家禽垂体特异转录因子POU1F1研究进展

催乳素 (Prolactin ,PRL)、生长激素 (GrowthHormone ,GH)、促甲状腺素 β(Thyroid stimulatingHormone β ,TSHβ)是家禽垂体前叶分泌的具有重要生理功能的激素 ,这些激素通过调控家禽就巢性的发生与维持、生长发育、免疫应答等过程来影响家禽的产蛋性能、生长性能以及免疫力。垂体特异转录因子POU1F1(Pituitary specificTranscriptionFactor)是家禽垂体前叶特异表达的一种具有重要功能的转录因子 ,它与PRL基因、GH基因、TSHβ基因以及Pit 1自身的启动子结合 ,调控这些基因的转录 ,通过调节这些基因的表达而对家禽的生长发育、繁殖等很多方面起着重要的作用。比较了家禽Pit 1基因的结构与哺乳动物的差异 ,阐述了家禽Pit 1基因的表达特点及其生物学效应。考虑到POU1F1的重要作用和作者的研究 ,作者认为Pit 1基因可作为家禽生长、产蛋。

垂体特异转录因子pit-1在垂体瘤中的表达及意义的实验研究

目的检测垂体特异转录因子pit-1在垂体腺瘤中的表达,研究Pit-1与激素水平、肿瘤侵袭性的关系,以探讨Pit-1在垂体瘤发病机制中的作用。方法根据术前激素水平、临床表现及术后病理诊断确定腺瘤类型,依影像学表现、术中所见及硬膜病检结果判断对肿瘤侵袭性分级,用免疫组化和RT-PCR分别测定Pit-1蛋白和pit-1mRNA的表达。结果Pit-1在GH腺瘤、PRL腺瘤、GH/PRL混合腺瘤中均有表达,与对照组相比,中、高度表达者占此3种腺瘤的78.8%(26/33),无功能腺瘤及ACTH腺瘤中无Pit-1蛋白的表达。pit-1mRNA在全部的GH腺瘤、PRL腺瘤、GH/PRL混合腺瘤和50%(5/10)的无功能腺瘤中有表达,在ACTH腺瘤组中无表达。GH、PRL、GH/PRL混合腺瘤组间pit-1mRNA的表达量差异无显著性,此3组均显著高于无功能腺瘤组(P<0.05)。GH、PRL腺瘤组中pit-1mRNA的表达量与其各自术前的激素水平呈显著正相关。在表达pit-1mRNA的腺瘤中,侵袭性组高于非侵袭性组。结论Pit-1的表达与垂体腺瘤的表型、功能有关,与某些激素(GH、PRL)水平、肿瘤的侵袭性呈正相关,在某些类型(GH、PRL、GH/PRL)的垂体瘤发病机制中起重要作用。

牦牛垂体特异转录因子-1、生长激素和α-乳清蛋白基因多态性的分析

利用PCR-RFLP技术分析了麦洼牦牛、九龙牦牛和西藏牦牛GH、Pit-1和α-LA基因的多态性。采用普通牛所用的PCR引物均能在牦牛上正确地扩增出上述几个基因相应大小的片段。GH、Pit-1和α-LA(-1689)基因特定位点均未检测到多态性,基因型分别为AA、BB和AA;利用PCR-RFLP分析牦牛乳蛋白基因型具有准确、快速的特点,并能对新生牦牛和公牦牛乳蛋白或泌乳相关基因型进行分析。

垂体泌乳素腺瘤垂体特异转录因子表达的实验研究

目的研究垂体特异转录因子pit-1与PRL水平、肿瘤侵袭性的关系,探讨Pit-1在垂体瘤发病机制中的作用。方法免疫组化和RT-PCR分别测定Pit-1蛋白和pit-1mRNA的表达,分析Pit-1与肿瘤侵袭性的关系。结果与对照组相比,Pit-1在PRL腺瘤中均有高表达,Pit-1、pit-1 mRNA表达与PRL水平呈正相关并与肿瘤侵袭性相关。结论Pit-1及pit-1mRNA的表达在垂体PRL腺瘤发病机制中发挥一定作用。

