精神分裂症患者外周色氨酸-犬尿氨酸代谢通路中代谢物水平与临床症状的关系

背景精神分裂症是一种常见的重性精神障碍,其发病机制复杂,目前关于精神分裂症外周血清和尿液犬尿氨酸(KYN)代谢物相关性的研究有限。目的分析精神分裂症患者外周血清和尿液色氨酸(TRP)-KYN代谢物与白细胞介素-6(IL-6)的浓度以及血清与尿液KYN代谢物的相关性以及代谢物水平与临床症状的相关性,以期为探索精神分裂症的潜在生物标志物提供参考。方法纳入2021年12月—2022年12月在杭州市第七人民医院住院治疗或门诊就诊的、符合《精神障碍诊断与统计手册(第5版)》(DSM-5)精神分裂症诊断标准的38例患者为研究对象,同期在杭州市社区招募健康对照组共26例。采用阳性和阴性症状量表(PANSS)评定患者的精神病性症状,采用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱技术检测所有受试者血清和尿液TRP、KYN、犬尿喹啉酸(KYNA)、喹啉酸(QUIN)、吡啶甲酸(PIC)、黄尿酸和5-羟色胺(5-HT)水平,采用酶联免疫分析检测血清和尿液IL-6水平。采用Pearson相关分析考查精神分裂症患者血清与尿液TRP-KYN代谢物之间的相关性以及代谢物水平与临床症状的相关性。结果精神分裂症患者血清IL-6水平高于健康对照组,差异有统计学意义(U=798.500,P<0.01)。精神分裂症患者尿液PIC水平低于健康对照组,差异有统计学意义(U=253.000,P=0.013)。精神分裂症患者血清KYN水平与尿液QUIN/KYNA、QUIN/PIC均呈正相关(r=0.562、0.438,P均<0.05)。精神分裂症患者血清5-HT/KYN与PANSS总评分和阴性症状分量表评分均呈正相关(r=0.458、0.455,P均<0.01)。结论精神分裂症患者血清TRP-KYN代谢物水平与尿液中神经毒性代谢物比值有关,并与阴性症状严重程度呈正相关。

色氨酸犬尿氨酸代谢、免疫细胞与炎症性肠病的研究进展

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是全球性疾病,现今仍无法根治,疾病负担日益加重,T细胞、DC细胞、NK细胞、巨噬细胞、ILC细胞等免疫细胞在IBD中发挥着重要作用。色氨酸犬尿氨酸代谢途径产物可通过多种方式调节免疫细胞的复制、功能、凋亡等,从而参与IBD的发生发展。该综述就关于多种免疫细胞在IBD中的作用、色氨酸犬尿氨酸途径通过调节免疫细胞参与IBD的机制进行阐述,可为生物治疗IBD以及IBD的靶向药物研究提供理论依据,为IBD患者提供更好的治疗。

老年心力衰竭住院患者犬尿氨酸和色氨酸与短期预后的关系探索

目的 探讨心力衰竭住院患者犬尿氨酸/色氨酸比值波动及其与短期预后的关系。方法 回顾性选取2020年12月至2022年12月长沙市第一医院收治的心力衰竭住院患者150例,根据患者出院后6个月预后情况分为预后不良组48例和预后良好组102例。采用液相色谱-串联质谱法测定患者血清中犬尿氨酸、色氨酸浓度,比较2组患者入院时、出院时犬尿氨酸/色氨酸比值,采用ROC曲线分析犬尿氨酸/色氨酸比值对心力衰竭住院患者短期预后的预测价值,采用logistic回归分析心力衰竭住院患者出院后6个月发生不良事件的影响因素。结果 预后不良组总胆固醇低于预后良好组,B型钠尿肽、尿素高于预后良好组(P<0.05)。2组出院时犬尿氨酸/色氨酸比值均低于入院时(P<0.01);预后不良组出院时犬尿氨酸/色氨酸比值高于预后良好组(P<0.01)。ROC曲线分析显示,入院时、出院时犬尿氨酸/色氨酸比值预测心力衰竭住院患者短期预后的曲线下面积分别为0.863(95%CI:0.803~0.924)、0.701(95%CI:0.602~0.801),出院时犬尿氨酸/色氨酸比值预测效能高于入院时(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,总胆固醇(OR=0.696,95%CI:0.501~0.965)、B型钠尿肽(OR=1.530,95%CI:1.092~2.143)、尿素(OR=1.740,95%CI:1.077~2.813)、出院时犬尿氨酸/色氨酸比值(OR=2.280,95%CI:1.093~4.754)是心力衰竭住院患者出院6个月发生不良事件的影响因素(P<0.05)。结论 犬尿氨酸/色氨酸比值是心力衰竭住院患者短期不良预后的独立危险因素,且可有效预测短期预后情况。

