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细胞SELEX技术用于胰腺癌细胞特异性适配体的筛选及鉴定
被引量:
1
1
作者
黄旭方
仲津漫
+3 位作者
赵娓娓
文娣娣
任静
宦怡
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期642-648,共7页
细胞SELEX是目前常用的筛选细胞特异性适配体的技术。胰腺癌细胞特异性适配体在胰腺癌的诊断和治疗中有巨大的应用潜力。本研究拟通过该技术获得特异性识别胰腺癌PANC-1细胞的适配体,并对所筛选的适配体进行功能鉴定。本研究以胰腺癌PAN...
细胞SELEX是目前常用的筛选细胞特异性适配体的技术。胰腺癌细胞特异性适配体在胰腺癌的诊断和治疗中有巨大的应用潜力。本研究拟通过该技术获得特异性识别胰腺癌PANC-1细胞的适配体,并对所筛选的适配体进行功能鉴定。本研究以胰腺癌PANC-1细胞为正筛细胞,正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7为负筛细胞,通过磁珠法细胞SELEX技术进行筛选。经过12轮筛选,对筛选文库进行PCR扩增、质粒转染、单克隆挑选及测序,获得2条适配体Apt-5和Apt-12。流式细胞术检测发现,适配体Apt-5和Apt-12可特异性识别PANC-1细胞,其Kd值分别为8.27±2.10 nmol/L和8.88±2.51 nmol/L,Kd值均处于纳摩尔级别。通过RNA结构预测,2条适配体的二级结构均为茎-环结构。细胞免疫荧光验证了适配体的结合部位为细胞膜表面。本研究表明,通过磁珠法细胞SELEX技术,成功获得可特异性识别胰腺癌PANC-1细胞的适配体。该适配体有望成为胰腺癌诊断和治疗中的特异性分子靶向剂。
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关键词
细胞SELEX
特异性适配体
胰腺癌
下载PDF
职称材料
基于镉特异性功能化核酸适配体测定痕量镉的共振光散射新方法
被引量:
2
2
作者
唐律
李贵荣
+1 位作者
徐梦媛
杨洋
《应用化工》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期627-630,共4页
镉特异性功能化核酸适配体(FA_(Cd))在无镉体系中能阻碍金纳米(GNPs)与罗丹明6G(Rh6G)聚集,体系共振光散射强度较低。当体系中存在镉离子时,FACd与之特异性结合,从RNA位点处断裂产生适配体片段(FAF),FAF与GNPs和Rh6G形成GNPs-FAF-Rh6G...
镉特异性功能化核酸适配体(FA_(Cd))在无镉体系中能阻碍金纳米(GNPs)与罗丹明6G(Rh6G)聚集,体系共振光散射强度较低。当体系中存在镉离子时,FACd与之特异性结合,从RNA位点处断裂产生适配体片段(FAF),FAF与GNPs和Rh6G形成GNPs-FAF-Rh6G聚合物,共振光散射强度大幅增加,共振光散射强度值(I_(RLS))与镉的浓度(cCd^(2+))在0.28~11.2 ng/mL范围内呈现良好线性关系,检出限为0.04 ng/mL,相对标准偏差≤5%,加标回收率为96.4%~101.4%。
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关键词
镉
特
异性
功能化核酸
适
配体
金纳米
罗丹明
共振光散射法
镉
下载PDF
职称材料
题名
细胞SELEX技术用于胰腺癌细胞特异性适配体的筛选及鉴定
被引量:
1
1
作者
黄旭方
仲津漫
赵娓娓
文娣娣
任静
宦怡
机构
空军军医大学西京医院放射科
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第6期642-648,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.81220108011
No.81370039)资助~~
文摘
细胞SELEX是目前常用的筛选细胞特异性适配体的技术。胰腺癌细胞特异性适配体在胰腺癌的诊断和治疗中有巨大的应用潜力。本研究拟通过该技术获得特异性识别胰腺癌PANC-1细胞的适配体,并对所筛选的适配体进行功能鉴定。本研究以胰腺癌PANC-1细胞为正筛细胞,正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7为负筛细胞,通过磁珠法细胞SELEX技术进行筛选。经过12轮筛选,对筛选文库进行PCR扩增、质粒转染、单克隆挑选及测序,获得2条适配体Apt-5和Apt-12。流式细胞术检测发现,适配体Apt-5和Apt-12可特异性识别PANC-1细胞,其Kd值分别为8.27±2.10 nmol/L和8.88±2.51 nmol/L,Kd值均处于纳摩尔级别。通过RNA结构预测,2条适配体的二级结构均为茎-环结构。细胞免疫荧光验证了适配体的结合部位为细胞膜表面。本研究表明,通过磁珠法细胞SELEX技术,成功获得可特异性识别胰腺癌PANC-1细胞的适配体。该适配体有望成为胰腺癌诊断和治疗中的特异性分子靶向剂。
关键词
细胞SELEX
特异性适配体
胰腺癌
Keywords
Cell-SELEX
DNA aptamer
pancreatic cancer
分类号
R73 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
基于镉特异性功能化核酸适配体测定痕量镉的共振光散射新方法
被引量:
2
2
作者
唐律
李贵荣
徐梦媛
杨洋
机构
南华大学公共卫生学院
出处
《应用化工》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期627-630,共4页
基金
湖南省教育厅重点课题(14A123)
湖南省科技厅科技计划重点课题(2015SK2001)
文摘
镉特异性功能化核酸适配体(FA_(Cd))在无镉体系中能阻碍金纳米(GNPs)与罗丹明6G(Rh6G)聚集,体系共振光散射强度较低。当体系中存在镉离子时,FACd与之特异性结合,从RNA位点处断裂产生适配体片段(FAF),FAF与GNPs和Rh6G形成GNPs-FAF-Rh6G聚合物,共振光散射强度大幅增加,共振光散射强度值(I_(RLS))与镉的浓度(cCd^(2+))在0.28~11.2 ng/mL范围内呈现良好线性关系,检出限为0.04 ng/mL,相对标准偏差≤5%,加标回收率为96.4%~101.4%。
关键词
镉
特
异性
功能化核酸
适
配体
金纳米
罗丹明
共振光散射法
镉
Keywords
cadmium specific functional aptamer
gold nanoparticles
Rhodamine 6G
resonance light scattering method
cadmium
分类号
TQ581 [化学工程—精细化工]
R115 [医药卫生—公共卫生与预防医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
细胞SELEX技术用于胰腺癌细胞特异性适配体的筛选及鉴定
黄旭方
仲津漫
赵娓娓
文娣娣
任静
宦怡
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
1
下载PDF
职称材料
2
基于镉特异性功能化核酸适配体测定痕量镉的共振光散射新方法
唐律
李贵荣
徐梦媛
杨洋
《应用化工》
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
统计分析
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