大鼠正畸牙移动牙周组织中叉头框蛋白O1和成骨特异转录因子RUNX2的表达

目的:检测大鼠正畸牙移动牙周组织中叉头框蛋白O1(forkhead box O1,Fox O1)和Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)的表达变化,初步探讨Fox O1和Runx2在正畸牙移动牙周组织改建中的作用及相互关系。方法:将40只8周龄雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为5组,建立正畸牙移动模型,以上颌左侧加力的第一磨牙为实验侧,右侧不加力的第一磨牙为对照侧。分别加力1、3、5、7、14 d后处死大鼠,解剖分离出含有第一磨牙的牙槽骨制备标本,进行苏木精-伊红(H-E)染色和Fox O1、Runx2免疫组织化学染色,利用Image Pro Plus图像分析系统对染色后的切片做定量分析,采用SPSS 13.0软件包对数据进行统计学处理。结果:Fox O1在牙周膜主要表达于成骨细胞及成牙骨质细胞中,Runx2主要表达于成骨细胞、成纤维细胞及成牙骨质细胞中。实验组加力后,大鼠牙周组织中Fox O1和Runx2的表达增强,在3~5 d内达到峰值,而后表达降低;14 d时与对照组相比无显著差异(P>0.05),其余组与对照组相比均有显著差异(P<0.05)。结论:Fox O1和Runx2参与了正畸牙移动中的牙周组织改建,且主要参与了成骨细胞和骨形成的过程。

全反视黄酸调节心脏特异转录因子蛋白表达及其机制

目的探讨全反视黄酸(atRA)对心脏特异转录因子(dHAND)蛋白表达的调节作用和分子机制。方法用atRA处理H9c2细胞,然后用Western blot分析和免疫组化方法来检测dHAND表达。结果在H9c2细胞中,atRA可抑制dHAND蛋白表达,这一抑制作用具有时间和剂量依赖性。Western blot分析和免疫组化检测均证实,5μnol／L 的atRA处理H9c2细胞2h可以显著降低dHAND和ET-1蛋白的表达。用BQ-123阻断ET -1／ETAR信号通路后,dHAND表达上调。结论在H9c2细胞中,atRA通过ET-1／ ETAR信号传导通路来抑制dHAND表达。

转录因子红系核蛋白的特异转录因子1参与脓毒症小鼠血小板生成减少的调控

目的观察骨髓巨核细胞成熟障碍是否参与脓毒症血小板减少及转录因子红系核蛋白的特异转录因子1（GATA1）对巨核细胞生成血小板的调控作用。方法将60只BALB／c雄性小鼠随机分为阴性对照（C组）、脓毒症组[大肠杆菌脂多糖（LPS）组]、LPS±地塞米松治疗组（Dex组）。每天检测血小板计数；LPS注射1d细胞涂片染色观察巨核细胞形态，流式细胞术检测巨核细胞表面标记分子CIM1、CD61表达；LPS注射1、3d检测炎性因子白细胞介素（IL）-6、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）表达水平，反转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测转录因子GATA1、FOG1 mRNA表达。结果（1）LPS注射1～3dLPS组血小板计数[（334．0±125．7）×10^9／L、（217．0±80．2）×10^9／L、（293．0±27．8）×10^9／L]较C组[（1148．0±56．6）×10^9／L、（1020．0±55．9）×10^9／L、（1158．0±43．8）×10^9／L]明显降低（P〈0．05）；LPS注射1dDex组[（316．0±99．8）×10^9／L]血小板较C组降低（P〈0．05），3d[（401．0±106．1）×10^9／L]较LPS组明显升高（P〈0．05）。（2）LPS注射1d时LPS组、Dex组巨核细胞数较C组升高[07．6±5．7）、（16．9±3．6）、（7．8±2．9）个]，3d时LPS、Dex组巨核细胞数较1d时下降[（12．8±6．4）、（10．5±7．1）个]，但仍高于C组[（8．3±2．0）个，P〈0．05]。LPS组、Dex组巨核细胞胞质体积较C组明显增大，但产血小板型巨核细胞较C组减少（P〈0．05），两组巨核细胞成熟障碍、血小板释放减少；（3）LPS注射1dLPS组与Dex组GATA1、FOG1表达较C组降低（LPS：0．27±0．02、0．61±0．05；Dex：0．22±0．02、0．10±0．01，P〈0．05），LPS组与Dex组GATA1表达差异无统计学意义（P〉0．05），LPS组GATA1与FOG1比较降低更明显（P〈0．05）；LPS注射3d时Dex组GATA1、FOG1表达水平高于LPS组（Dex：0．38±0．02、0．22±0．01；LPS：0．21±0．01、0．20±0．01），两组仍明显低于C组表达（P〈0．05）；（4）LPS注射1d时LPS、Dex组TNF—α、IL-6水平[LPS：（489．3±32．8）、（623．2±25．9）pg／ml；Dex：（468．1±34。9）、（635．1±37．7）pg／m1]较C组[（66．2±23．7）、（78．0±18．6）pg／m]]显著升高，P〈0．01]；3d时各组TNF．or．水平差异无统计学意义（P〉0．05）；LPS组IL-6较C、D组升高[LPS：（222．6±52．3）pg／ml，C组：（81．2±14．5）pg／ml，D组：（98．0±42．5）pg／m]；P〈0．05]，Dex组与C组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论骨髓巨核细胞成熟障碍是脓毒症时血小板减少的重要原因；LPS可能通过抑制转录因子GATA1表达、抑制巨核细胞成熟而影响血小板生成。Dex通过上调GATA1表达促进巨核细胞成熟、脓毒症时血小板数量。