液相色谱串联质谱法测定青少年抑郁症患者血清和尿液中色氨酸代谢物的水平

目的观察并比较液相色谱串联质谱技术检测青少年抑郁症患者血清和尿液中色氨酸-犬尿氨酸(TRP-KP)通路代谢物的浓度。方法对该通路中主要代谢物如色氨酸(TRP)、犬尿氨酸(KYN)、犬尿酸(KYNA)和3-羟基犬尿氨酸(3-HK)采用同位素标记法进行定量分析。使用岛津C18色谱柱,0.2%甲酸水溶液和乙腈进行梯度洗脱分离,7 min内采用正离子和多反应监测模式进行检测。考察线性范围、精密度等参数。用该方法检测143例青少年抑郁症患者和110例体检健康者血液和尿液样本并比较。结果以TRP为例,血清和尿液的线性范围分别为0.54~107.84μmol/L和0.74~147.06μmol/L。批内变异系数(CV)≤6.3%,批间CV≤3.22%,实验室总CV≤6.5%。抑郁组和对照组血清和尿液检测结果表明,抑郁组KYNA、KYN和TRP水平低于对照组,而3-HK水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。除TRP外,其他代谢物水平在尿液中显著高于血清中,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论与血清相比,尿液中TRP-KP的代谢物即KYN、KYNA和3-HK浓度更高,由于尿液收集过程是无创的,因此检测尿液中TRP-KP代谢物具有更大的优势。

背俞功能带推法对慢性疲劳综合征大鼠肠道菌群及色氨酸代谢的影响

目的探究背俞功能带推法改善慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)大鼠的症状,以及对其肠道菌群和色氨酸代谢的影响。方法选取SPF级SD大鼠24只,随机分为空白组8只、造模组16只,造模组制备CFS模型21 d,模型制备成功后随机分为模型组和推法组,每组8只。推法干预14 d,做旷场实验及力竭游泳实验等行为学实验后,取大鼠血清、结肠进行酶联免疫吸附法检测血清色氨酸(tryptophan,TRP)、犬尿氨酸(kynurenine,KYN)及结肠吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO),取肠道粪便进行16 s rRNA测序分析肠道菌群结构及多样性。结果与空白组大鼠相比,模型组大鼠总路程、跨格数、中心区时间和路程、进入中心区次数力竭游泳时间均显著减少(P<0.01);与模型组相比,推法组大鼠上述各项指标均增加(P<0.05)。在门水平,与空白组相比,模型组厚壁菌门、拟杆菌门和疣微菌门比例下降,变形菌门和酸杆菌门比例明显上升;与模型组相比,推法组厚壁菌门和酸杆菌门比例下降,而拟杆菌门和变形菌门比例升高。在属水平上,与空白组相比,模型组中罗姆布茨菌属(Romboutsia)和疣微菌科UCG-005菌属(Ruminococcaceae_UCG-005,简称UCG-005)的比例明显降低,而乳杆菌属(Lactobacillus)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)比例明显增加;与模型组相比,推法组Lactobacillus和杜氏杆菌属(Dubosiella)比例下降,而Romboutsia和UCG-005比例上升。Alpha和Beta多样性分析,与空白组相比,模型组的菌群丰富度和多样性均降低;与模型组相比,推法组大鼠菌群丰富度和多样性有明显上升;但组间差异均无统计学意义(P>0.05)。LEfSe分析中,与空白组相比,模型组的优势物种主要聚集在目、科、属,推法组的优势物种主要聚集在科、属。与空白组大鼠相比,模型组大鼠血清TRP含量显著降低(P<0.01),血清KYN和结肠IDO含量明显升高(P<0.01);与模型组相比,推法组大鼠血清TRP含量明显升高(P<0.01),血清KYN和结肠IDO含量降低(P<0.05)。相关性分析发现,与TRP相关性较大的菌属包括Lachnospiraceae_NK4A136_group、Lactobacillus、Romboutsia等(P<0.05),与KYN相关性较大的菌属包括Bifidobacterium05、Lachnospiraceae_NK4A136_group、UCG-005(P<0.05或P<0.01),与IDO相关性较大的菌属包括Allobaculum、Lachnospiraceae_NK4A136_group、Romboutsia(P<0.05或P<0.01)。结论背俞功能带推法能明显改善CFS大鼠的疲劳以及焦虑症状,调节菌群代谢物TRP、KYN及结肠IDO含量,对肠道菌群结构及其多样性有一定的调节作用,且部分菌属与TRP、KYN、IDO具有相关性。

