牧草叶面乳酸菌分离鉴定及青贮用优良乳酸菌的筛选

[目的]筛选适合牧草青贮饲料发酵用的优良乳酸菌菌株,改善牧草青贮发酵品质。[方法]从皇竹草、牛筋草、白茅等8种禾本科牧草叶片表面分离乳酸菌,在传统微生物学鉴定方法的基础上采用分子生物学鉴定方法以及16S rDNA序列多样性分析方法对分离得到的疑似乳酸菌菌株进行多重鉴定。对乳酸菌菌株进行生长、产酸及耐盐性能的筛选,评估其在pH值为3.0、3.5、4.0条件下和NaCl浓度为0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/mL条件下的耐受情况;评价其对假丝酵母菌、金黄色葡萄球菌和鼠伤寒沙门菌的抑制能力。[结果]从牧草叶片表面初步分离到疑似乳酸菌菌株30株;经表型鉴定和分子生物学鉴定,有10株乳酸菌被鉴定为魏斯氏菌属(Weissella)、片球菌属(Pediococcus)和乳杆菌属(Levilactobacillus),其中,短乳杆菌(L.brevis)3株、戊糖片球菌(P.pentosaceus)2株、植物乳杆菌(L.plantarum)2株、魏斯氏乳酸菌(W.cibaria)1株、戊糖乳杆菌(L.pentosus)1株和棒状乳杆菌(L.coryniformis)1株。不同菌株在生长速率和产酸性能方面表现出一定差异,其耐盐、耐酸性能和抑菌性能也具有菌株特异性。综合比较10株菌株之间的生物学特性,植物乳杆菌Lab7具有较强的耐盐、耐酸性能,短乳杆菌Lab1和棒状乳杆菌Lab10在生长速率、产酸能力以及耐盐、耐酸性能和抑菌性能方面表现较好。[结论]牧草来源且经本体自然分离的植物乳杆菌Lab7、短乳杆菌Lab1和棒状乳杆菌Lab10可作为后续青贮饲料用乳酸菌菌剂的备选菌株,具有进一步开发的价值。