新的红细胞分化相关因子反义RNA特异抑制K562细胞中的GATA-1转录因子活性

以往报道了通过基因转染技术观察新的红细胞分化相关因子（EDRF1）反义RNA表达和EDRF1过表达对细胞增殖和分化的影响,结果表明,反义EDRF1表达载体转染后的K562细胞α-globin,γ-globin mRNA表达水平下降.本文利用基因芯片和真核基因转染技术观察了EDRF1对60种细胞因子及其受体表达水平的影响,发现EDRF1明显调节IL-6受体,GM-CSF受体,c-Jun/c-Fos,c-myc及c-kit（SCF受体）等基因的表达水平,并通过RNA点杂交进行验证,EDRF1对几个重要的细胞因子受体表达的调节可能是其执行功能的一个重要途径.Northern blot实验结果表明,GATA-1mRNA在转染EDRF1反义表达载体后表达水平有所下调,随后的凝胶阻滞电泳实验（gel shiftassay,EMSA）证明,与对照相比,EDRF1反义表达载体转染的K562细胞中,红系特异的转录因子GATA-1的活性受到明显的抑制,而另一个红系特异的转录因子NF-E2则没有明显的活性改变,对照NF-κB的转录活性也基本保持恒定.因此推测,K562细胞增殖和分化的调节很可能是通过直接影响红系特异的转录因子GATA-1与顺式序列相互作用的转录活性来实现的.

特异亲合转录因子E2F的寡脱氧核苷酸对移植静脉内膜增生的影响

目的 观察E2F亲合性寡脱氧核苷酸对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法以Wistar大鼠建立自体静脉移植模型 ,术中将含有E2F亲合性双链寡脱氧核苷酸的医用生物胶涂沫于移植静脉的外膜。术后 14d取移植静脉 ,观察细胞周期基因c myc ,核增殖抗原基因 (PCNA)的表达指数和内膜增生程度。以空白胶和错配双链寡脱氧核苷酸作为对照。结果 对照组移植静脉中有大量平滑肌细胞表达c myc和PCNA ,内膜明显增生。错配双链寡脱氧核苷酸对c myc ,PC NA的表达和内膜增生无抑制作用。当静脉外膜施加 10 0 μgE2F亲合性寡脱氧核苷酸时 ,PCNA和c myc的表达率分别是 ( 2 0 .41± 4.15 ) %、( 10 .83± 2 .87) % ,比对照静脉分别下降 5 0 %、34% ,内膜厚度为 ( 18.2± 2 .8) μm ,比对照组减轻 44% ( P <0 .0 5 )。 2 0 0 μg的E2F亲合性双链寡脱氧核苷酸对PCNA、c myc和内膜增生的抑制更为显著。 结论 E2F亲合性寡核苷酸可能通过抑制c myc、PCNA的表达抑制内膜增生 ,存在剂量效应关系。

