转录因子特化蛋白1在大肠癌组织中的表达及意义

目的研究转录因子特化蛋白1(Sp1)在大肠癌组织中的表达情况及意义。方法取60例大肠癌患者的癌组织和癌旁正常组织,分别采用实时定量PCR法检测大肠癌和癌旁正常组织中Sp1mRNA表达情况。按ΔΔCT法对目的基因进行相对定量。比较Sp1mRNA的表达情况与不同临床资料、病理参数之间的关系。结果大肠癌组织中Sp1mRNA表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.01);大肠癌组织中Sp1mRNA阳性表达率与患者的年龄、性别、肿瘤部位无关(P>0.05),而与大肠癌的组织学分级、Duke′s分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 Sp1在大肠癌组织中呈现高表达状态,提示Sp1在大肠癌的发生、发展过程中可能起重要作用。

转录因子特化蛋白Sp1在肿瘤中的研究进展

转录因子特化蛋白-1（transcription Specificity Protein 1,Sp-1）于1983年被发现,由785个氨基酸组成,相对分子质量为81×103[1]。研究证实,Sp1可与DNA的GC-box区域结合,增强基因的转录[2]。还可能与细胞内DNA损伤及染色体重构有关。在癌细胞中,可通过与ATF7IP形成复合体,诱导TERT和TERC基因表达而维持端粒酶的活性。目前发现,Sp1的异常表达与肝癌、乳腺癌、胰腺癌、胃癌等肿瘤的发生发展有很大的关系[3-9]。1 Sp1的转录活性转录因子Sp1归属于Sp/KLF家族[10],

信号肽-CUB-EGF结构域蛋白3和特化蛋白1表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系

目的检测乳腺癌组织中信号肽-CUB-EGF结构域蛋白3(SCUBE3)和特化蛋白1(SP1)表达情况并探讨二者与乳腺癌患者临床病理特征的关系及其对预后的影响。方法选取2013年2月至2015年10月期间绵阳市中心医院收治的80例女性乳腺癌患者的癌组织及其相应的癌旁正常乳腺组织标本。采用免疫组织化学方法检测不同组织中SCUBE3、SP1蛋白表达情况;分析乳腺癌组织中SCUBE3、SP1蛋白表达情况与乳腺癌患者临床病理特征的关系以及二者的相关性。采用Kaplan-Meier法分析乳腺癌患者的生存情况,同时采用Cox比例风险回归模型多因素分析影响乳腺癌患者预后(总生存时间)的危险因素。结果乳腺癌组织中SCUBE3、SP1蛋白表达阳性率均高于其相应的癌旁正常组织(P<0.05);SCUBE3蛋白表达阳性率在有淋巴结转移、TNMⅡ~Ⅳ期、分子亚型为Luminal A或B型、Ki67高表达患者的乳腺癌组织中较高(P<0.05),SP1蛋白表达阳性率在有淋巴结转移、分子亚型为Luminal A或B型患者的乳腺癌组织中较高(P<0.05)。Spearman等级相关性分析见乳腺癌组织中SCUBE3与SP1蛋白表达阳性呈正相关(χ^(2)=7.979,rs=0.316,P=0.005);Kaplan-Meier生存曲线显示SCUBE3、SP1蛋白表达阳性患者的总生存情况差于其阴性表达患者(χ^(2)=4.042,P=0.044;χ^(2)=10.676,P=0.001);Cox比例风险回归模型多因素分析结果显示,SCUBE3和SP1蛋白表达阳性(HR=6.020、P=0.016;HR=4.077,P=0.018)、有淋巴结转移(HR=3.518,P=0.017)、Ki67高表达(HR=7.989,P<0.001)均是影响乳腺癌患者总生存时间的危险因素(P<0.05)。结论乳腺癌组织中SCUBE3、SP1蛋白表达阳性率均较高且二者呈正相关性,二者均同时与乳腺癌患者临床病理特征淋巴结转移及分子亚型及预后有关。

