经典名方泽泻汤基准样品HPLC特征指纹图谱分析研究

[目的]创建经典名方泽泻汤基准样品的高效液相色谱(HPLC)特征指纹图谱,通过对其进行分析与质量评价,为泽泻汤质量控制标准的建立提供科学参考和依据。[方法]依据传统方法复原至现代煎煮方式制备泽泻汤标准煎液,采用Agilent ZORBAX SB-Aq C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相选用乙腈-水进行梯度洗脱,创建泽泻汤HPLC特征指纹图谱,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2012版)》对18批泽泻汤基准样品进行指纹图谱相似度评价和特征图谱共有峰分析。[结果]18批泽泻汤基准样品的相似度为0.912~0.997。通过对样品图谱进行数据匹配,确立了11个共有峰。并通过混合对照品比对指认了4个特征峰,分别为泽泻醇A(4号峰)、白术内酯Ⅰ(6号峰)、泽泻醇B(8号峰)、23-乙酰泽泻醇B(9号峰)。以23-乙酰泽泻醇B的色谱峰(9号峰)为S峰,规定11个共有峰的相对保留时间。[结论]建立的泽泻汤基准样品HPLC特征指纹图谱分析方法灵敏、稳定且数据准确可靠,体现了泽泻汤基准样品的整体化学成分特征,为经典名方泽泻汤基准样品及复方制剂的质量评价提供依据。

特征指纹图谱统一化变换的规范数字化评价系统研究

目的对特征指纹图谱统一化变换的规范数字化评价系统进行研究,对30个特征参数的变化规律进行评估和解析。方法采用RP-HPLC法建立23批苦碟子注射液(KDZI)指纹图谱,用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统4.0"软件计算其特征指纹图谱统一化变换的30个参数,将这些参数与统一化指纹图谱的统一化参数进行比较。用系统指纹定量法评价23批苦碟子注射液质量。结果用特征指纹图谱评价出S21最佳,选择15号峰作参照物峰好于21号峰。结论特征指纹图谱的统一化变换参数有11个与统一化参数相同,依据统一指纹参数能评价参照物峰选择是否合理。

不同干燥工艺干姜的UPLC特征指纹图谱比较研究

目的建立不同干燥工艺干姜的超高效液相色谱(UPLC)特征指纹图谱,为干姜的干燥工艺选择提供依据。方法生姜,晒干、晾干、真空干燥和微波干燥干姜的甲醇超声提取液采用Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×100mm,1.7μm)色谱柱;流动相为乙腈-水溶液,梯度洗脱;检测波长280 nm,分析各样品指纹图谱相似度。结果建立了10批不同干燥工艺干姜药材的UPLC特征指纹图谱,标定了15个共有峰,并指认其中6、8、10-姜酚3个色谱峰;10批干姜药材的相似度为0.980～0.997。结论干姜炮制工艺以晾干和60℃真空干燥为宜。

补骨脂、肉豆蔻配伍前后特征指纹图谱及指标成分含量变化研究

目的:对补骨脂-肉豆蔻药对配伍前后特征指纹图谱及指标成分含量的变化进行研究。方法:Agilent Edipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水,流速:1.0 m L/min,检测波长:234 nm,柱温:30℃,建立补骨脂、肉豆蔻及补骨脂-肉豆蔻药对HPLC特征指纹图谱,标定共有峰,获得对照指纹图谱;对药对配伍前后指标成分的含量进行测定。结果:对药对指纹图谱进行分析,共确定了20个共有峰,并对共有峰的来源进行归属;指标成分含量变化结果显示,药对较单味药材中相应指标性成分的含量均有提高。结论:补骨脂-肉豆蔻药对配伍后大多数化学成分(包括补骨脂素、异补骨脂素、去氢二异丁香酚)较单味药材各成分含量均有较大幅度提高。

阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱“数字化”信息的构建与应用

目的:建立阳春砂仁挥发油特征指纹图谱"数字化"信息模式,为阳春砂仁的内在质量评价和鉴定提供一种数字化标准。方法:采用GC-MS分析20批次阳春砂仁的主要成分,同时对1985年以来国内主要研究单位对16批次阳春砂仁的文献报道进行数据挖掘。结果:20批次阳春砂仁均含有α-蒎烯、茨烯、β-蒎烯、β-月桂烯、柠檬烯、芳樟醇、樟脑、异龙脑、龙脑、乙酸龙脑酯等10个主要特征成分,合计相对含量达(86.35±5.69)%,具有一定代表性;近20年来国内10余个主要研究单位报道的阳春砂仁大都含有以上10个特征成分,且相对含量也近似。以此10个特征指标成分计,本试验分析样品的均值与文献报道样品的均值相似度为0.990(夹角余弦法),由此合并数据处理以建立具有广泛代表性的阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱"数字化"信息。"数字化"信息在药材质量评价中的应用表明,约85%以上阳春产砂仁的质量比较均匀稳定,与16个文献报道阳春砂仁相似度比对的结果显示与原文作者的结论基本一致;在药材品种鉴定中的应用表明,文献报道的10个非阳春砂仁中仅绿壳砂与阳春砂仁非常相似,而缩砂、长太砂、华山姜、山姜、长序砂仁等与阳春砂仁通过数字化模式可以明显区分开来。结论:阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息模式使在不同时间段(1985-2007)、不同仪器、色谱柱、色谱条件下的分析结果可以相互比对,适用于药材的质量评价与鉴定。

阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息的GC验证

目的考察阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息在GC中的适用性。方法分别采用GC-MS和GC分析13批次阳春砂仁的主要成分,同时用已建立的阳春砂仁挥发油特征指纹图谱数字化信息与GC-MS、GC分析的样品进行相似度比对。结果13批次阳春砂仁均含有α-蒎烯、茨烯、β-蒎烯、β-月桂烯、柠檬烯、芳樟醇、樟脑、异龙脑、龙脑、乙酸龙脑酯等10个主要特征成分,合计相对含量达(88.15±2.97)%,具有一定代表性。以此10个特征指标成分计,GC-MS分析样品与GC分析样品的相似度为0.994～1.000(夹角余弦法);与阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息比对,GC-MS分析样品的相似度为0.978～0.999(夹角余弦法),GC分析样品的相似度为0.986～0.998(夹角余弦法)。结论阳春砂仁GC-MS特征指纹图谱数字化信息能应用于GC中,使不同时间、不同型号的仪器、色谱柱、色谱条件下的分析结果可以相互比对,具有推广应用价值,可用于药材的质量评价与鉴定。

桑枝高效液相色谱特征指纹图谱研究

目的采用高效液相色谱技术建立桑枝药材的特征指纹图谱,为桑枝药材的产区鉴别及质量控制提供指导。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18(4.6×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈、0.2%甲酸、10mmol/L甲酸铵水溶液,梯度洗脱,流速为0.8ml/min,柱温为25℃,检测波长270nm进样量20μl,进行了12批桑枝样品的指纹图谱分析。结果该分析方法具有良好的精密度、重现性和稳定性,12批桑枝指纹图谱有18个共有峰,4个特峰,通过相似度计算发现桑枝药材不同产地之间质量有差别,主成分分析和聚类分析可缩减数据处理量、方法简单可靠,结果与相似度计算结果吻合。结论桑枝HPLC指纹图谱为桑枝药材质量控制提供了方法学支持。

金盏花HPLC特征指纹图谱研究

目的:建立金盏花的HPLC特征指纹图谱,为科学评价其质量提供方法。方法:以Hypersil ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长220 nm,柱温35℃;采用中药色谱指纹图谱评价系统进行相似度分析。结果:确定了含有11个色谱峰的特征指纹图谱,不同产地金盏花特征图谱相似度均在0.90以上。结论:建立的方法简单、可靠,可用于金盏花的鉴别和质量控制。