抑制pit-1基因表达对垂体生长激素腺瘤生物学行为影响的实验研究

目的:研究垂体特异转录因子-1(pit-1)反义寡核苷酸(ASODN)对垂体生长激素(GH)腺瘤细胞增殖和细胞凋亡的影响,为以pit-1为靶点治疗GH腺瘤提供理论和实验依据。方法:设计合成硫代磷酸化反义寡核苷酸(PS-ASODN),经脂质体(lipofectin)包裹转染瘤细胞,每隔24h取样。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测ASODN对细胞生长增殖的影响;用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡和周期分布的改变,用免疫组化SABC法、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定经ASODN作用后,pit-1蛋白和pit-1mRNA表达的变化。结果:ASODN组与正义组(SODN)及对照组相比较,48h、72h后细胞生长增殖受抑制(P<0.05),96h、120h时,差异有非常显著性(P<0.01);ASODN组对细胞凋亡有显著的促进作用,细胞多阻滞于G2/M期。其作用具有序列选择的特异性,在一定的时间范围内,呈时间依赖性。ASODN显著地抑制pit-1蛋白和pit-1mRNA的表达(均P<0.05)。结论:pit-1反义寡核苷酸能够有效地抑制GH腺瘤细胞的生长而促进其凋亡,具有较好的临床应用前景。

山羊Pit-1基因遗传多态性及与生长性能的相关性分析

以河西绒山羊、陇东绒山羊、辽宁绒山羊和内蒙古绒山羊为研究对象,采用PCR-SSCP和测序技术对Pit-1基因第6外显子进行多态性研究,并分析该基因多态性与山羊体质量和体尺性状的关系.结果表明:Pit-1基因第6外显子存在2个SNPs位点并形成AA、AB、BB、AC和BC 5种基因型,BB为优势基因型.除内蒙古绒山羊外,其他3个山羊群体的基因型分布处于Hardy-Weinberg平衡状态.最小二乘法分析表明,AB基因型个体的体质量、胸围显著高于BC基因型(P<0.05),其他基因型间差异不显著(P>0.05).Pit-1基因是山羊生产育种应用中的一个有效遗传标记.

重编程细胞的命运

背景:体细胞重新编程技术也称细胞重组技术,使已经完成分化的体细胞回到原始的全能性或多能性状态,并可以重新分化成与原来不一样的细胞。通过重编程技术可以获得患者特异性诱导多能干细胞和疾病特异性诱导多能干细胞,显著减少了免疫排斥反应。目的:探讨关于直接重编程到特定系的方法,总结参与重编程的分子机制。方法:以"重编程"为中文检索词,"reprogramming"为英文检索词,应用计算机检索维普(VIP)期刊全文数据库、万方全文数据库、中国知网全文数据库、PubM ed数据库、Springer数据库1958年1月至2015年4月有关细胞重编程技术的文献,排除与研究目的无关及重复性研究,保留40篇文献进一步分析。结果与结论:当前重编程的步骤效率很低,在特定群只有相对少量的细胞能进行重编程,重编程的完整性和程度也有待证实。直接重编程成体、定系的细胞从一种细胞到另一种细胞一直是发育生物学很难达到的目标。最近的研究证明分化的细胞强制表达特异转录因子能促进细胞分化。这些发现使再生医学领域有了重大进展,可以提供替代细胞治疗各种再生紊乱。目前,基本的分子机制需要进一步阐明,在直接重编程被应用于临床之前还有许多问题需要解决。

稀疏颗粒型生长激素腺瘤

生长激素腺瘤是主要表达生长激素(GH)的垂体腺瘤,分为2种病理组织学亚型,即致密颗粒型和稀疏颗粒型。稀疏颗粒型生长激素腺瘤由嫌色性或淡嗜酸性垂体特异转录因子1(PIT1)阳性肿瘤细胞组成,细胞较小,呈圆形(图1),胞核多形性,可见多核异形细胞。免疫组织化学染色GH表达不一致,较稀少或呈片状分布(图2a);约70%的肿瘤细胞可见胞质内低相对分子质量的细胞角蛋白(CAM5.2)阳性的纤维小体(图2b);不表达α亚单位。电子显微镜观察,纤维小体呈球样聚集体.

