胃癌中Krülppel样核转录因子-4的表达与核转录因子特异性蛋白-1和Notch跨膜受体-1表达的关系及意义

目的研究胃癌组织中Krülppel样核转录因子-4(KLF4)和核转录因子特异性蛋白-1(Sp1)、Notch跨膜受体-1(Notch1)的表达,探讨KLF4和Sp1、Notch1在胃癌组织中表达的相关关系及三者与胃癌临床病理的关系。方法采用免疫组织化学染色法,分别对76例胃癌手术标本及30名同期收集的正常胃组织标本中Sp1、Notch1和KLF4进行蛋白检测,分析三者的表达水平与临床病理的关系及KLF4的表达与Sp1、Notch1表达的关系。结果正常胃组织标本中可见KLF4蛋白强阳性表达率为77%,在胃癌组织中表达较弱或表达缺失;Sp1在胃癌组织中阳性表达率为63%,正常组13%;Notch1在胃癌组织中阳性表达为66%,明显高于正常胃组织的23%,且三者表达与胃癌分化程度、胃癌分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05)。KLF4和Notch1在胃癌中表达呈负相关(r=-0.629,P<0.05),KLF4和Sp1在胃癌组织中表达呈负相关(r=-0.566,P<0.05)。结论 KLF4和Sp1、Notch1在胃癌组织中表达失衡可能对胃癌的发生发展起重要作用,三者可能成为胃癌预后的判断指标及潜在的治疗靶点。

补肾固冲方逆转Th1/Th2亚群失衡治疗URSA作用与机制研究

目的:探讨Th1/Th2亚群失衡在原因不明性复发性自然流产(URSA)中的作用及补肾固冲方逆转Th1/Th2亚群失衡治疗URSA的作用及分子机制。方法:URSA患者30例,给予补肾固冲方治疗,正常妊娠妇女30例为正常对照组,流式细胞术胞内外双染色法检测URSA患者治疗前后及正常妊娠妇女外周血Th1/Th2亚群分化状态,RT-PCR法检测Th1亚群特异性核转录因子T-bet、Th2亚群特异性核转录因子GATA-3mRNA转录水平。结果:与正常妊娠妇女比较,URSA患者外周血Th1亚群比例显著升高(P<0.05),Th2亚群比例显著降低(P<0.05),Th1/Th2比率显著升高(P<0.05)。补肾固冲方治疗后,URSA患者Th1亚群比例及T-bet转录水平显著降低(P<0.05),Th2亚群比例及GATA-3转录水平显著升高(P<0.05),Th1/Th2比率明显降低(P<0.05)。相关性分析显示,URSA患者治疗后子宫出血天数与Th1亚群比例呈显著正相关(P<0.05),与Th2亚群比例呈负相关,与Th1/Th2亚群呈正相关。结论:URSA患者存在Th1/Th2亚群失衡,补肾固冲方通过上调T-bet转录水平、下调GATA-3转录水平,优势诱导Th2亚群分化,逆转Th1/Th2亚群失衡,进而治疗URSA。

人核心结合因子基因P2启动子区报告基因载体的构建及鉴定

目的 构建含核心结合因子（RUNX2）基因P2启动子区的荧光素酶报告基因载体,在人主动脉瓣瓣膜间质细胞中检测其活性,并观察骨形态发生蛋白-7（BMP-7）对RUNX2启动子活性的影响.方法 以人基因组DNA为模板,利用聚合酶链反应（PCR）技术扩增人RUNX2基因P2启动子区域,扩增产物经Kpn Ⅰ和Nhe Ⅰ双酶切后插入到pGL3-Basic中,重组质粒pGL3-RUNX2-P2经测序正确后转染人主动脉瓣瓣膜间质细胞,并以BMP-7处理细胞,检测荧光素酶活性变化.结果 将RUNX2基因P2启动子区域1.5 kbp大小基因片段克隆入pGL3-Basic中,测序结果表明序列正确.转染pGL3-RUNX2-P2的瓣膜间质细胞中荧光素酶活性较转染空载体pGL3-Basic组明显增加（0.273±0.032比0.028±0.005,P＜0.05）.BMP-7可增强RUNX2启动活性（0.474±0.059比0.273±0.032,P＜0.05）.结论 成功构建含有人RUNX2基因P2启动子区的荧光素酶报告基因载体,BMP-7可通过增强RUNX2启动子活性调控其表达.

Sp1和miR-92b在口腔癌组织中的表达及其意义

目的探讨核转录因子特异性蛋白1(Sp1)和miR-92b在口腔癌组织中的表达及其意义,为提高口腔癌的诊治水平提供依据。方法对我院2012年3月至2014年9月手术切除的73例口腔癌组织、48例癌旁正常口腔组织的临床病理特征进行回顾性分析,比较两组中Sp1和miR-92b的表达水平,并分析其与临床病理特征的相关性。结果口腔癌组织Sp1阳性表达率为80.82%,miR-92b阳性表达率为72.60%;癌旁正常口腔组织Sp1阳性表达率为8.33%,miR-92b阳性表达率为10.42%;两组Sp1、miR-92b阳性表达率比较差异显著(P<0.05)。27例淋巴结转移患者中,24例Sp1表达阳性,25例miR-92b表达阳性。口腔癌组织中Sp1、miR-92b表达与患者的性别、年龄、肿瘤分化类型无关(P>0.05),但与患者肿瘤分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05);经多元Cox逐步回归分析:肿瘤分期晚(Ⅲ+Ⅳ期)、伴有淋巴结转移等因素为口腔癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论口腔癌组织中Sp1、miR-92b阳性表达率高,其表达水平与肿瘤分期及淋巴结转移密切相关,联合检测对评估口腔癌预后具有重要意义。