老年乳腺癌组织雌激素受体、孕激素受体与富集AT序列的特异性结合蛋白1及人表皮生长因子受体-2表达的相关性

目的探讨老年乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)与富集AT序列的特异性结合蛋白(SATB)1及人表皮生长因子受体(Cerb B)2表达的相关性。方法回顾性分析原发性乳腺癌患者172例的临床资料。以距肿瘤组织超过5 cm外的癌旁组织为对照,用免疫组化方法检测乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达及其与临床病理特征、ER、PR的关系。结果 SATB1、CerbB2在乳腺癌组织中表达的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05)。组织学分级Ⅲ级的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率最高,其次为Ⅱ级、Ⅰ级,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期为Ⅲ期的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率显著高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05);有淋巴结转移的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。SATB1、CerbB2在乳腺癌组织中的表达与ER、PR表达呈显著负相关(r_(ER)=-0.387,-0.372,r_(PR)=-0.296,-0.329,均P<0.05)。结论 SATB1、CerbB2在老年乳腺癌组织中呈高表达,且与ER及PR表达呈显著负相关。

基于竞争性杂交方法的猪-肠道微生物特异性互作靶点发掘

动物肠道中存在着一些参与猪肠道微生物互作的基因,这些基因具有一定的宿主特异性,利用其设计分子标记能准确识别粪便污染来源。该文共采集6个物种(猪、牛、羊、鸡、鸭、鹅)的145个粪便样品,提取其DNA后利用竞争性杂交的基因片段富集方法(genome fragment enrichment,GFE),靶向筛选参与猪肠道微生物互作的特异性基因。经BLASTX分析发现,82%的猪特异性非冗余DNA片段存在相似序列,以拟杆菌纲(Bacteroidetes)(43.2%)、梭菌纲(Clostridia)(19.5%)、芽孢杆菌纲(Bacilli)(8.6%)相似序列为主。从蛋白质功能方面分析,61.5%的非冗余序列功能明确,有7.6%的序列与信息贮存及加工有关,12.8%的序列与细胞加工及信息传导有关,22%的序列与代谢有关,其中,碳水化合物和氨基酸的转移代谢相关序列含量最为丰富,均占总特异性序列的6.3%。研究发现,能够编码拟杆菌纲(Bacteroidetes)和梭菌纲(Clostridials)等表面蛋白、膜分泌蛋白及碳水化合物代谢蛋白的相关基因可作为猪特异性分子标记筛选的靶点。

食品添加剂检测技术难点及应对策略

食品添加剂的广泛应用对食品安全构成潜在风险,准确检测食品中添加剂含量与种类至关重要。本文分析了食品添加剂检测面临的技术难题,包括微量添加剂的富集与捕获、复杂基质干扰、多组分同时分析等,并从样品前处理、特异性分离、联用分析等方面,探讨了检测技术的创新路径与优化策略。研究表明,新型富集材料、免疫亲和层析、色谱-质谱联用技术以及基于质谱大数据的定量校正策略,可有效破解食品添加剂检测难题,为食品安全监管提供有力的技术支撑。

富集AT序列的特异性结合蛋白1和B细胞淋巴瘤/白血病2在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的检测富集AT序列的特异性结合蛋白1(SATB1)、B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)在乳腺癌组织中表达的情况,探讨其与临床病理因素的关系及对乳腺癌预后的临床意义。方法应用免疫组织化学方法(SP法)检测84例乳腺癌组织中SATB1、Bcl-2和雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达情况并分析SATB1、Bcl-2与乳腺癌临床病理因素及预后的关系。定性资料采用χ2检验、Mann-WhitneyU秩和检验和Kruskal-WallisH秩和检验;两组间的相关性采用Spearman秩相关分析;生存分析采用Kaplan-Meier法(简称K-M法)、Log-Rank检验和COX模型分析法。结果 SATB1在乳腺癌组织中的阳性表达率明显高于乳腺癌旁组织(χ2=30.03,P=0.00);Bcl-2在乳腺癌组织中的阳性表达显著低于乳腺癌旁组织(χ2=5.01,P=0.03)。SATB1蛋白在乳腺癌中的阳性表达与患者年龄、肿瘤大小和组织学类型无关(P>0.05),但随组织学分级、临床分期的增加及淋巴结转移而升高(P<0.05);Bcl-2的表达与组织学分级和淋巴结转移有关(P<0.05),随着组织学分级升高和淋巴结的转移而表达下降。乳腺癌组织中SATB1与ER、PR表达有相关性(r=-0.31,P=0.01;r=0.29,P=0.01),与Bcl-2的表达无相关性(r=-0.21,P=0.05);Bcl-2与ER、PR表达无相关性(r=0.09,P=0.40;r=0.17,P=0.12)。SATB1表达与乳腺癌患者的预后有关(χ2=32.55,P=0.00);SATB1、ER、组织学分级和是否淋巴结转移是影响乳腺癌预后的4个独立因素(P<0.05)。结论 SATB1可能提示乳腺癌发展的恶性进程,其高表达提示乳腺癌患者预后不良,有望成为一个新的相对独立的乳腺癌预后预测指标。Bcl-2高表达提示乳腺癌表现好的生物学行为。