转录因子Sp1与AP-2的研究进展

转录因子是能与位于转录起始位点上游50~5 000bp的顺式作用元件、沉默子或增强子结合并参与调节靶基因转录效率的一组蛋白,并能将来自细胞表面的信息传递至核内基因。转录因子通常有几个功能域,可分为DNA结合域、转录调控域及自身活性调控域,DNA结合域可与特定的DNA序列（一般长8~20bp）相互作用,使转录因子与靶基因中特定转录因子结合位点结合起来,

转录因子MAZ对c1orf109基因转录表达调控的体外研究

目的:本文旨在研究转录因子Myc相关锌指蛋白(MAZ)在体外对人类1号染色体开放阅读框109(c1orf109)基因的转录表达调控。方法:体外条件下,采用凝胶电泳迁移实验筛选c1orf109基因启动子区MAZ的结合位点,并利用本室构建的由c1orf109启动子驱动的增强型绿色荧光蛋白报告载体与MAZ和转录因子特化蛋白1(Sp1)的表达质粒共转染He La细胞,24 h后,用激光共聚焦显微镜和流式细胞术检测c1orf109基因的转录表达情况。结果:c1orf109启动子区可与MAZ结合,且有与Sp1共享的结合位点;MAZ与Sp1皆可抑制c1orf109的转录表达,且Sp1的抑制作用大于MAZ(P<0.05)。结论:MAZ与Sp1两个转录因子共同调控c1orf109基因在生理及病理条件的表达,且调控方向一致。

大肠癌Sp1与CEA的表达情况及其相关性

目的探讨转录因子特化蛋白1(Sp1)与癌胚抗原(CEA)在大肠癌发生、发展过程中的表达情况及其表达的相关性。方法采用实时荧光定量PCR的方法分析60例大肠癌组织及正常组织中Sp1mRNA及CEA mRNA表达差异,分析其与患者临床资料、病理参数之间的关系,分析Sp1mRNA及CEA mRNA表达的相关性。结果大肠癌组织Sp1与CEA mRNA相对表达值(RQ)均显著高于正常组织,差异均具有统计学意义(P<0.01);大肠癌组织Sp1和CEA mRNA表达情况与性别、年龄、肿瘤部位差异均无统计学意义(P>0.05);大肠癌的不同组织学分级及Dukes分期中,Sp1与CEA呈现出过表达状态;Sp1和CEA的表达具有相关性(r=0.706,P<0.01),且呈正相关关系(0<r<1)。结论大肠癌组织中Sp1和CEA的表达均高,且呈现一定的正相关关系,提示Sp-1和CEA可能作为肿瘤的诊断和治疗提供新的依据。

启动子荧光素酶报告系统检测低浓度过氧化氢激活神经肽PACAP特异受体PAC1-R启动子的作用

垂体腺苷酸环化酶激活多肽(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide,PACAP)特异受体PAC1-R(PACAP receptor 1)是神经系统疾病药物开发的重要靶点。为了研究其表达的生物学机制,本研究克隆了PAC1-R基因转录起始位点上游从-2 500到+26的2 526 bp启动子片段,构建PAC1-R启动子驱动的荧光素酶基因报告载体p GL3-PAC1-Rp,并确证PAC1-R启动子荧光素酶报告系统在小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a和人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中工作正常。运用此PAC1-R启动子荧光素酶报告系统,首次发现低浓度过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)有效激活PAC1-R启动子,此作用可被转录因子特化蛋白1(specificity protein 1,SP1)抑制剂光神霉素A(mithramycin A)所抑制,提示SP1参与介导H_2O_2对PAC1-R启动子的激活作用。生物信息学分析显示,PAC1-R启动子含有多个SP1结合位点。PAC1-R启动子的荧光素酶报告系统的构建为深入探索PAC1-R高表达的作用与机制奠定了基础,低浓度H_2O_2对PAC1-R启动子激活作用的发现有助于深入诠释低浓度活性氧的生理学作用。