黄韧带骨化机制与骨质疏松症治疗策略

骨质疏松症是最常见的代谢性骨病,因成骨细胞与破骨细胞功能失衡造成。目前常见的骨质疏松症药物旨在抑制骨吸收。为了更有效地治疗骨质疏松症,刺激新骨形成将是重要策略。成骨细胞特异转录因子Osterix(Osx)是骨形成及成骨细胞分化必需的转录因子,被认为是骨分子开关。全基因组关联分析研究已经证实Osx与骨质疏松表型相关,但仍需进一步研究Osx的作用机制,包括探索Osx上游调节因子。骨质疏松症迫切需要促骨形成新药,Osx是理想的新靶点。而临床上的另外一种疾病为寻找Osx上游因子提供了很好的参考,那就是黄韧带骨化(ossification of the ligamentum flavum,OLF)。黄韧带骨化是脊柱韧带病理性异位骨化性疾病,在骨外组织黄韧带里刺激了新骨的形成,其致病机制尚不明确。本文结合近年来有关黄韧带骨化的一些机制研究进行综述,包括力学因素、遗传因素、内分泌以及微量元素、Notch信号通路、miRNA及炎症因子等。最新发现的一些参与黄韧带骨化的相关因子能够刺激Osx基因的表达,希望通过对黄韧带骨化致病机制的研究,为寻找Osx上游调节因子进而研发促骨形成新药治疗骨质疏松症提供新的思路。

lncRNA XIST靶向miR-302a-3p对IL-1β诱导软骨细胞损伤的调控机制

目的 探讨lncRNA X染色体失活特异转录因子(XIST)靶向miR-302a-3p对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导软骨细胞损伤的调控机制。方法 SW1353细胞分为Control组、IL-1β组、IL-1β+si-NC组、IL-1β+si-XIST组、IL-1β+si-PDK1组、IL-1β+si-XIST+miR-NC inhibitor组、IL-1β+si-XIST+miR-302a-3p inhibitor组。检测XIST、miR-302a-3p以及3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)mRNA表达;噻唑蓝(MTT)实验测定细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;qRT-PCR检测炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10)水平;双荧光素酶报告基因检测实验证实miR-302a-3p与XIST或PDK1的靶向关系;免疫印迹法检测凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)及PDK1蛋白表达。结果 与IL-1β组相比,IL-1β+si-XIST组XIST表达下调,细胞活力升高,凋亡率降低,Bax表达及TNF-α、IL-1β、IL-6水平下降,Bcl-2表达及IL-4、IL-10水平升高(P<0.05)。XIST直接靶向下调miR-302a-3p表达,miR-302a-3p下调可恢复si-XIST介导的促增殖、抗凋亡和炎症反应作用(P<0.05)。PDK1是miR-302a-3p的靶基因,沉默PDK1可抑制细胞的炎症反应(P<0.05)。结论 敲低XIST可提高IL-1β诱导软骨细胞的细胞活力,减轻OA样软骨细胞损伤,其作用机制与靶向上调miR-302a-3p进而抑制PDK1表达有关。

