牦牛奶酪中乳酸菌的分离鉴定及发酵性能分析

为了探讨牦牛奶酪中乳酸菌菌种的多样性和发酵性能,从西藏、云南、新疆采集了17个样品,用MRS培养基菌落计数平均值为(4.08±0.60)(lg(CFU/g)),pH值平均值为4.52±0.29,采用表型和基因型相结合的方法鉴定出39株乳酸菌,其中乳杆菌35株为L.buchneri 2株、L.casei 16株、L.diolivorans 3株、L.fermentum 3株、L.helveticus 3株、L.kefiri 3株和L.plantarum 5株,片球菌4株为P.acidilactici 1株、P.pentosaceus 3株。通过对39株菌产酸活性、利用柠檬酸盐、产蛋白酶和胞外多糖活性等发酵性能分析,筛选出产酸活性强的菌株X24、X38、X29、X25、X21、X22、X30、X35,而菌株T7同时能利用柠檬酸盐、产蛋白酶和胞外多糖,都具有优良的发酵性能。说明牦牛奶酪中乳酸菌菌种具有多样性,有发酵性能优良的菌株。

牦牛奶酪中乳酸菌对抗生素的药敏性

分析牦牛奶酪中乳酸菌对常用抗生素的药敏性。采用纸片扩散法测定分离自牦牛奶酪的39株乳酸菌对8种常用抗生素的药敏性。结果表明:39株乳酸菌都有耐药性,主要对万古霉素、新霉素、链霉素和萘啶酮酸有抗性,抗性菌株分别达到了36株(92.3%)、32株(82.1%)、38株(97.4%)和39株(100%),菌株的耐药性有一定的种间差异,部分菌株有多重耐药性。

牦牛奶酪中产细菌素乳酸菌菌株的筛选

本研究用分离自西藏、新疆、云南地区牦牛奶酪的39株乳酸菌作为供试菌株,制备细菌素粗提液,用琼脂井法分析粗提液对9株致病菌(蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、费氏柠檬酸杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、阴沟肠杆菌、产气荚膜梭菌、宋内志贺菌)和2株非致病菌(无害李斯特菌、嗜热链球菌)指示菌株的抑菌作用。测定结果表明有30株菌的细菌素粗提液对指示菌株有抑菌作用,筛选出Y13、X29和X30这3株抑菌谱较宽的细菌素产生菌。

随机扩增多态性法分析西藏牦牛奶酪中乳酸菌的遗传多样性

目的:利用随机扩增多态性(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)法对西藏地区牦牛奶酪中27株乳酸菌基因型进行同源性分析。方法:利用5个随机引物对Mg2+浓度、d NTP用量、退火温度、模版用量/引物用量(ng/pmol)4个条件做单因素梯度试验,建立最佳反应条件,筛选最佳引物,然后对27株乳酸菌和4株乳酸菌标准菌株进行随机扩增,用NTsys 2.10e软件对扩增条带进行聚类和遗传相似性系数分析,分析结果与16S r RNA测序得到的菌种鉴定结果进行对比。结果:31株菌遗传相似系数在0.72~1.00之间,当相似性系数在0.82时,菌株被分成了8组,菌株按照不同种属聚类,聚类结果同16S r RNA测序结果基本一致,同时成功将Lactobacillus casei和Lactobacillus paracasei两个亚种区分开。结论:RAPD技术可以较好地应用于西藏地区牦牛奶酪中乳酸菌亲缘性关系分析。

牦牛奶酪中乳酸菌的随机扩增多态性研究

目的:探讨随机扩增多态性(RAPD)技术在牦牛奶酪中乳酸菌基因型研究方面的应用价值。方法:采用M13引物,对退火温度、Mg2+浓度、引物用量、Taq酶用量、模板量进行单因素梯度试验,建立最佳反应条件,然后对分离自牦牛奶酪的39株乳酸菌进行扩增,用NTsys 2.10e软件分析扩增图谱,计算遗传相似系数,进行聚类分析,并与16S rRNA测序得到的菌种鉴定结果进行对比。结果:39株乳酸菌相互间的遗传相似系数在0.47～0.98之间,当相似系数为0.78时,菌株被分成10个组,除X23、Y36和Y37之外,其余菌株均按照不同的菌种聚类,与16S rRNA测序结果基本一致,聚类有较强的地域相关性。结论:RAPD技术可用于牦牛奶酪中乳酸菌的基因型研究,可用于菌种鉴定和遗传亲缘关系分析。

干酪乳杆菌在牦牛奶酪制作中发酵特性的研究

在传统奶酪制作中添加不同量(0～3%)的干酪乳杆菌,以不添加组作为空白对照,观察干酪乳杆菌的发酵特性。结果表明,试验组在发酵3～6h达到对数生长期,发酵6h时干酪乳杆菌活菌数可达到6.03×107/g,12h时活菌数达1.58×10~8/g。试验组样品黏度均较对照组显著增加(P<0.05);与对照组相比,试验组蛋白质水解程度略高,但差异不显著。在4℃冷藏过程中,试验组后酸化现象不明显;28d后,添加3%干酪乳杆菌的活菌数达9.77×10~8/g;对照组在冷藏中黏度几乎不变化,其余各组样品的黏度在冷藏7～14d中显著降低,之后到28d黏度变化不明显。