萝卜硫素对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用及色氨酸-犬尿氨酸通路的影响

目的探究萝卜硫素(SFN)对心肌缺血再灌注(I/R)损伤大鼠色氨酸(TRP)-犬尿氨酸(KYN)信号通路及心肌损伤的影响。方法研究于2019年7月至2020年6月进行,将SD雄性大鼠随机分为假手术组(Control)、模型组(I/R)、SFN低(I/R+L SFN)、高(I/R+H SFN)剂量组。术后24 h,ELISA检测各组大鼠血清中炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;HE染色观察各组大鼠心肌组织病理变化;TUNEL检测各组大鼠缺血心肌细胞凋亡情况;HPLC检测各组大鼠心肌组织中TRP、KYN浓度;蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组大鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、活化胱天蛋白酶3(cleaved-capase3)、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)蛋白表达情况。结果与Control组相比,I/R大鼠心肌细胞破碎、坏死,细胞排列不规则,心肌纤维断裂,伴有炎性细胞浸润,血清中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量、心肌细胞凋亡指数[(32.85±3.13)比(1.07±0.08)]、心肌组织TRP[(783.75±30.32)pmol/L比(402.23±23.55)pmol/L]、KYN浓度[(567.54±28.18)pmol/L比(215.31±20.03)pmol/L]、KYN/TRP比值、cleaved-capase3、Bax、IDO蛋白水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05);与I/R相比,I/R+L SFN、I/R+H SFN剂量组心肌细胞上述病理症状明显减轻,大鼠血清中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量、心肌细胞凋亡指数、心肌组织TRP、KYN浓度、KYN/TRP比值、Bax、cleaved-capase3、IDO蛋白水平依次降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论SFN可减少心肌细胞凋亡,缓解机体炎症反应,对心肌损伤有保护作用可能与TRP-KYN信号通路有关。

色氨酸及其代谢产物与微生物–肠–脑轴的研究进展

色氨酸是人体必需氨基酸之一,其可在体内通过三条途径代谢,生成多种生物活性分子,通过神经–内分泌、免疫和迷走神经途径参与中枢神经信号传递和宿主肠道内生理功能的调节。胃肠道与肠神经系统、中枢神经系统之间的双向交流被称为肠–脑轴。目前,肠道菌群基于“微生物–肠–脑轴”这一理论,通过影响色氨酸代谢从而对宿主的认知功能和行为产生影响得到广泛关注。本文就色氨酸及其代谢产物通过“微生物–肠–脑轴”途径影响宿主大脑发育的作用机制、内在联系作一综述,以期为临床改善认知功能提示新思路、新靶点。

