基于酵母β-葡聚糖载体的口服OVA疫苗(WGP-OVA疫苗)诱导体液免疫及抗原特异性T细胞免疫反应

目的:探讨口服WGP-OVA疫苗对C57BL/6小鼠体液免疫及抗原特异性T细胞免疫的诱导作用。方法:分别连续给予C57BL/6小鼠口服PBS、WGP及WGP-OVA 17 d后,使用LEGENDplexTM多因子流式检测试剂盒检测给药后小鼠血清中IgG1、IgG2a、IgG3及IgM的含量;HE染色比较各组小鼠脾脏淋巴小结的大小。取小鼠腹股沟淋巴结(ILNs)制备单细胞悬液,流式细胞仪(FACS)检测淋巴结内F4/80+巨噬细胞及F4/80+SIINFEKL+巨噬细胞比例,分析WGP-OVA对巨噬细胞在ILNs内的浸润及抗原提呈情况;同时通过MHC Tetramer染色检测抗原特异性CD8+T细胞比例,明确WGP-OVA疫苗对T细胞免疫的诱导作用。结果:与PBS组相比,WGP-OVA能显著诱导IgG1、IgG2a、IgG3及IgM的分泌,增大脾脏内淋巴小结。此外,口服WGPOVA疫苗能促进F4/80+巨噬细胞向淋巴结浸润,诱导巨噬细胞对OVA的抗原提呈,同时增加淋巴结内OVA特异性CD8+CTLs的数量。结论:口服WGP-OVA疫苗能诱导C57BL/6小鼠体液免疫及抗原特异性T细胞免疫反应。

慢性乙型肝炎及HBV相关肝硬化和肝细胞癌患者间HBV特异性CD8^(+) T细胞反应活性的比较分析

目的 比较分析慢性乙型肝炎及HBV相关肝硬化和肝细胞癌患者间的HBV特异性CD8^(+)T细胞反应活性。方法 选取124例慢乙肝、36例HBV相关肝硬化和114例HBV相关肝细胞癌患者,采用独创的ELISPOT系统定量检测患者外周血中具有反应活性的HBV特异性CD8^(+)T细胞数量;另对19例慢乙肝患者和20例肝细胞癌患者进行纵向追踪(每3~5月检测1次)。结果 慢乙肝组的HBV特异性CD8^(+)T细反应活性与肝硬化组无统计学差异,但明显低于肝细胞癌组,尤其是HBsAg、HBpol和HBe/cAg抗原特异性T细胞。慢乙肝组中,ALT和AST水平正常组、低病毒载量组比ALT和AST水平异常组、高病毒载量组都呈现更高的HBV特异性CD8^(+)T细胞反应活性。NUCs治疗的时间长短对慢乙肝患者HBV特异性T细胞的功能恢复有一定影响,但在相同时长内药物种类对其影响较弱。肝硬化组中,HBeAg阳性组的HBV特异性CD8^(+)T细胞反应活性明显高于HBeAg阴性组(P=0.03)。肝细胞癌组中,AFP正常和DCP正常组的HBV特异性CD8^(+)T细胞反应活性明显高于AFP和DCP异常组。纵向研究结果显示,慢乙肝患者使用NUCs治疗期间,HBV特异性CD8^(+)T细胞反应活性呈逐渐上升趋势;而肝细胞癌患者在靶向药物联合免疫治疗期间,HBV特异性CD8^(+)T细胞反应活性呈现明显上升。结论 HBV特异性CD8^(+)T细胞反应活性在慢乙肝、肝硬化和肝细胞癌的进程中存在差异,且受到病毒学指标、肿瘤标志物以及药物治疗的影响,因此在临床治疗中应密切关注HBV特异性CD8^(+)T细胞反应活性的变化。

结核特异性CD4^(+)HLA-G^(+)和CD4^(+)CD69^(+)T细胞对活动性肺结核诊断及疗效评估价值

结核病仍是我国乃至全球的重大公共卫生问题之一[1]。如何早期诊断并监测结核病疗效是控制结核病的主要挑战。痰培养、痰涂片阳性以及其转阴分别是诊断和监测抗结核疗效的实验室常用方法,但这些方法均存在灵敏度低、耗时长等缺点。因此,可快速、灵敏的代替方法亟需临床探寻。目前关于结核特异性生物标志物用于结核的诊断和疗效监测少有研究报道。