顺铂增强替尼泊甙杀伤小细胞肺癌细胞系的作用

目的通过顺铂(CDDP)与替尼泊甙(VM-26)联合作用,探讨顺铂增强替尼泊甙对小细胞肺癌细胞株杀伤作用的机制。方法用MTT法,测定H446小细胞肺癌细胞24 h抑制率;AO/EB双荧光染色观察细胞活率;琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂条带;半定量RT-PCR及蛋白印迹检测DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)及特化蛋白1(SP1)的表达。结果CDDP与VM-26联合应用有明显的协同效应;二药合用与单独用药相比,细胞活率明显降低,DNA损伤程度增加。H446细胞经CDDP单独作用可以促进SP1、TopoⅡα和TopoⅡβmRNA及蛋白的表达;经VM-26单独作用后,TopoⅡα和TopoⅡβmRNA及蛋白表达降低,而SP1表达无明显改变;二药合用后可见TopoⅡαmRNA及蛋白的表达比单独应用CDDP下调,SP1 mRNA及蛋白的表达比单用VM-26升高,但与单用CDDP相比没有明显变化。结论CDDP通过上调SP1促进H446细胞中TopoⅡ表达,为TopoⅡ抑制剂类药物VM-26提供更多的作用靶点,能够明显提高对小细胞肺癌的抑制作用。

转录因子Sp1在子痫前期患者胎盘组织中的表达和意义

目的分析转录因子特化蛋白-1(Sp1)在子痫前期患者胎盘组织中的表达和意义。方法收集2018年1月-2019年12月海南医学院第一附属医院产科45例胎盘组织标本,其中正常孕妇23例,轻度子痫前期患者13例,重度子痫前期患者9例。采用免疫组化法检测胎盘组织中Sp1的表达情况。结果正常孕妇、轻度子痫前期患者及重度子痫前期患者胎盘组织中Sp1阳性率分别为43.5%、69.2%及100.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。Sp1阳性染色呈棕黄色颗粒,表达于滋养细胞的细胞核。胎盘组织中Sp1表达和孕周、胎儿体质量均密切相关(均P<0.05)。结论 Sp1蛋白在子痫前期患者胎盘组织中呈高表达,并随病情程度加重而增加,在子痫前期发生、发展过程中可能发挥一定作用。

大肠癌中转录因子Spl与AP-2α的表达及其相关性

目的探讨转录因子特化蛋白1（Spl）与转录因子激活蛋白-2α（AP-2α）在大肠癌发生、发展过程中的表达情况及其表达的相关性。方法采用实时荧光定量PCR的方法分析60例大肠癌组织及癌旁正常组织中SplmRNA及AP-2αmRNA表达差异，分析其与患者临床资料、病理参数之间的关系，探讨60例大肠癌组织中Sp1mRNA与AP-2αmRNA表达的相关性。结果大肠癌组织、癌旁正常组织Sp1 mRNA相对表达值（RQ）分别为13．621±2．433，6．464±1．757；AP-2αdmRNARQ值分别为3．264±0．877，17．484±3．608；大肠癌组织中Sp1mRNA的表达显著高于癌旁正常组织，AP-2αmRNA含量显著低于正常组织，差异均具有统计学意义（P〈0．01）；大肠癌组织SplmRNA和AP-2αmRNA表达率分别在患者不同性别、年龄≥或〈60岁、不同肿瘤部位各自差异均无统计学意义（P〉0．05）；在大肠癌的不同组织学分级及Duke分期中，Sp1呈现出过表达状态，则AP-2α呈现出表达降低或缺失状态；60例大肠癌组织中Sp1与AP-2α的表达具有相关性（r=-0．849，P〈0．001），且呈负相关关系（-1〈r〈0）。结论转录因子Spl在大肠癌组织中表达上调，而AP-2α则呈现低表达或缺失状态，Spl与AP-2α的表达呈现一定的负相关关系，提示Sp1与AP-2α可能为肿瘤的诊断和治疗提供新的依据。