基于“内伤脾胃,百病由生”角度探讨调节肠道微生态治疗特发性不育

男性不育症是指育龄夫妇有规律性生活且未采取避孕措施,由男方因素导致女方在1年内未能自然受孕[1]。据世界卫生组织(World Health Organization,WHO)估计,全球约有15%的育龄夫妇有生育问题,其中大约50%属于男方因素导致,而以少弱畸精子症为主要表现的特发性不育约占男性不育的30%~40%,是男性不育最常见的病因[2]。

特发性不育对精子、胚胎染色体及其辅助生殖结局影响的研究

目的探讨特发性不育对精子、胚胎染色体及其辅助生殖结局影响。方法实验组中132例特发性不育患者患者作为实验组,正常生育组50例男性纳入对照组。同时通过荧光原位杂交技术对以上2组患者精液进行精子非整倍体检测,并对通过常规体外受精周期中受精的第3天的废弃胚胎进行胚胎染色体分析。分析以上两组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、着床率、妊娠率及流产率等指标。结果特发性不育患者的DNA精子非整体率(5.75±0.51)%高于正常生育患者组(3.64±0.68)%,差异有统计学意义(P<0.05),特发性不育患者的胚胎染色体完全正常率45.00(36/80)小于正常生育患者组63.95(55/86)差异有统计学意义(P<0.05),特发性不育患者的受精率、卵裂率、优质胚胎率、植入率、妊娠率与正常生育患者组比较,差异有统计学意义(P>0.05)。而男特发性不育患者的流产18.18(2/11)高于正常生育患者组10.53(2/19),有统计学差异(P<0.05)。结论特发性不育患者精子、胚胎染色体非整倍体率增加,且特发性不育对辅助生殖结局也有不良影响。

精子端粒长度与特发性男性不育相关

端粒是真核生物染色体末端的多功能特异性DNA-蛋白结构,覆盖在染色体末端,保护基因组的稳定性。端粒在减数分裂过程中起到了十分重要的作用,协助染色体配对、联会、同源重组和分离。精子中的端粒可能在精子的受精能力和胚胎发育中起到重要作用。近年来,端粒与生殖的相关性研究成为一个新的热点,但精子端粒与男性不育间的相关性并不明确。本文采用实时荧光定量PCR方法检测中国特发性男性不育人群(126例)和正常可育男性人群(138例)的精子相对端粒长度,结果发现,特发性男性不育病例的精子平均相对端粒长度(2.894±0.115)低于正常对照组(4.016±0.603),差异具有统计学意义(P=5.097×10?5);并且精子相对端粒长度与精子密度、精子总数和精子活力都有显著的相关性:精子数量较多和/或精子活力较高,精子相对端粒长度较长。研究结果提示,在中国人群中,精子端粒长度与特发性男性不育具有相关性,精子的端粒长度可能影响精子发生和精子的功能,精子端粒的缩短导致精子数目及活力的降低从而导致男性不育。

泛素特异蛋白酶26基因多态性与特发性男性不育症的相关性研究

目的:研究泛素特异蛋白酶26(Usp26)基因多态性与特发性男性不育的关系及其在精子发生过程中的作用机制。方法:按照WHO标准(第4版)从150例不育患者中筛选出41例特发性不育患者,同时选取50例正常生育男性作为对照。采用PCR-SSCP法,从特发性不育患者中筛选突变样本,通过基因测序以确定突变方式和位点。结果:筛选出的41例特发性男性不育患者主要表现为精子浓度低、活动率差。基因测序分析结果显示:41例不育患者中9例(22.0%,P=0.01)存在Usp26基因的改变。其中,从8例(19.5%,P=0.01)患者中检测出复合突变:364位插入ACA和460位A置换了G;从1例(2.4%,P>0.05)患者中检测出1 044位A置换了T。以上3种变化均导致编码氨基酸的改变。50例正常生育男性均未发现该基因的突变。结论:Usp26基因的多态性可能与特发性男性不育症密切相关,且影响睾丸功能。

特发性男性不育的药物治疗

无明显病因的男性不育,称之为特发性男性不育。自从1992年发明卵细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗男性不育以来,对难治性男性不育取得突破性进展,但对每一男性不育个体选择治疗时,传统治疗方法应受到重视,药物作为传统方法还将是重要的治疗手段之一。本文就目前对男性不育的基本认识、药物治疗的特点、临床常用药物、疗效、评价及预后进行了综述。

辅酶Q10在特发性男性不育中作用的研究进展

近年来，不孕不育症发病率逐渐增高。据文献报道，全世界约8千万对夫妇面临这一困扰，其中与男性因素相关的约占50％。

特发性男性不育药物治疗的相关问题

自从1992年发明卵细胞浆内单精子注射（ICSI）治疗男性不育以来，对难治性男性不育的治疗取得突破性进展，过去曾广受关注的经验性治疗方法正逐渐淡出人们的视野，但传统方法理应受到高度重视，药物作为传统治疗方法是重要的手段之一，并往往被首先采用。