特异性T细胞体外释放酶联免疫法检测结核病的临床应用

目的:探究特异性T细胞体外释放酶联免疫法检测结核病的临床应用价值。方法:选取疑似发生结核病患者128例进行临床研究,患者均在医护人员辅助下完成结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法、结核分枝杆菌分离培养检验,以结核分枝杆菌分离培养结果为金标准,统计前两种方法的诊断结果与诊断效能。结果:结核分枝杆菌分离培养结果如下,阳性、阴性检出率分别是62.50%与37.50%。结核菌素皮肤试验、特异性T细胞体外释放酶联免疫法的阳性率、阴性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。特异性T细胞体外释放酶联免疫法的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值大于结核菌素皮肤试验(P<0.05)。结论:结核病临床诊断中应用特异性T细胞体外释放酶联免疫法,诊断效能较好,值得临床推广。

基于Th1/Th2表达探究特异性免疫对哮喘小鼠肺泡灌洗液炎性反应的影响

目的 基于Th1/Th2表达探究特异性免疫对哮喘小鼠肺泡灌洗液炎性反应的影响。方法 选择40只小鼠分为对照组、模型组、SIT组及地塞米松组,每组10只。除了对照组外均建立哮喘小鼠模型,激发阶段后SIT组注射1 mg的OVA,地塞米松组灌胃0.075 mg/mL溶液,其余大鼠注射等体积的PBS溶液。采用肺功能仪检测气道反应;经瑞氏-吉姆萨染色观察肺泡灌洗液(BALF)炎性细胞;酶联免疫吸附法(ELISA)检测BALF中细胞因子IL-13、IL-4、IL-5及INF-γ;HE染色观察肺组织形态;PAS染色观察肺气道上皮杯状细胞活性;流式细胞术检测肺组织中Th1及Th2占比。结果 特异性免疫可显著降低模型小鼠气道高反应性、减少BALF内炎性细胞活性,并可通过升高Th1降低Th2而抑制哮喘发生发展。结论 特异性免疫可缓解哮喘小鼠气道高反应性,抑制炎性反应,并通过改善气道上皮杯状细胞增生而缓解通气,可能与调节Th1/Th2表达相关。

特异性免疫治疗通过改善Th1/Th2免疫失衡减轻哮喘小鼠肺部炎症

目的:探讨特异性免疫治疗(SIT)对哮喘小鼠肺部炎症反应的影响及其机制。方法:小鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、SIT组及地塞米松组。模型组、SIT组及地塞米松组均建立哮喘小鼠模型,建模激发阶段后SIT组注射1 mg的卵白蛋白(OVA),地塞米松组灌胃0.075 mg/mL地塞米松溶液,其余小鼠注射等体积的PBS溶液,后进入雾化阶段。采用肺功能仪检测气道反应;瑞氏-吉姆萨染色观察肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞;ELISA检测BALF中细胞因子IL-13、IL-4、IL-5及干扰素-γ(IFNγ);H-E染色观察肺组织病理形态;过碘酸雪夫(PAS)染色观察肺气道上皮杯状细胞;流式细胞术检测肺组织中IFNγ及IL-4占比。结果:在6.25、12.50、25.00μg/kg及50.00μg/kg的乙酰胆碱作用下,模型组小鼠气道反应高于对照组,SIT组及地塞米松组的气道反应均低于模型组,但SIT组及地塞米松组间差异无统计学意义。与对照组相比,模型组小鼠BALF中细胞总数、中性粒细胞(%)、嗜酸性粒细胞(%)、IL-4、IL-5、IL-13、气道上皮杯状细胞、辅助型T细胞2(Th2)均升高,IFNγ降低;与模型组相比,SIT组BALF中细胞总数、中性粒细胞(%)、嗜酸性粒细胞(%)、IL-4、IL-5、IL-13、气道上皮杯状细胞降低,IFNγ升高,SIT组与地塞米松组间差异无统计学意义。对照组小鼠肺泡及气道结构规整,气道壁较薄,管腔无狭窄;模型组小鼠肺组织结构破坏显著,气道壁较厚,肺泡结构破坏显著,炎症浸润明显且血管周围存在水肿。SIT组及地塞米松组小鼠肺组织炎症浸润改善,血管水肿程度降低,管腔狭窄缓解。结论:SIT可缓解哮喘小鼠气道高反应性,抑制BALF中炎症细胞及炎症因子活性,通过抑制气道上皮杯状细胞增生而改善通气,其机制与改善肺组织中辅助型T细胞1/辅助型T细胞2免疫失衡相关。