雅致放射毛霉添加量对牦牛霉菌奶酪品质的影响

研究毛霉添加量对牦牛霉菌奶酪品质的影响,确定最佳添加量及发酵时间。采用单因素实验设计,固定其他工艺参数,研究雅致放射毛霉的不同添加量(质量比:0.2%、0.3%、0.4%),测定成熟过程中奶酪的性能指标(感官评分、质构指标、营养成分、pH、蛋白质与脂肪分解指标)。结果表明:毛霉添加量为0.3%,奶酪品质及感官指标最佳;随着毛霉添加量增加,水分、蛋白质、脂肪含量、pH均呈下降趋势,灰分呈上升趋势。成熟至第6 d时,牦牛霉菌奶酪感官指标最佳;随成熟时间延长,pH4.6醋酸盐缓冲液可溶性氮含量、12%三氯乙酸可溶性氮含量、硫代巴比妥酸值、酸价不断升高。因此,发酵剂添加量0.3%,发酵6 d时,牦牛霉菌奶酪品质最佳。

相对湿度对牦牛毛霉霉菌奶酪成熟过程中品质的影响

为研究不同相对湿度对牦牛霉菌奶酪成熟过程中品质的影响,并确定其在成熟过程中的最佳相对湿度和成熟时间,本实验以牦牛霉菌奶酪为试验材料,将其分别置于相对湿度为30%、50%、70%条件下成熟,测定其在成熟过程中感官品质、质构、pH、营养成分、蛋白质和脂肪分解指标以及挥发性风味物质的变化。结果表明:相对湿度为50%,成熟6 d时,奶酪的感官评分最高且质构较佳。随着成熟时间的延长,三个实验组的水分、蛋白质和脂肪含量呈下降趋势,灰分逐渐上升;pH呈先下降后保持不变或上升。除成熟第0和8 d外,在同一成熟时间点,相对湿度为30%的水分含量均显著低于其他两组(P<0.05);灰分、蛋白质和脂肪含量变化不明显;相对湿度为50%的pH下降速度最快。pH4.6醋酸盐缓冲液可溶性氮含量、12%三氯乙酸可溶性氮含量、酸价和硫代巴比妥酸值均在奶酪成熟过程中不断升高,且相对湿度为50%时值最高。对牦牛毛霉霉菌奶酪挥发性风味物质检测发现,相对湿度为50%,成熟第6 d时,奶酪的风味物质含量较高。因此,牦牛霉菌奶酪在相对湿度为50%,成熟6 d时,其品质最佳。

牦牛奶酪酥加工工艺研究

牦牛奶酪酥是以牦牛奶酪为主要原料加工制成。通过对配方和加工工艺的不断改进和提高，使该产品具备了口感酥脆、乳香味浓等优点，使之既保留了牦牛奶酪的乳香味，又具有饼类食品的酥脆感。

成熟温度对牦牛毛霉菌奶酪成熟过程中品质的影响

文章通过研究不同成熟温度对牦牛毛霉菌奶酪成熟过程的影响,找寻最适应的温度及成熟时间。选取实验材料牦牛毛霉菌奶酪,将其置于不同的成熟温度下(20,25,30℃),选取相应成熟时间节点,测定质构、色泽、蛋白质分解、pH值等。结果表明,成熟温度为25℃时,牦牛毛霉菌奶酪在第6天时质构达到最佳值,此时感官评分也较高。3组牦牛毛霉菌奶酪的感官评分与质构指标随着时间的增加呈先上升后下降的趋势,在第6天时达到峰值;L^(*)值、水分、蛋白质和脂肪含量随着时间的增加均呈下降趋势;a^(*)值、b^(*)值、灰分含量、pH 4.6可溶性氮含量和12%三氯乙酸可溶性氮含量随着时间的增加呈上升趋势;pH值随着时间的增加呈先下降后不变或略微上升的趋势。在同一时间点,温度为25℃的胶黏性、凝聚性、弹性和咀嚼性明显高于其他两组(P<0.05);水分含量高于其他两组;灰分含量、蛋白质含量和脂肪含量变化不显著(P>0.05)。牦牛毛霉菌奶酪挥发性风味物质在25℃温度条件下,第6天时含量最高。结合实验判定,牦牛毛霉菌奶酪的最佳成熟温度为25℃,成熟时间为6 d。

川西高原传统发酵牦牛乳奶酪中乳酸菌多样性及优良乳酸菌的筛选

为认识川西高原乳酸菌资源多样性,筛选高效乳酸菌菌种,以川西高原传统发酵牦牛奶酪为研究材料分离了70株乳酸菌,纯培养以测定其生长曲线、耐酸能力、耐渗透压能力、耐胆盐能力、耐高温能力、产酸能力及拮抗肠道病原菌能力,运用BOXA1R-PCR聚类分析川西高原乳酸菌多样性以及16S rRNA基因测序鉴定明确其系统发育学地位,并发酵制作酸奶,对其进行感官评价.筛选出4株耐酸、15株耐渗透压、3株耐胆盐、3株产酸强、4株耐高温、3株抗病原菌强的优势菌株,BOXA1R-PCR聚类分析得70株乳酸菌分属于乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)和肠球菌属(Enterococcus)3个属,其中乳杆菌菌属为优势菌属.感官评价表明,RB5+YA8处理下的酸奶得分最高.综上,菌株YA8综合性能最强,经生理生化和16SrRNA基因序列分析鉴定为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei).本研究表明川西地区传统自然发酵牦牛奶酪中的乳酸菌资源丰富,具有巨大的应用潜能.(图6表5参32)

亚洲英雄黄效文的西藏行 牦牛的奶酪盛宴

被《时代》杂志选为“二十五位亚洲英雄”之一的中国探险学会创办人黄效文．多年致力于偏远地区的探险．研究．保护及教育工作。此次黄效文带领威斯隶辛大学师生深入西藏．开发牦牛奶酪．希望能有效改善当地人的生活。