AT富集序列特异性结合蛋白1在直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨AT富集序列特异性结合蛋白1（SATBI）在直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法分别采用实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）和免疫组织化学法检测直肠癌组织中SATB1mRNA与蛋白水平的表达，并分析两者相关性；应用统计学方法分析SATB1表达与患者临床病理参数之间的关系及其预后意义。结果直肠癌及正常对照组织中SATB1mRNA相对表达量分别为1．93±0．36和0．75±0．19，蛋白阳性表达率分别为42．5％和6．25％，直肠癌组织均显著高于正常组织（P〈0．05）；SATB1mRNA与其蛋白表达水平呈显著正相关（r=0．649；P〈0．05）。SATB1高表达与直肠癌患者较高的TNM分期、淋巴结转移及远处转移之间相关（P〈0．05）。结论SATB1在直肠癌组织中的表达水平显著上调；SATB1高表达与直肠癌的侵袭、转移潜能密切相关。

AT富集序列特异性结合蛋白1在人膀胱移行细胞癌组织中的表达及其与上皮间质转化的关系

目的观察AT富集序列特异性结合蛋白1（SATBl）与上皮一间质转化（EMT）相关基因在人膀胱移行细胞癌中的表达，探讨SATB1与EMT相关基因表达与膀胱癌病理分级、临床分期及淋巴结转移的关系。方法分别用免疫组织化学和实时定量逆转录聚合酶链反应（RT—qPCR）检测82例膀胱癌组织标本中的SATB1、E-钙黏蛋白（E—cadherin）及Snail的表达，每例标本均选用癌组织中心、癌旁组织，并选择癌组织远端正常黏膜作为对照。结果免疫组织化学显示SATB1、E—cadherin及Snail在膀胱各组标本的阳性表达率分别为：膀胱癌为90．24％、18．29％、80．49％，癌旁组织为17．07％、79．27％、30．49％，正常膀胱组织为8．54％、91．46％、15．85％，SATB1和Snail阳性表达率在膀胱癌组明显高于癌旁组织和正常膀胱组织组，E—cadhefin阳性表达率膀胱癌组明显低于癌旁组织和正常膀胱组织组，各组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；SATBl、E—cadhefin及Snail在膀胱癌不同病理分级中的阳性表达率分别为G．组76．19％、23．81％、61．90％，G，组92．00％、20．00％、76．00％，G，组97．22％、13．89％、94．44％，差异有统计学意义（P〈0．05）；在膀胱癌不同临床分期中，SATBl、E—cadherin及Snail阳性表达率分别为：Tis～T．组为78．00％、24．24％、66．67％，T2～T4组为97．96％、14．29％、89．80％；在淋巴结转移组和非淋巴结转移组的阳性表达率为92．86％、25．00％、96．43％、88．89％、14．81％、72．22％，随着临床分期的增高和淋巴结转移的出现，SATBl和Snail表达水平逐渐升高，E—cadherin表达水平逐渐降低，各组间差异有统计学意义（P〈0．05）；RT—qPCR结果显示，SATBl和Snail基因在膀胱癌中的表达明显高于癌旁组织和正常膀胱黏膜组织，而E-cadherin在膀胱癌中的表达明显低于癌旁组织和正常膀胱黏膜组织，各组差异有统计学意义（P〈0．05），与免疫组织化学结果相符。结论SATBl和EMT相关基因表达异常与膀胱癌的分级、分期和淋巴结转移密切相关，SATBl表达与E—cadherin表达呈负相关，与Snail呈正相关，SATBl可能通过诱导EMT调节膀胱移行上皮癌的侵袭和转移过程。