重症肌无力患者外周血乙酰胆碱特异性单个核细胞IFN-γ和TGF-β的变化

目的 研究重症肌无力 (myastheniagravis,MG)外周血AChR特异性单个核细胞IFN -γ和TGF -β的分泌能力 ,探讨细胞因子IFN -γ和TGF -β在MG发病机制中的作用。方法 应用体外细胞培养和ELISA方法检测MG患者外周血单个核细胞 (PBMNC)经AChR刺激后产生IFN -γ和TGF -β的水平。结果 急性期MG患者IFN -γ和TGF -β的诱生水平高于正常对照组 (P <0 0 1 ) ,AChRAb阳性组MG患者IFN -γ的诱生水平高于AChRAb阴性组 (P <0 0 1 )。

髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4+T细胞免疫记忆形成的影响

目的研究髓系细胞缺失ATG5对疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成的影响。方法构建髓系细胞特异缺失ATG5的条件敲除小鼠,在其感染约氏疟原虫Plasmodium yoelii(P.yoelii)17XNL自愈后1个月、3个月和6个月分别再次感染该虫株,观察其原虫率变化。同时采用流式细胞术检测髓系细胞ATG5条件缺失感染自愈小鼠疟原虫特异性免疫记忆CD4^(+)T细胞频率和数量的变化。结果成功构建髓系细胞ATG5条件缺失实验小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(+))。与对照组(ATG5^(f/f)-LysM cre^(-))相比,初次感染P.y 17XNL的实验组小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(+))原虫血症明显低于对照组小鼠(ATG5^(f/f)-LysM cre^(-))。在上述感染小鼠自愈后1个月、3个月和6个月再次感染P.y 17XNL,结果发现感染小鼠原虫血症与初次感染相比,均显著降低,且所有感染小鼠在攻击后6~8 d内完全清除体内疟原虫。流式检测后发现,ATG5^(f/f)-LysM cre^(+)与ATGf/f-LysM cre^(-)小鼠感染自愈后3个月或6个月,其脾脏疟原虫特异性免疫记忆CD4^(+)T细胞频率和数量均无统计学差异。结论P.y 17XNL感染自愈小鼠可以有效诱导宿主免疫记忆,但髓系细胞缺失ATG5不影响疟原虫特异性CD4^(+)T细胞免疫记忆形成。

自然杀伤细胞和神经元特异性烯醇化酶及T淋巴细胞亚群在新生儿化脓性脑膜炎外周血中的表达及临床意义

目的探讨自然杀伤细胞(NK)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))在新生儿化脓性脑膜炎外周血中的表达及临床意义。方法选取2021年10月至2022年12月赣州市妇幼保健院收治的30例化脓性脑膜炎患儿作为观察组,另选取30名同期出生的健康新生儿作为对照组。两组于入组后次日清晨采集空腹静脉血,观察组治疗后10 d再次采集空腹静脉血。比较两组外周血NK、NSE与T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))水平。结果治疗前,观察组NK、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平及CD4^(+)/CD8^(+)均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组NK、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平及CD4^(+)/CD8^(+)均高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),但与对照组比较差异无统计学意义。治疗前,观察组NSE水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组NSE水平低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),但与对照组比较差异无统计学意义。ROC曲线分析结果显示,NK诊断价值最高,其次为CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、NSE、CD4^(+)和CD8^(+)。结论新生儿一旦罹患化脓性脑膜炎,会导致外周血中T淋巴细胞紊乱失调,T淋巴细胞免疫功能长时间处于抑制状态,促使脑神经受到不同程度损伤,而通过观察NK细胞、NSE及CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)在外周血中的表达,可为临床诊疗提供有力的参考依据,从而改善其免疫功能,有效控制病情,促进患儿病情康复。

丙戊酸钠辅助治疗小儿癫痫临床疗效及血清NSE、Hcy与T细胞17水平变化分析

目的 分析丙戊酸钠辅助治疗小儿癫痫临床疗效及对血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、同型半胱氨酸(Hcy)及T细胞17水平(Th17)变化的影响。方法 选取2020年1月至2023年3月邯郸市第二医院收治的小儿癫痫患儿152例,根据治疗方案不同分为对照组73例(托吡酯)和观察组79例(丙戊酸钠+托吡酯)。比较两组总疗效率、炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-2(IL-2)、Hcy]、脑源性神经营养因子(BDNF)、NSE、Th17水平及不良反应。结果 观察组总疗效率为91.81%,对照组总疗效率为75.29%,观察组总疗效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后TNF-α、IL-2、NSE、Hcy、Th17水平均下降,且观察组TNF-α、IL-2、NSE、Hcy、Th17水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后BDNF水平均上升,且观察组BDNF水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组及观察组不良反应总发生率分别为9.59%、5.04%,两组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 丙戊酸钠辅助托吡酯治疗小儿癫痫临床疗效较为理想,可有效减轻炎症反应,显著降低NSE、Th17水平。