特发性男性不育的分子遗传学诊断与生育指导

特发性男性不育是指男性不育症患者除有精子异常外，其余情况均正常，而患者出现精子异常的原因不明。研究证明，Yqll中无精子因子（azoospermiafactor，AZF）的缺失，可引起不同程度的生精障碍，但随着辅助生殖技术的发展，AZF缺失患者依然可以生育后代，并且不同缺失类型辅助治疗对策各异。因此，有必要对特发性男性不育患者进行Y染色体AZF区域微缺失研究，从而对该类患者的诊断和生育指导提供依据。

左卡尼汀复合营养素治疗特发性弱畸精子症男性不育的临床效果观察

目的观察左卡尼汀复合营养素治疗特发性弱畸精子症男性不育的临床效果。方法采集医院收治的特发性弱畸精子症男性不育患者300例,随机分为观察组和对照组,每组150例。对照组采取维生素E以及辅酶Q10治疗,观察组则采取左卡尼汀复合营养素(左卡尼汀+硒酵母片+维生素E)治疗。比较2组临床疗效,治疗后精子畸形比例,治疗前后患者精液量、精子浓度、活力以及精子DNA碎片化指数(DFI),不良反应情况。结果观察组治疗总有效率为98. 00%,高于对照组的78. 00%(P <0. 01);治疗后,2组精液量、精子浓度、活力以及DFI指数较治疗前均升高,且观察组上述指标变化幅度大于对照组(P <0. 01);治疗后,2组精子畸形比例较治疗前均下降,且观察组下降幅度大于对照组(P <0. 01);2组均未出现明显不良反应。结论左卡尼汀复合营养素治疗特发性弱畸精子症男性不育的效果显著。

特发性不育男性患者精子顶体酶活性分析

目的分析特发性不育男性患者精子顶体酶活性。方法测定特发性不育男性患者(A组,84例)、因女方输卵管阻塞行卵胞浆内单精子注射的男性患者(B组,41例)和同期健康男性(C组,52例)的精液常规及精子顶体酶活性。结果三组前向运动精子百分比、正常精子形态率和精子浓度均无统计学差异(P>0.05)。A组和B组精子顶体酶活性低于C组[(30.21±9.45)IU/10~6和(19.26±3.02)IU/10~6 vs.(70.61±26.97)IU/106](P<0.05)。结论特发性不育男性患者精子顶体酶活性低下。

鱼精蛋白与特发性男性不育的研究进展

男性不育是一个较为复杂的临床综合征.WHO已明确指出不育症是指正常育龄夫妇12个月无保护性交而未能受孕. 近年来,越来越多的学者从遗传角度上对特发性男性不育患者进行分析.目前已经确定的遗传异常,包括染色体异常、精子mtRNA 突变,单/多基因遗传病以及遗传因素引起的内分泌异常等[2].从核酸与蛋白质水平上的进行了多角度的分析,其中鱼精蛋白的研究成为特发性男性不育症研究的一大热点.

特发性男性不育患者精浆蛋白质分析

目的寻找诊断特发性男性不育的生物标记分子。方法应用二维电泳与质谱技术(MS+MS/MS)分析特发性男性不育患者与正常对照组精浆蛋白质组成,寻找差异表达蛋白质。结果特发性男性不育患者较正常对照组精浆中血清白蛋白和前列腺酸性磷酸酶减少,而组织蛋白酶B和锌α2糖蛋白增加。结论特发性男性不育可能与精子获能受阻及精液免疫功能紊乱有关。

特发性男性不育患者精子DNA完整性和精浆氧化应激水平之间的相关性分析

目的探析特发性男性不育患者的精子DNA完整性与精浆氧化应激水平之间的相关性。方法148例特发性男性不育患者,以精子DNA碎片指数(DFI)为分组依据,DFI<30%为低DFI组(103例),DFI≥30%为高DFI组(45例),对比两组精浆中的丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(TAC),并分析精子DNA完整性与精液氧化应激指数的相关性。结果高DFI组MDA含量(12.18±3.21)nmol/ml高于低DFI组的(8.02±2.16)nmol/ml,TAC水平(11.35±3.52)U/L低于低DFI组的(22.41±3.47)U/L,差异有统计学意义(P<0.05)。DFI与精浆MDA含量呈正相关(r=0.573,P<0.01),与TAC呈负相关(r=-0.535,P<0.01)。结论精浆氧化应激水平可影响精子DNA损伤,精浆氧化应激可能是诱发特发性男性不育的重要机制。

隐睾和特发性男性不育患者DAZ基因家族分析

为了研究Y染色体上DAZ基因家族部分缺失和隐睾是否相关，是否与AZF基因完全缺失相类似，意大利学者在一项前瞻性研究中对193例无精及严重少精患者(其中95例有隐睾病史，98例为特发性)进行研究。对隐睾及特发性不育两组患者进行Y染色体微缺失检测．DAZ基因完全缺失用PCR分析，对单个基因家族突变的DAZ基因部分缺失运用PCR限制性消化分析。

