS法)快速鉴定三叶青叶化学成分,根据鉴定的黄酮成分建立相适应的紫外-可见分光光度法(UV-Vis法),测定三叶青叶中总黄酮的含量。方法:RRLC-Q-TOF-MS法采用CORTECS C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm),流动相为乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B),梯度洗脱,流速0.25 m L·min^(-1),柱温45℃;飞行时间质谱采用负离子全扫描模式,数据采集范围m/z 50~1 000,通过一级质谱和二级质谱、相关文献及对照品推测鉴定化学成分。根据鉴定的黄酮进行3种总黄酮显色方法比较,确定三乙胺法显色,以UV-Vis法在400 nm波长处测定三叶青叶总黄酮含量。结果:采用RRLC-Q-TOF-MS共鉴定了三叶青叶中异荭草苷、荭草苷、异荭草素鼠李糖苷、荭草素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷、牡荆素鼠李糖苷、异牡荆素鼠李糖苷共8个主要黄酮类成分;采用UV-Vis法测定三叶青叶总黄酮含量,以牡荆苷计,质量浓度在1.956~9.780μg·m L^(-1)范围内与吸光度值呈良好线性关系(r=0.999 5),平均加样回收率99.8%(RSD=3.4%),三叶青叶总黄酮含量范围为13.38~28.67 mg·g^(-1)。结论:本文建立RRLC-Q-TOF-MS联用技术,为鉴定三叶青叶的黄酮成分提供了一种快速、高效的定性分析方法;建立以三乙胺显色的UV-Vis法定量分析三叶青叶总黄酮方法准确,为综合评价三叶青叶的质量提供参考。

云贵腺药珍珠菜化学成分研究

目的对云贵腺药珍珠菜Lysimachia stenosepala var.flavescens的化学成分进行研究。方法运用硅胶柱、凝胶柱、中压柱、聚酰胺柱等色谱技术进行分离纯化,根据波谱数据进行结构鉴定。结果从云贵腺药珍珠菜乙醇提取物中分离得到12个化合物,分别鉴定为山柰酚(1)、槲皮素(2)、鼠李柠檬素(3)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(4)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(5)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷-(1→2)-β-D-葡萄糖苷(6)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷-(1→6)-β-D-葡萄糖苷(7)、槲皮素-3-O-β-D-木糖苷-(1→2)-O-β-D-葡萄糖苷(8)、山柰酚-3-O-(2-O-α-L-鼠李糖苷-6-O-β-D-木糖苷)-β-D-葡萄糖苷(9)、β-谷甾醇(10)、原报春花素A(11)、β-胡萝卜苷(12)。结论化合物1～12为首次从该植物中分离得到,其中化合物8、9为首次从珍珠菜属中分离得到。

雪松松针正丁醇部位化学成分的研究

目的对雪松Cedrus deodara松针正丁醇部位的化学成分进行研究。方法利用硅胶柱及Sephadex LH-20凝胶色谱柱分离、纯化,并根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定。结果从雪松松针正丁醇部位分离得到10个化合物,分别鉴定为1-(4′-羟基-3′-甲氧基苯基)-2-[4″-(3-丙醇基)-2″-甲氧基苯基]-1,3-丙二醇(1)、(7S,8R)-9,9′-二羟基-3,3′-二甲氧基-7,8-二氢苯并呋喃-1′-丙醇基新木脂素-4-O-β-D-葡糖苷(2)、(7R,8R)-3′,9,9′-三羟基-3-甲氧基-7,8-二氢苯并呋喃-1′-丙醇基新木脂素-4-O-α-L-鼠李糖苷(3)、(6R,9R)-6-羟基3-oxo-α-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside(4)、(6R,9R)-3-oxo-α-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside(5)、莽草酸正丁酯(6)、奎宁酸正丁酯(7)、(6S,9R)-6-hydroxy-3-oxo-α-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside(8)、5-p-trans-coumaroylguinic acid(9)、(E)-1-O-对香豆酰基-α-D-吡喃葡萄糖苷(10)。结论化合物1～7为首次从该属植物中分离得到。