结核杆菌抗原特异性激发人γδT细胞活化信号涉及Ras/Erk途径

目的 :探讨Ras Erk通路是否参与结核杆菌低分子多肽抗原 (Mtb Ag)启动的γδT细胞活化信号转导途径。方法 :分离获取PBMC ,用佛波醇酯 (PMA)和离子霉素 (IM) ,CD3mAb或Mtb Ag刺激不同时间 ,或PBMC先经PD980 5 9处理后再刺激培养 ;用荧光单抗染色后在流式细胞仪测定细胞CD6 9分子的表达 ;计数培养扩增 10天的细胞数量。结果 :PBMC用PMA +IM刺激 6小时 ,总T细胞和γδT细胞中的CD6 9表达均达高峰 (均 >99% ) ,用CD3mAb刺激 2 4小时 ,均达高峰 (均在 5 5 %左右 ) ,用Mtb Ag刺激 2 4小时 ,亦均达高峰 ,但总T细胞和γδT细胞中CD6 9分别为 16 .0 %和 75 2 % ;用PD980 5 9预处理PBMC ,可明显抑制Mtb Ag激活的γδT细胞CD6 9表达和γδT细胞的增殖。结论 :Mtb Ag可特异性激活γδT细胞 ,其活化信号转导需通过Ras Erk通路。

猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白在干酪乳杆菌中的共表达及免疫小鼠特异性抗体的测定

将分别编码猪瘟病毒T细胞表位E290多肽和猪细小病毒主要保护性抗原VP2蛋白的重组基因插入干酪乳杆菌分泌型表达载体pPG中,构建了重组表达载体pPG-VP2-E290,将其电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393,获得了猪瘟病毒T细胞表位E290多肽与猪细小病毒VP2蛋白的乳酸菌共表达系统,经2%乳糖在MRS培养基中的诱导表达,对诱导表达的菌体及培养上清液进行SDS-PAGE检测表明,有约70kDa蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符。Western blot分析结果表明所表达的蛋白具有与天然病毒蛋白一样的抗原特异性。以诱导表达上清液作为抗原进行的间接ELISA实验也表明,重组的目的蛋白获得了分泌表达。将该重组干酪乳杆菌经口服接种途径免疫BALB/c小鼠,收集粪便样品检测小鼠产生抗PPV的特异性sIgA抗体,采集血液样本检测血清中抗PPV及抗E290的特异性IgG。结果表明分泌型的重组菌pPG-VP2-E290/L.casei 393免疫小鼠能够产生明显的抗体水平,为重组猪瘟与猪细小病毒乳酸菌口服活菌疫苗的研制奠定了重要的物质基础。

口蹄疫重组鸡痘病毒诱导猪特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性检测

目的:评价口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1诱导猪产生特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性的能力。方法:用PCR方法亚克隆O型FMDVVP1基因C末端部分片段(第1 30～2 1 3AA)。将其插入真核表达载体pDisplay中,构建质粒pDisplay- mVP1。将pDisplay -mVP1转染PK 1 5细胞,经3次G41 8加压筛选,并用RT- PCR和IFA鉴定,证明获得表达目的基因的PK 1 5 /pDisplay- mVP1细胞。最后,利用该细胞作为靶细胞,用LDH法检测口蹄疫重组鸡痘病毒vUTAL3CP1免疫猪的特异性CTL杀伤活性。结果:vUTAL3CP1免疫组在效靶比2 5∶1和5 0∶1时,CTL裂解活性分别达到42 . 84%±3 2. 1 %和61 . 94%±4 2. 8% ,显著高于灭活疫苗组与其它对照组(p <0 . 0 1 )。结论:vUTAL3CP1可以诱导猪产生高水平的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性,为进一步的FMDV基因工程疫苗的研究奠定了基础。