广藿香GC-MS特征指纹图谱“数字化”在药材鉴定中的应用模式研究

目的：建立广藿香挥发油指纹特征图谱在药材鉴定中的应用方法，为中药GC-MS特征指纹图谱的实际应用提供一种可行模式。方法：利用广藿香挥发油11个特征指标成分（β-广藿香烯、β-榄香烯、顺式-石竹烯、反式-石竹烯、刺蕊草烯、α-愈创木烯、α-广藿香烯、β-愈创木烯、未鉴定A、广藿香醇、广藿香酮）初步建立了石牌、高要、海南藿香3种“数字化”共有模式，用之与1992—2002国内主要研究单位报道的24个广藿香样品进行相似度比对。结果：24个文献样品中21个的相似度比对结果与原产地相符（或能准确判断）。3个不相符的品种结果初步提示高要茎油与石牌藿香高度相似，雷州产藿香因土壤与栽培方法等不同可能产生变异。结论：本实验所建3种商品广藿香的“数字化”共有模式可用于广藿香商品的品种鉴定；利用挥发油特征指标成分群建立中药GC—MS特征指纹图谱，通过大样本分析，将图谱特征转化成数据信息，建立样品的数据信息共有模式，使在不同仪器、色谱柱、色谱条件下的分析结果可以相互比对，将极大提高指纹图谱的实用性。

气相色谱-质谱联用建立中药特征指纹图谱的色谱条件探讨

目的探讨GC-MS建立中药特征指纹图谱色谱条件的参数设置。方法在石菖蒲、广藿香等实例研究的基础上,对溶剂的种类和数量,以及升温程序、电离电压、柱前压与流速、离子源温度、进样口温度等仪器参数进行比较。结果升温程序、电离电压、柱前压与流速等对特征指纹图谱的影响较大,而离子源温度、进样口温度的影响较小。结论GCMS建立中药特征指纹图谱方法先进、可靠。建议采用特征指标成分群开展方法学(精密度、稳定性、重现性)的考察,且将相对含量的RSD值定为不得大于5%比较符合实际情况。

石菖蒲挥发油GC-MS特征指纹图谱在复方制剂中的应用模式研究

目的:探讨石菖蒲挥发油GC-MS特征指纹图谱在复方制剂中应用的可行性,试图利用“特征指纹图谱的数据信息”对复方制剂中石菖蒲的质量优劣作出判断。方法:采用GC-MS对5种含石菖蒲的中药复方制剂进行检测,比对复方中检出的特征指标成分群与“标准样本”中“特征指标成分群的含量平均值”之间的相似度。结果:4种复方制剂与标准样本有较好的相似度,达到99.2%以上,1种制剂的石菖蒲原药材不合格。结论:石菖蒲挥发油GC-MS特征指纹图谱可以用于成品制剂的质量检测;中药GC-MS“特征指纹图谱数据信息”的模式构建有利于指纹图谱在复方中的推广应用。

均值相似度与区间相似度在石菖蒲GC-MS特征指纹图谱中的比较

目的探讨石菖蒲挥发油GC-MS特征指纹图谱相似度计算的合理方法,为中药GC-MS特征指纹图谱相似度的计算提供一种可行模式。方法比较3种不同相似度计算方式:①仅取21批次石菖蒲挥发油中甲基丁香酚、顺式甲基异丁香酚、反式甲基异丁香酚、-γ细辛醚、β-细辛醚、-α细辛醚等6个特征指标成分与均值比较。②除6个特征指标成分外,将其余成分视作一个整体,并入一同与均值进行计算。③视每个特征成分的均值加减标准差这个区间为天然波动范围,计算“区间相似度”。并采用文献数据验证3种计算方法的实用性。结果暂定特征指标成分加其余成分合计相似度(夹角余弦法)在0.97以上的样品为合格样品;“区间相似度”能合理体现挥发油的质量,暂定0.96以上样品质量较佳。结论本文建立的石菖蒲数据信息共有模式,使在不同GC-MS仪器、色谱柱、色谱条件下的分析结果可以相互比对,提高指纹图谱的实用性。“区间相似度”似更符合中药成分的实际情况,它不是一个固定的值,而是一个波动的区间,而将这一区间控制在合理的范围即可保证中药的质量稳定。