特发性男性不育DYS1基因微缺失研究

目的研究Y染色体长臂Yq11区DYS1基因微缺失与特发性男性不育的关系以及DYS1基因微缺失患者睾丸病理类型和性激素水平变化。方法病例组:60例临床诊断为特发性男性不育的患者;对照组:80例已生育的健康男性。外周血提取基因组DNA,以PCR的方法,检测目的基因。睾丸病理学检查采用组织活检、石蜡切片、HE染色、光镜下观察。血清性激素测定采用化学发光免疫分析法。结果病例组有8例患者出现DYS1基因微缺失,缺失率为13.33%(8/60),对照组无DYS1基因微缺失,两组DYS1基因的缺失率差异有显著统计学意义(P<0.01),可认为DYS1基因微缺失与特发性男性不育发病有关联(OR=26.07)。DYS1微缺失的患者睾丸病理均表现不同程度的生精细胞减少,其中3例生精细胞极少;DYS1微缺失的患者T水平低于对照组(P<0.01),也低于特发性男性不育组总体水平(P<0.05)。结论DYS1基因微缺失与特发性男性不育有关联,DYS1微缺失患者睾丸病理表现为不同程度的生精障碍,血清T水平低下。

Y染色体AZFc区gr/gr缺失与男性不育关系的Meta分析

目的：采用Meta分析系统评价Y染色体AZFc区gr/gr缺失与特发性男性不育的关系。方法：检索PubMed、VIP和CNKI数据库（2003年1月至2010年8月）中有关gr/gr缺失与特发性男性不育相关性的病例-对照研究,并用RevMan4.2软件进行统计分析。结果：①共纳入20篇符合条件的文献,累计特发性不育病例5 246例、对照4 380例。②20篇文献的数据合并结果显示,患者组gr/gr缺失频率显著高于对照组,其比值比（odds ratio,OR）为1.63,95%CI：1.23~2.44（P=0.002）,当Meta分析限定在16篇采用更加严格的病例和对照纳入标准的文献时,则OR增至1.84,95%CI：1.47~2.29（P〈0.000 01）。③13篇文献的研究结果显示,少精子症患者gr/gr缺失频率明显高于对照组（OR=2.12,95%CI：1.61~2.80）（P〈0.000 01）。④8篇文献的研究结果显示,患者组缺失DAZ1/DAZ2基因拷贝的gr/gr缺失亚型频率较对照组显著增高（OR=1.83,95%CI：1.31~2.55）（P=0.000 4）;但缺失DAZ3/DAZ4基因拷贝的gr/gr缺失亚型频率分布在患者和对照组间却未见显著性差异（OR=1.43,95%CI：0.97~2.11）（P=0.07）。结论：本研究提示gr/gr缺失可能是男性不育风险因子之一。

POLG、MTHFR基因多态性与特发性男性不育关系的Meta分析

目的:探讨线粒体聚合酶γ(mitochondrial DNA polymeraseγ,POLG)基因CAG串联重复多态性以及亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因C677T多态性与特发性男性不育的关系。方法:检索PubMed、VIP和CNKI数据库(2001～2009年)中所有有关上述2种多态性与特发性不育相关性的病例对照研究,并用Revman4.2软件进行统计学Meta分析。结果:共纳入CAG串联重复多态性相关文献7篇,累计病例1 767例,对照1 722例;纳入C677T多态性相关文献8篇,累计病例1 474例,对照1 384例。数据合并结果显示,基因型(CAG)n=10/n≠10和(CAG)n≠10/n≠10的频率在患者与对照间均无显著性差异,其OR分别为1.00和1.70,95%CI分别为0.71～1.39(P=0.99)和0.58～5.00(P=0.34)。T677等位基因频率分布在病例与对照间无统计学差异,OR=1.07,95%CI=0.86～1.33(P=0.53)。病例与对照间,基因型TT677/(CC677+CT677)的OR=1.40,95%CI=0.72～2.74(P=0.32)。结论:POLG基因CAG重复多态性、MTHFR基因C677T多态性与特发性不育不具相关性。受纳入文献数量的限制,本Meta分析结果尚待更多高质量的大样本研究予以进一步证实。

精浆游离DNA研究进展

游离DNA又称为胞外DNA,广泛分布于人血浆、尿液、脑脊液、支气管肺泡灌洗液、羊水和精浆等体液中。目前,已被广泛研究并成为多种疾病无创诊断和研究的新分子标记物。近年来,精浆游离DNA(cfsDNA)在其浓度、分子量大小、来源及存在形式等一般特征和临床应用研究方面取得了一定进展,并在男性特发性不育病因诊断、研究及睾丸生殖细胞肿瘤、前列腺癌的早期诊断、疗效监测和预后评估等方面展示出良好的应用前景。本文概述游离DNA一般特征和生物学功能,并结合cfsDNA的研究现状及应用前景作一综述。