牵牛子提取物改善洛哌丁胺所致的大鼠功能性便秘和肠道菌群失调

背景牵牛子可用于便秘的治疗,而其主要的药理活性成分-牵牛子提取物(pharbitis nil extract,PN)对功能性便秘(functional constipation,FC)的具体的药理作用及机制并不清楚.目的研究PN对FC大鼠便秘症状、小肠动力、结肠肌电活动、结肠组织形态、肠道菌群以及神经递质的影响.方法采用盐酸洛哌丁胺(loperamide,Lop)灌胃法构建FC大鼠模型,并给予PN进行治疗.观察并记录大鼠给药6 h内粪便粒数、粪便含水率、小肠推进率和结肠肌电活动;聚合酶链反应变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)法检测大鼠肠道菌群的变化情况;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H&E)染色检测大鼠结肠组织的形态学变化;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠结肠中P物质(substance P,SP)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的表达水平.结果PN可显著增加FC大鼠6 h内的粪便粒数和粪便含水量;增快肠道墨汁推进率;降低结肠肌电频率和振幅变异程度.H&E结果显示,PN可改善Lop所致的结肠组织形态学改变.PCR-DGGE的检测结果显示,PN可调整FC大鼠肠道内拟杆菌门和疣微菌门的表达,升高乳杆菌科以及双歧杆菌科的表达丰度.ELISA结果显示,PN可显著上调FC大鼠结肠组织中SP和5-HT的表达,下调VIP的表达水平.结论PN可缓解Lop所致的FC并改善肠道菌群和肠神经系统.

牵牛子酒提取物对Lewis肺癌的抗肿瘤和抗转移机制研究

目的:观察牵牛子酒提取物对Lewis肺癌生长和转移的影响,研究其抗肿瘤机制。方法:体外采用MTT法和划痕实验检测牵牛子酒提取物对Lewis肺癌细胞生长和迁移的影响,吖啶橙染色检测细胞自噬,荧光黄传输检测细胞间连接通讯,Western blotting检测细胞中水通道蛋白1(AQP1)的表达。体内建立小鼠Lewis肺癌皮下移植模型和实验性肺转移模型评价牵牛子酒提取物的抗肿瘤和抗转移作用,电化学发光法检测荷瘤小鼠血清癌胚抗原(CEA)和β2微球蛋白(β2-MG),免疫组化法检测肺转移小鼠肺脏AQP1和缝隙连接蛋白Cx43表达。结果:牵牛子酒提取物对体外培养的Lewis肺癌细胞呈剂量依赖性生长抑制,明显阻止细胞迁移,降低细胞AQP1蛋白,促进细胞间连接通讯,减少癌细胞无血清自噬。体内实验,与未治疗的模型小鼠比较,牵牛子酒提取物呈剂量依赖性减缓肿瘤生长、阻止肿瘤转移、延长荷瘤小鼠存活时间,同时,牵牛子酒提取物也降低荷瘤小鼠血清CEA和β2-MG水平,能增强荷瘤肺组织间隙连接蛋白Cx43的免疫组化染色深度,减弱水通道蛋白AQP1的阳性染色密度。结论:牵牛子酒提取物能够阻止Lewis肺癌生长和转移,其机制可能与增强细胞间连接通讯和下调细胞水通道AQP1有关。