模拟微重力影响EPO诱导K562细胞向红系分化的机制研究

目的:航天飞行性贫血现象的机制尚不清楚。本实验利用第4代细胞旋转培养系统(RCCS-4)模拟微重力,研究其对促红细胞生成素(EPO)诱导培养K562细胞向红系分化的影响及其机制。方法:实验分为地面培养组(Control组)、EPO诱导组(EPO组)、模拟微重力组(MG组)和模拟微重力+EPO组(MG+EPO组),利用RCCS-4模拟微重力,分别在地面和模拟微重力环境下,采用EPO诱导培养K562细胞。采用联苯胺染色法观察各组K562细胞向红系分化情况;流式细胞术检测K562细胞CD71抗原表达水平,Western-blotting方法检测K562细胞丝氨酸/苏氨酸蛋白(AKT)及红系特异核蛋白转录因子-1(GATA-1)表达水平,流式细胞术检测K562细胞凋亡情况。结果:联苯胺染色阳性率比较,MG组和MG+EPO组明显低于EPO组(P<0.01);CD71抗原表达水平为MG+EPO组明显低于EPO组(P<0.01);AKT/GATA-1蛋白表达量MG组低于Control组,MG+EPO组低于EPO组(P<0.01);各组K562细胞凋亡率检测发现MG组和MG+EPO组(70.25±0.17%)较Control组和EPO组明显增加(P<0.01)。结论:模拟微重力可以通过下调红系分化相关蛋白AKT及GATA-1表达和诱导细胞凋亡来抑制EPO诱导K562细胞向红系分化。

非小细胞肺癌患者血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1表达变化及意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆长链非编码RNA-生长阻滞特异度转录因子5(lncRNA-GAS5)、长链非编码RNA-结肠癌相关转录因子1(lncRNA-CCAT1)表达变化及临床意义。方法选择80例NSCLC患者作为NSCLC组,同期选择肺部良性疾病患者50例作为对照组。用荧光定量PCR法检测两组血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1表达,并分析二者表达与NSCLC患者临床病理特征的关系,用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1对NSCLC的诊断价值。结果与对照组比较,NSCLC组血浆lncRNA-GAS5表达低,血浆lncRNA-CCAT1表达高(P均<0.05)。血浆lncRNA-GAS5表达与NSCLC组织分化程度、TNM分期有关(P均<0.05),血浆lncRNA-CCAT1表达与NSCLC淋巴结转移、TNM分期有关(P均<0.05)。血浆lncRNA-GAS5诊断NSCLC的ROC曲线下面积(AUC)为0.756(95%CI:0.673~0.840),最佳截断值为26.71,此时灵敏度、特异度分别为0.81、0.79,准确度为0.77。血浆lncRNA-CCAT1诊断NSCLC的AUC为0.819(95%:CI 0.747~0.890),最佳截断值为13.11,此时灵敏度、特异度分别为0.85、0.82,准确度为0.81。血浆lncRNA-GAS5联合lncRNA-CCAT1诊断NSCLC的AUC为0.896(95%CI:0.841~0.951),此时灵敏度、特异度分别为0.89、0.92,准确度为0.86。结论NSCLC患者血浆lncRNA-GAS5表达低,血浆lncRNA-CCAT1表达高,二者均参与NSCLC的发生发展,且二者联合检测有助于早期诊断NSCLC。