羊栖菜中微量金属元素的亚细胞分区分布

运用亚细胞分级方法分析羊栖菜亚细胞组分中6种必需元素Cu、Fe、Mn、Zn、Mg、Ca以及有害元素cd、Pb、Al、As的含量，以揭示羊栖菜中不同微量元素的亚细胞分区分布特征，探讨其特异性富集砷的特性。研究结果表明，Cu、Fe、Mn、Zn、Ca、Mg等必需微量元素主要储存在细胞壁中，而在胞液和细胞器中的分布特征不同。对于Al、Cd和Pb，细胞壁中的浓度远高于细胞器和胞液，但是对于As，胞液是最主要的储存部位，分布比例约为58％，其次为细胞壁（约为26％～27％），最后为细胞器（约为15％～16％）。通过本研究推断胞液对As的区隔化作用很可能是羊栖菜特异性富集As和解毒As的重要原因。

子痫前期产妇胎盘组织中生长阻滞特异性蛋白6、富集AT序列的特异性结合蛋白1的含量及其与氧化应激、炎性反应的相关性

目的探讨子痫前期产妇胎盘组织中生长阻滞特异性蛋白6 (Gas6)、富集AT序列的特异性结合蛋白1(SATB1)的含量及其与氧化应激、炎性反应的相关性,为临床诊治提供参考依据。方法收集2014年7月-2017年2月在武功县人民医院进行分娩的子痫前期产妇90例作为子痫前期组,同期在武功县人民医院进行分娩的健康产妇50例作为正常对照组。留取两组产妇的胎盘标本组织,采用Western-blot法检测其中Gas6、SATB1 mRNA的表达量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测胎盘标本组织碾磨液中氧化应激、炎性反应指标的含量。结果子痫前期组产妇胎盘组织标本中Gas6 mRNA表达量高于正常对照组产妇,SATB1 mRNA表达量低于正常对照组产妇,差异有统计学意义(均P<0. 05);子痫前期组产妇胎盘组织碾磨液中氧化指标脂质过氧化氢(LHP)、活性氧(ROS)的含量高于正常对照组产妇,抗氧化指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的含量低于正常对照组产妇,差异有统计学意义(均P<0. 05);子痫前期组产妇胎盘组织碾磨液中炎症指标高迁移率族蛋白(HMGB1)、C反应蛋白(CRP)、白介素-6 (IL-6)的含量高于正常对照组产妇,差异有统计学意义(均P<0. 05)。结论子痫前期产妇胎盘组织中Gas6、SATB1 mRNA表达量存在异常,可客观反映机体氧化应激、炎性反应程度。

基于磁性分子印迹胶体磁珠分离和GC-MS检测血清中脂联素

采用分子印迹技术,以3,4-二氯苯乙酸（DCP）作为模板分子合成了MWCNTs@DMMIPs材料,克服了脂联素（ADPN）质量浓度低,不易形成氢键等缺点,增强了材料的吸附能力.实验对血类中常见的ADPN用GC-MS方法进行检测,检测限为0.32μg·m L-1,回收率为83.2%~101.2%.材料适用于血类中常见的ADPN检测.

分子印迹预处理在红霉素检测中的应用研究

[目的]建立1种在实际样品中快速检测残留红霉素的方法。[方法]采用沉淀聚合法制备红霉素分子印迹聚合物，考察了不同分散相对分子印迹聚合物制备及其对吸附性能的影响，并通过Scatchard模型进一步评价了聚合物的吸附特性，探究了红霉素分子印迹聚合物在其结构类似物及实际食品样品中常见抗生素的吸附特异性，并对牛奶和鸡蛋样品进行了加标回收试验。[结果]当模板分子、功能单体、交联剂的比例为1∶4∶20时，印迹聚合物的吸附性能最好，印迹因子能达到3．45，该方法制得的印迹聚合物达到吸附平衡的时间只需要5 h，平衡时的吸附量达到56μg／g，大大缩短了沉淀聚合法制得的聚合物所需的平衡时间。在实际样品中的平均回收率为82．99％～98．09％。[结论]该研究为红霉素的快速检测提供了新方法，简化了检测步骤，提高了检测效率，具有广阔的应用前景。