PTD-HBcAg融合蛋白经树突状细胞诱导特异性CTL抑制HBV的体外研究

目的:探讨经PTD-HBcAg融合蛋白致敏的树突状细胞(DCs)体外诱导特异性细胞毒T淋巴细胞(CTLs)对HBV的抑制作用。方法:体外分离培养小鼠髓源性DC,加入融合蛋白刺激DC成熟后与T淋巴细胞共培养,ELISA法检测T淋巴细胞上清中IL-2、IL-4、IL-10和INF-γ的分泌水平,流式细胞术检测胞内细胞因子水平,乳酸脱氢酶释放试验检测特异性CTL活性,并对HepG2.2.15细胞上清中HBsAg及HBV DNA水平进行检测。结果:经不同融合蛋白刺激的DCs能有效促进T淋巴细胞的细胞因子分泌,同时融合蛋白PTD-HBcAg组中IL-2(552.7±117.5ng/L)和INF-γ(150.6±7.945ng/L)明显高于HBcAg组中IL-2(420±12.47ng/L)和INF-γ(107.5±12.19ng/L)分泌。流式细胞计数术检测的PTD-HBcAg融合蛋白诱导CTL细胞水平明显高于对照组。经PTD-HBcAg融合蛋白诱导的CTL比HBcAg有明显的特异性杀伤作用(P<0.05),同时对HBsAg及HBV DNA水平有明显的抑制作用。结论:经PTD-HBcAg融合蛋白致敏的DCs能有效刺激T淋巴细胞分泌细胞因子及增加细胞毒T淋巴细胞的表达,并增强特异性CTL活性及对HepG2.2.15细胞上清中HBsAg及HBV DNA水平的抑制。

特异性免疫治疗对变应性鼻炎外周血CD4+CD25+T调节细胞的影响及远期疗效的观察

【目的】通过检测变应性鼻炎患者皮下特异性免疫治疗前后外周血CD4+T淋巴细胞表面CD25表达情况的变化及观察相关指标,探讨皮下特异性免疫治疗的机制,评价其远期疗效。【方法】将90例确诊变应性鼻炎患者随机分为免疫治疗组和药物治疗组,每组45例。通过症状评分、使用药物评分和鼻结膜炎相关生活质量调查问卷等评价临床疗效,同时通过流式细胞仪检测外周血CD4+T淋巴细胞表面CD25表达情况。【结果】随着特异性免疫治疗的进行,免疫治疗组与药物治疗组症状评分无统计学差异;而免疫治疗组药物评分要明显低于药物治疗组,鼻结膜炎相关生活质量调查问卷评分要高于药物治疗组,差异有统计学意义。变应性鼻炎患者外周血CD4+CD25+T淋巴细胞比例要低于健康对照组,免疫治疗组治疗3年后比例较治疗前升高,差异有统计学意义。而药物治疗组的比例没有明显提高。【结论】经过3年的特异性免疫治疗后,患者症状控制理想,对症治疗的药物明显减少,生活质量明显提高。这可能与影响CD4+CD25+T调节细胞的功能有关。

新疆维、汉族鼻咽癌患者LMP2A特异性T细胞免疫反应差异性研究

目的：探讨新疆维吾尔族、汉族鼻咽癌患者外周血潜伏膜蛋白2 A（LMP2 A）特异性T细胞免疫反应的差异性。方法选择114例鼻咽癌初治患者（维吾尔族48例，汉族66例）及120例健康志愿者（维吾尔族50例，汉族70例），治疗前抽取肘静脉血，分离外周血单个核细胞，采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）检测外周血中LMP2 A特异性T细胞（CTL）水平。比较鼻咽癌患者与健康志愿者、维吾尔族患者与维吾尔族健康志愿者、汉族患者与汉族健康志愿者、维吾尔族患者与汉族患者外周血 LMP2 A特异性 CTL频数的差异。结果鼻咽癌患者的外周血 LMP2A特异性CTL水平明显低于健康志愿者（P=0．0316）；维吾尔族鼻咽癌患者和汉族鼻咽癌患者分别与同民族健康志愿者比较，外周血 LMP2 A特异性 CTL频数均低于同民族健康志愿者（P=0．0329，P =0．0479），差异有统计学意义；汉族鼻咽癌的外周血中 LMP2A特异性 CTL水平亦高于维吾尔族鼻咽癌患者，差异有统计学意义（P =0．0227）。结论鼻咽癌患者对于 LMP2A特异性的T细胞免疫反应明显低于健康人群，这可能是 EBV潜伏感染，最终导致鼻咽癌发生的重要原因之一。