锌对小鼠腭突融合期细胞增殖和凋亡的影响及腭裂发生相关Sp家族候选基因研究

目的研究不同浓度锌离子喂养孕鼠对其子代胚胎腭突融合期细胞增殖和细胞凋亡的影响,进一步筛选参与该过程的腭突组织之间锌指蛋白Sp家族相关差异候选基因,探索锌在腭裂发生过程中的作用机制。方法C57BL/6J雌雄小鼠合笼,将144只孕鼠按随机数字表法分为4组,每组36只,按饲料的锌离子浓度不进行喂养,常锌组含锌30 mg/kg、缺锌组为Flanagan缺锌饲料(0 mg/kg)、低锌组含锌5 mg/kg、富锌组含锌100 mg/kg。HE染色观察ED14.5、ED16.5胎鼠腭部发育状况和形态学变化,PCNA染色观察ED14.5胎鼠腭胚突融合期细胞增殖情况,TUNEL染色观察ED14.5胎鼠腭胚突融合期细胞凋亡情况;通过mRNA表达谱芯片杂交技术,收集富锌组、常锌组、缺锌组腭突组织基因表达情况并相互比较组间差异表达,采用2倍表达差异倍数对差异基因进行筛选并分析锌指蛋白Sp家族基因表达是否有差异,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证差异表达基因。结果ED14.5时,常锌组、富锌组、低锌组和缺锌组的腭裂发生率分别为8%(3/36)、2%(1/39)、29%(12/41)和39%(15/38)。ED14.5时的HE染色结果显示,常锌组左右腭突均已上抬,相互接触、贯通;缺锌组左右侧腭突仍位于舌体两侧垂直向下最终形成腭裂;低锌组左右侧腭突上抬但并未接触,最终形成腭裂;富锌组与常锌组无明显差异。ED14.5时,常锌组和富锌组的胎鼠腭突增殖细胞阳性率(80.29%±7.39%和87.69%±6.62%)均显著高于缺锌组(56.05%±16.13%)和低锌组(56.22%±9.61%)(t=4.32,P<0.05);缺锌组和低锌组胎鼠腭突细胞凋亡指数(38.80%±3.10%和28.80%±6.19%)均显著高于常锌组(16.80%±1.82%)(t=19.35,P<0.001;t=5.81,P<0.001)。富锌组与缺锌组的2倍差异表达基因为663个,其中表达上调基因为513个,表达下调基因150个,并发现Sp5位于其中。qRT-PCR结果显示,与常锌组(2.22±0.36)相比,缺锌组的腭突组织中Sp5mRNA的表达水平(1.23±0.38)显著升高,富锌组(3.68±0.90)显著降低(P<0.05)。结论母鼠孕期缺锌可抑制胚胎腭突间充质细胞增殖,促进细胞凋亡,致使腭突形态变异,上抬动力减弱,且使腭中缝上皮细胞持续存在,最终形成腭裂。缺锌可致子代胚胎融合期Sp5表达升高,富锌对可致子代胚胎融合期Sp5表达下降,推测Sp5在调控缺锌导致腭裂腭突融合的过程中起负性调节作用。

心阴片对慢性心力衰竭模型小鼠线粒体能量代谢的影响

目的探讨心阴片治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法60只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组8只,模型组、曲美他嗪组及心阴片低、高剂量组各13只。除假手术组外,其余各组采用主动脉弓缩窄术制备慢性心力衰竭模型。造模后心阴片低剂量组给予心阴片292.5mg/kg灌胃,心阴片高剂量组给予心阴片1170mg/kg灌胃,曲美他嗪组给予盐酸曲美他嗪片15mg/kg灌胃,假手术组和模型组给予0.1ml/10g蒸馏水灌胃。各组均每天1次,共8周。检测心功能各指标包括左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室舒张内径(LVIDd)、左室收缩内径(LVIDs),观察心脏组织形态学、心肌组织胶原纤维沉积、心肌细胞线粒体超微结构变化,检测心脏组织过氧化物酶体增殖物活化受体γ协同活化因子1α(PGC-1α)、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录特异因子B2(TFB2M)蛋白表达及心肌组织三磷酸腺苷(ATP)水平。结果与假手术组比较,模型组LVEF、LVFS明显下降,LVIDd、LVIDs明显升高,PGC-1α、NRF1及TFB2M蛋白表达显著降低,心脏组织ATP水平降低(P<0.05);心肌细胞明显增大,排列不规则,胶原纤维沉积明显增多,线粒体数量减少、体积肿胀,线粒体膜结构不完整,嵴模糊。与模型组比较,曲美他嗪组及心阴片低、高剂量组LVEF、LVFS、LVIDs改善,ATP水平显著提高(P<0.05);心阴片低剂量组PGC-1α、TFB2M蛋白表达,心阴片高剂量组PGC-1α、NRF1、TFB2M蛋白表达,曲美他嗪组NRF1、TFB2M蛋白表达均明显升高(P<0.05);各组心脏组织形态学明显改善,胶原纤维沉积明显减轻,线粒体超微结构破坏较少。结论心阴片能改善慢性心力衰竭模型小鼠心功能,其机制可能是调控PGC-1α/NRF1/TFB2M信号通路进而改善线粒体能量代谢。