过表达SATB1保护人滋养细胞氧化应激损伤的机制研究

目的探讨富集AT序列的特异性结合蛋白1(SATB1)参与人绒毛外滋养细胞株(HTR8/SVneo)氧化应激损伤的机制。方法收集2013年9月至2014年9月在重庆医科大学附属第一医院产科行选择性剖宫产术的子痫前期孕妇(n=22)和正常足月妊娠行择期剖宫产术的孕妇的胎盘组织(n=22)。采用免疫组化和Western blotting(WB)检测正常晚孕期及子痫前期胎盘组织中SATB1的表达。构建SATB1过表达慢病毒载体(LV-SATB1)和阴性对照载体(LV-NC)。将滋养细胞分为正常培养对照组、缺氧/复氧(H/R)培养组、LV-SATB1+H/R培养组、LV-NC+H/R培养组。利用免疫荧光和WB法检测SATB1在各组细胞中的表达。采用流式细胞仪检测细胞凋亡指数及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。利用Transwell小室模型检测细胞的体外侵袭率。结果 SATB1在子痫前期中的表达显著低于正常晚孕组(0.24±0.02 vs.0.12±0.01,t=9.35,P<0.05)。转染LV-SATB1可显著提升H/R培养组的SATB1蛋白水平(0.92±0.17 vs.0.58±0.15,P<0.01)。LV-SATB1可抑制H/R导致的细胞凋亡率上升及ROS聚集(P<0.01)。H/R组细胞侵袭能力低于正常培养组;上调SATB1的表达可提升H/R组细胞的体外侵袭能力(34.33±10.08 vs.19.33±6.52,P<0.05)。结论过表达SATB1可以逆转滋养细胞氧化应激损伤,其有望成为研究子痫前期发病机制的新靶点。

SATB1与BRMS1基因在乳腺癌中的作用研究进展

富集AT序列的特异性结合蛋白-1(special A-T rich binding protein-1,SATB1)为乳腺癌基因组的"组织者",可使肿瘤细胞的基因表达模式发生改变,在转移过程中起关键性作用。乳腺癌转移抑制基因1(breast cancermetastasis suppressor 1,BRMS1)具有抑制肿瘤细胞转移的能力,主要通过调节细胞间信号转导及其他转移抑制基因的表达而抑制乳腺癌的转移,但不影响肿瘤生长。SATB1可能通过下调BRMS1的表达促进乳腺癌细胞转移。本文就SATB1及BRMS1在乳腺癌转移中的作用机制作一综述。

SATB1在人喉鳞状细胞癌细胞株Hep-2侵袭转移中的作用及其机制研究

目的探讨富集AT序列的特异性结合蛋白1(SATB1)在人喉鳞状细胞癌细胞株Hep-2侵袭转移中的作用及其机制。方法体外培养Hep-2细胞并分为两组,实验组细胞转染靶向SATB1基因的小干扰RNA(SATB1-siRNA),对照组细胞转染阴性对照siRNA(NC-siRNA)。分别于转染前和转染后48 h,采用实时荧光定量PCR检测两组细胞中SATB1、E-钙黏素(E-cadherin)和锌指转录因子(Snail)基因的mRNA表达水平,Transwell小室侵袭实验检测两组细胞的侵袭能力,细胞划痕实验检测两组细胞划痕后48 h的转移能力。结果转染前两组细胞中SATB1、E-cadherin和Snail基因的mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。与对照组相比,实验组转染后细胞中SATB1和Snail基因的mRNA相对表达量均降低,而E-cadherin基因的mRNA相对表达量升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。转染后两组细胞的Transwell穿膜细胞数和细胞迁移距离均减少,且实验组低于对照组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论SATB1可促进Hep-2细胞的侵袭转移,其作用机制可能为下调E-cadherin和上调Snail基因表达从而诱导上皮间质转化。