染色体特异DNA文库的构建与鉴定

为构建人类21号染色体特异DNA文库,以应用于人类遗传疾病的鉴定和研究,文章采用循环温度梯度法溶解释放微分离的人外周血细胞21号染色体DNA,将其进行简并寡核苷酸引物PCR（Degenerate oligo nu-cleotide primer-PCR,DOP-PCR）扩增后,利用100~500 bp和500~2 000 bp分段回收纯化的两种不同片段大小的DOP-PCR产物构建染色体特异DNA文库,并分别采用荧光原位杂交（Florescence in situ hybridization,FISH）和斑点杂交对DOP-PCR产物的来源和随机取样的文库克隆进行检测以评估所构建DNA文库的特异性。结果表明：循环温度梯度法能有效溶解释放微分离的21号染色体DNA;通过对DOP-PCR产物的分段回收纯化和克隆,增加了大片段DNA的连接效率;利用FISH技术和斑点杂交双重鉴定实验证明了文库的特异性,从而构建了21号染色体特异的DNA文库,并建立了构建染色体特异DNA文库及检测其特异性的方法,为21号染色相关遗传疾病的鉴定和研究奠定了基础。

FISH技术评价昆明山海棠在小鼠骨髓细胞中的非整倍体诱发效应

目的 :研究以荧光原位杂交 (fluorescenceinsituhybridization ,FISH)技术评价了中草药昆明山海棠根部水抽提物[Tripterygiumhypoglaucum (Level)Hutch ,THH]在小鼠骨髓细胞中的特异染色体不分离效应。方法 :以受试物THH腹腔注射昆明种雄性小白鼠 ,2 4h后取骨髓细胞常规制片 ,以bio 16 dUTP标记的 8号染色体特异性着丝粒重复顺序探针进行FISH ,并以streptavidine Cy3与杂交信号结合。荧光显微镜下分析受试物处理动物后骨髓细胞 8号染色体分离情况。结果 :在3个受试剂量中 ,THH具有与阳性对照秋水仙素类似的作用趋势 ,其所诱发的 8号染色体不分离频率均显著高于溶剂对照。结论 :本研究证实了THH为小鼠骨髓细胞 8号染色体异常分离的诱发因素。

对一个罗氏易位家系中精子染色体分离和相互效应的研究

目的研究罗氏易位个体精子中的染色体分离和染色体相互效应情况。方法采用荧光原位杂交技术精子标本进行间期核的原位杂交,并统计不同染色体分离方式的精子所占比例以及14,15,18,X和Y染色体的非整倍体比率。结果对于本文中的罗氏易位杂合子,其染色体正常和染色体平衡易位(对位分离)精子占79.9%,遗传物质不平衡(邻位分离)的精子占20.1%;并观察到高频率的性染色体非整倍体现象。对于本文中的罗氏易位纯合子,其染色体平衡易位精子占99.7%,遗传物质不平衡的精子占0.3%;未观察到高频率的性染色体非整倍体现象。结论罗氏易位杂合子的精子中染色体正常和染色体平衡易位(对位分离)的精子占有数量优势,且存在染色体相互效应。罗氏易位纯合子可正常产生22条染色体的遗传物质平衡的配子。

环磷酰胺、二溴氯丙烷和卡铂对小鼠和大鼠生殖细胞的细胞遗传学效应

采用精母细胞染色体分析方法检测了环磷酰胺、二溴氯丙烷和卡铂对小鼠和大鼠生殖细胞的细胞遗传学效应。环磷酰胺可使小鼠和大鼠精母细胞染色体断裂和断片率明显上升。在小鼠精母细胞的早粗线期和前细线期及大鼠精母细胞粗线期的早、中期给药时,环磷酰胺还可以使染色体易位率显著升高。

玉米SSR连锁图谱构建及抗纹枯病基因定位

以玉米自交系R15(抗)×478(感)的F2分离群体(229个单株)为作图群体,构建了包含146个SSR标记位点的遗传连锁图谱,覆盖玉米基因组1666 cM,平均图距11.4 cM.通过麦粒嵌入法对229个F2∶4家系进行人工接种纹枯病菌,并采用相对病斑高(绝对病斑高除以穗位高)划分病级标准进行玉米纹枯病的抗性鉴定.应用复合区间作图法分析抗病QTL(数量性状基因座位)及遗传效应.结果共检测到6个抗性QTL,分别位于第2、6、10染色体上,与标记Umc2110、Bnlg1606、Umc2110、Bnlg1538、Umc1257和Phi054连锁,各自可解释表型变异的10.35%、4.09%、8.33%、 5.18%、5.12%和4.18%.这些抗性QTL与控制株高和穗位高的基因之间表现为独立遗传.

昆明山海棠诱发小鼠精子非整倍体的研究

应用荧光原位杂交 (FISH)技术评价了昆明山海棠水抽提物 (THH)在雄性小鼠生殖细胞形成过程中的非整倍体诱发效应。以THH(1 2 0mg/kg,2 4 0mg/kg ,4 80mg/kg)腹腔注射昆明种雄性小白鼠 ,根据小鼠精子发育周期 ,于处理后 2 2天后取小鼠附睾精子涂片 ,以生物素标记的 8号染色体着丝粒重复顺序探针进行FISH ,荧光显微镜下分析受试物处理动物后精子特异染色体分离情况。结果发现 ,THH在中间剂量组 (2 4 0mg/kg)和高剂量组 (4 80mg/kg)诱发精子非整倍体频率均显著高于溶剂对照 (P<0 .0 0 1 ) ,低剂量组 (1 2 0mg/kg)的异常精子频率与溶剂对照无显著差异 (P >0 .0 5)。研究证明 。

遗传变异理论的教学——兼谈生物教学中的几个问题

遗传变异的科学概念与原理是关于遗传变异的本质和规律的知识。教材中的遗传变异的理论知识是由一定的遗传变异的科学概念和原理按照一定的关系和联系而组织起来的。概念是它的“知识细胞”,原理则是由“知识细胞之间的必然联系而形成的。理解教材,其根本任务也就在于使学生理解教材中的概念原理及其体系或结构。我们所说的加强基础知识教学,主要是指加强教材中的基本概念和基本理论的教学。