不同产地薄荷挥发油特征指纹图谱的研究

薄荷为唇形科植物薄荷（Mentha haplocalyx Briq.）干燥地上部分。

穿心莲干浸膏HPLC特征指纹图谱研究

目的:建立穿心莲干浸膏的HPLC特征指纹图谱分析方法。方法:采用高效液相色谱法对16批穿心莲干浸膏进行分析。色谱柱:Cosmosil 5C18-MS-Ⅱ(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水,梯度洗脱;检测波长:225 nm;流速:1.0 m L/min;柱温:30℃。结果:建立了穿心莲干浸膏的HPLC特征指纹图谱,确定了7个共有峰,利用对照品和LC-MS法对7个共有峰进行了化学成分的确认,其相对保留时间为:1.00(峰1,穿心莲内酯)、1.04(峰2,脱氧穿心莲内酯苷)、1.07(峰3,异穿心莲内酯)、1.10(峰4,脱水穿心莲内酯苷)、1.50(峰5,新穿心莲内酯)、1.75(峰6,脱氧穿心莲内酯)、1.79(峰7,脱水穿心莲内酯)。结论:该方法简单、精密度高、重现性好,可为穿心莲干浸膏及其制剂的质量控制和评价提供科学依据。

凤丹皮总苷高效液相色谱特征指纹图谱研究

目的建立凤丹皮总苷的指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠依据。方法采用Agilent TC-C_(18)(2)(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱;乙腈(A)-0.05%磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长230nm,进样容积20μL。结果建立了凤丹皮总苷高效液相色谱特征指纹图谱的共有模式,指定18个共有峰,统计结果显示,11批凤丹皮总苷样品高效液相色谱特征指纹图谱相似度均大于0.80。结论建立的特征指纹图谱方法快速、准确、简便,可用于凤丹皮总苷的质量控制。

升陷汤标准煎液HPLC⁃ELSD特征指纹图谱建立及3种成分测定

目的建立升陷汤(黄芪、柴胡、升麻等)标准煎液HPLC⁃ELSD特征指纹图谱,并测定3种成分的含量。方法建立15批样品HPLC⁃ELSD特征指纹图谱,测定黄芪甲苷、知母皂苷BⅡ、桔梗皂苷D含量。结果15批样品特征指纹图谱中有6个共有峰,相似度大于0.9。黄芪甲苷、知母皂苷BⅡ、桔梗皂苷D分别在0.47~11.86、1.22~7.29、0.10~5.00μg范围内线性关系良好(r>0.9995),平均加样回收率分别为95.64%、97.42%、103.42%,RSD分别为1.82%、3.34%、2.06%。结论该方法准确、灵敏、稳定,可用于升陷汤标准煎液的质量控制。

乌梅炭品乙酸乙酯部位特征指纹图谱研究

目的建立乌梅炭乙酸乙酯部位特征指纹图谱。方法采用高效液相色谱法(HPLC)SinoChrom ODS-BP色谱柱(5μm,4.6mm×250mm);0.2%磷酸-甲醇等度洗脱;流速1mL/min;柱温30.0℃;检测波长225nm。结果 10批不同来源的乌梅炭品乙酸乙酯部位特征指纹图谱利用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"分析相似度较高,HPLC特征指纹图谱中乌梅炭品乙酸乙酯部位主要成分均得到很好分离共有24个特征峰。结论本方法重复性好,专属性强,更为全面地反映了乌梅炭品的内在品质。