牡荆葡基黄酮抑制自噬诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡及对移植瘤裸鼠存活的影响

目的:探讨牡荆葡基黄酮对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡和移植瘤裸鼠存活的影响。方法:体外实验:用不同浓度(10,20,40μmol/L)的牡荆葡基黄酮作用于肺癌A549细胞。CCK8法检测细胞增殖;流式细胞技术检测细胞凋亡;蛋白印迹法检测Ki67,PCNA,Caspase-3,Caspase-9,P62,Beclin1,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ,ATG5的蛋白表达及JNK1/2,ERK1/2的磷酸化情况。体内实验:皮下注射A549细胞建立移植瘤模型,分别腹腔注射0.5,1,2 mg/kg牡荆葡基黄酮,于第30天绘制存活曲线,免疫组化检测组织中Ki67和Caspase-3的表达情况。结果:牡荆葡基黄酮能抑制A549细胞存活和Ki67、PCNA蛋白表达;促进细胞凋亡和Caspase-3、Caspase-9蛋白表达;下调自噬标记物Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、ATG5,上调P62蛋白表达;增加JNK1/2,减少ERK1/2的磷酸化水平;还能增加移植瘤裸鼠存活率,下调Ki67而上调Caspase-3的表达水平。结论:牡荆葡基黄酮能通过抑制细胞自噬而诱导A549细胞凋亡,同时增加移植瘤裸鼠的存活率。

牡荆葡基黄酮对肺癌细胞恶性生物学行为及肿瘤生长的影响

目的探讨牡荆葡基黄酮(Vitexin)在肺癌细胞侵袭和迁移、微管形成、间质转化及肿瘤生长中的调控作用。方法体外培养肺癌A549细胞株,用不同浓度剂量Vitexin处理24 h后,CCK8筛选合适的Vitexin剂量;Transwell和划痕实验分别检测肺癌细胞侵袭和迁移能力;成管实验检测肺癌细胞微管数目;Western blot检测肺癌细胞上皮型钙黏蛋白(E‐cadherin)、神经型钙黏蛋白(N‐cadherin)和纤维黏蛋白(fibronectin,FN)表达;建立移植瘤裸鼠模型,给药组腹腔给予2 mg/kg Vitexin,观察肿瘤体积变化,饲养30 d后检测肿瘤质量,免疫组化检测E‐cadherin、N‐cadherin蛋白表达。结果与对照组相比,50μmol/L和100μmol/L Vitexin可显著抑制肺癌A549细胞侵袭和迁移能力,减少微管形成(P<0.05),上调E‐cadherin蛋白表达(P<0.05),下调N‐cadherin和FN蛋白表达(P<0.05)。与未给药组相比,2 mg/kg Vitexin给药治疗后,肿瘤体积和质量明显下降(P<0.05),E‐cadherin蛋白表达上调(P<0.05),N‑cadherin蛋白表达下调(P<0.05)。结论牡荆葡基黄酮对肺癌细胞侵袭和迁移、微管形成、间质转换和肿瘤生长具有抑制作用。

牡荆葡基黄酮调节TAK1/AMPK通路增强人肝癌细胞的放射敏感性

目的:探究牡荆葡基黄酮(VG)对人肝癌细胞放疗敏感性的作用及作用机制。方法:用不同浓度VG和放疗处理细胞,CCK8检测细胞活性,流式检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡标记蛋白和TAK1/AMPK通路蛋白表达。TAK1 siRNA(si-TAK1)转染细胞,Western blot检测TAK1的表达,CCK8检测细胞活性,流式检测细胞凋亡。结果:VG和放疗均能明显抑制Huh7细胞的活性,且VG浓度为20μmol/L和40μmol/L时,其抑制作用优于放疗。VG可显著增强放疗对肝癌细胞凋亡的促进作用,并升高Bax/Bcl-2的比值。同时,VG还能增强放疗对TAK1/AMPK通路蛋白(TAK1、AMPKα1和PPARγ)表达的促进作用,下调TAK1表达能明显反转VG增强放疗促细胞凋亡活性及抑制细胞增殖活性的作用。结论:VG可通过TAK1/AMPK通路增强肝癌细胞的放疗敏感性。