调节性T细胞在过敏性鼻炎及抗原特异性免疫治疗中的作用

免疫系统是一个高速运转的复杂网络系统,当机体遇到环境中的抗原、细菌、病毒等异物侵袭,它会及时做出相应的免疫反应。过敏性疾病的发生是一个复杂的免疫过程,目前对其机制的研究还处于探索之中,近些年,随着Treg细胞的出现及对其认识的不断加深,人们渐渐意识到"免疫耐受"的形成对维持机体的免疫环境的稳定发挥着重要作用。而Treg细胞在诱导和维持免疫耐受中的核心作用已得到肯定,本文将会对Treg细胞在过敏性鼻炎及抗原特异性免疫治疗中的作用加以阐述。

慢性荨麻疹患者血清特异性IgE和T淋巴细胞检测

目的:分析慢性荨麻疹的致病因素以及细胞免疫功能的改变。方法:采用免疫印迹法体外半定量检测血清特异性IgE,采用流式细胞仪双色直接免疫荧光法分析T淋巴细胞亚群。结果:305例慢性荨麻疹患者中109例患者至少对一种过敏原呈阳性反应,阳性率为35.74%,57例健康献血员的特异性IgE检测全部为阴性,两组比较差别有统计学意义(χ2=22.95,P<0.05)。在18种常见变应原的检测中发现,户尘螨的阳性率最高,达13.77%,而且中重度过敏者(Ⅲ级以上)达4.92%。结论:慢性荨麻疹的病因复杂,部分患者是由于接触变应原引起的I型变态反应,同时伴有T淋巴细胞免疫功能紊乱。

IL-2淋巴间隙给药对宫颈癌荷瘤机体特异性T细胞免疫功能的影响

目的 :通过宫颈癌小鼠爪垫注射IL - 2及 5 -Fu后检测T细胞功能 ,探讨淋巴间隙给药在肿瘤细胞因子生物治疗中的效应。方法 :传代培养的小鼠宫颈癌细胞 (U14 )接种于Balb/c小鼠的左腋部皮下 ,构建荷瘤小鼠动物模型。荷瘤小鼠随机分为IL - 2组、 5 -Fu、IL - 2 +5 -Fu组及生理盐水对照。治疗 10天后分离小鼠脾脏细胞检测CTL细胞杀伤活性、淋巴细胞转化及IL - 2产生情况。结果 :CTL活性分别为 :对照组 :17 6 3±3 75 % ;IL - 2组 :2 7 34± 6 15 % ;5 -Fu组 :19 6 2± 5 17% ;IL - 2 +5 -Fu组 :2 4 0 1± 6 2 3%。淋巴细胞转化指数分别为 :对照组 :0 94± 0 13;IL - 2组 :1 92± 0 2 1;5 -Fu组 :1 30± 0 18;IL - 2 +5Fu组 :1 78± 0 2 8;IL- 2活性分别为 :对照组 :8± 2 1;IL - 2组 :12± 2 2 ;5 -Fu组 :9± 2 5 ;5 -Fu +IL - 2组 :13± 3 2。结论 :宫颈荷瘤小鼠爪垫注射细胞因子能显著性提高荷瘤机体的特异性细胞免疫功能。

青藤碱对环瓜氨酸肽抗原特异性T细胞体外增殖的影响

目的青藤碱(Sinomenine,SN)在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)治疗中有较好的临床疗效,对SN相关免疫机制的研究也越来越受到关注。但关于SN在抗原特异性T细胞(antigen special T cell,AST)机制的研究少见报道。文中观察了SN对RA患者环瓜氨酸肽(cyclic citrullinated peptide,CCP)AST体外增殖的影响,探讨SN治疗RA的相关免疫机制。方法体外分离、培养RA患者外周血淋巴细胞,分别设对照组:不加任何干预药物;CCP组:仅加CCP干预,终浓度为20μg/ml;甲氨喋呤(Methotrexate,MTX)组:同时加CCP与MTX干预,终浓度均为20μg/ml;SN低剂量组:同时加CCP与SN干预,SN终浓度为10μg/ml,CCP终浓度为20μg/ml;SN高剂量组:同时加CCP与SN干预,终浓度均为20μg/ml;体外培养72 h后,采用CCK-8法检测细胞增殖吸光度(A)值水平。结果 CCP可体外诱导RA患者外周血淋巴细胞增殖(P<0.01),在此基础上加入不同浓度的SN后,CCP诱导的淋巴细胞增殖被显著抑制(P<0.01),SN高剂量组较之SN低剂量组的抑制程度更为明显(P<0.01)。结论 SN可抑制RA患者CCP-AST的体外活化、增殖,这可能是SN临床治疗RA的免疫机制之一。