帕金森病认知功能与血清犬尿氨酸水平的相关性

目的:探讨血清犬尿氨酸(KYN)与帕金森病(PD)认知功能的关系并进行分析,为PD伴认知障碍患者的治疗和预后提供新的预测因素。方法:选取就诊的帕金森病患者40例为试验组,并选取同期健康体检者33例为健康对照组。采集所有受试者晨起空腹静脉血,采用液相色谱串联质谱法测定血清KYN。采用简易精神状态量表(MMSE)及蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估入组者的认知功能。采用Spearman相关分析血清KYN与MMSE、MoCA之间相关性。采用单因素Logistic回归分析PD发生危险因素。血清KYN水平对发生PD的预测作用的大小,则选择用受试者工作特征(ROC)曲线来评价。结果:试验组血清KYN含量、MMSE及MoCA低于健康对照组,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。但血清KYN含量与MMSE及MoCA分值之间未见明显相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。单因素Logistic回归分析可见PD患者病程是血清KYN水平的独立危险因素(OR>1),且血清KYN含量降低是PD的危险因素(OR>1)。ROC结果表明,KYN的最佳截止值为0.365μg/ml,灵敏度为62.5%,特异性为60.5%,曲线下面积为0.667(95%CI:0.539~0.795;P<0.05)。结论:当血清KYN≤0.365μg/ml时,人群发生PD的风险显著增加,即血清KYN水平可作为PD发生的有价值的评估指标。然而血清KYN水平与MMSE、MoCA之间未见明显相关性。

糖尿病肾病患者血清色氨酸代谢谱的靶向研究

目的:研究糖尿病肾病(DKD)患者与健康对照人群血清色氨酸不同代谢通路中代谢物的差异,分析差异代谢物与临床指标之间的相关性。方法:以包头医学院第一附属医院肾内科和内分泌科住院部患者为研究对象,选取10例DKD患者为疾病研究组,10例健康体检者为正常对照组,收集血液标本。采用靶向代谢组学方法分析两组人群中血清色氨酸及其代谢物的差异,进行生物信息学和统计学分析,阐明其在DKD中的意义。结果:在两组血清中鉴定出5个差异代谢物,其中DKD患者血清中L-色氨酸(L-TRP)、5-羟色胺(5-HT)的水平明显低于健康对照组(P<0.05),而5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)、犬尿氨酸(KYN)和3-吲哚丙酸(IPA)的水平则增加,差异具有统计学意义(P<0.05),5-HIAA和IPA均与血肌酐呈显著正相关,与肾小球滤过率呈显著负相关。结论:DKD患者血清色氨酸代谢物水平与健康对照组相比具有明显的差异,其中的某些差异代谢物还与DKD的发生发展具有明显的相关性。

高效液相色谱-荧光检测法同时测定血清中的犬尿氨酸和犬尿喹啉酸

建立了在线衍生、双波长高效液相色谱-荧光检测器同时检测血清中犬尿氨酸（kynurenine,Kyn）和犬尿喹啉酸（kynurenic acid,KYNA）含量的方法。血清标本经5%高氯酸溶液去除蛋白质后,上清液直接进样分析测定。采用的色谱柱为Hypersil C8柱;流动相为0.25mol/L醋酸锌-50mmol/L醋酸溶液（含3%乙腈）,流速为1.5mL/min。在0~10min时间段,在激发波长和发射波长分别为365nm和480nm时检测Kyn;10min后,在激发波长和发射波长分别变换为344nm和404nm时检测KYNA。Kyn的保留时间约为8.1min,线性范围为98~19 600nmol/L,最低检出浓度为50nmol/L,平均回收率为94.88%,日内、日间测定值的相对标准偏差（RSD）均低于4%。KYNA的保留时间约为13.0min,线性范围为2.62~1 047nmol/L,最低检出浓度为0.11nmol/L,平均回收率为102.72%,日内、日间测定的RSD均低于4%。苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸和5-羟色胺等物质对目标物的检测无干扰。71例健康成人血清中,Kyn和KYNA含量分别为（1.40±0.34）μmol/L和（24.22±8.67）nmol/L。该方法简便、快速、灵敏、特异,适于临床和科研应用。

高效液相色谱法同时测定血清中的犬尿氨酸和色氨酸

建立了一种能同时检测血清中的犬尿氨酸（kynurenine，Kyn）和色氨酸（tryptophan，Trp）的高效液相色谱，紫外检测法。采用的色谱柱为Symmetry Shield RP-C18柱（150mm×3．9mm i．d．，5μm），流动相为15mmol/L乙酸钠-乙酸溶液（含2．7％乙腈，pH3．6），流速为1．0mL／min，紫外检测波长为225nm。血清标本经5．0％（体积分数）高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液直接进样分析测定。研究结果表明，Kyn保留时间为3．5min，线性范围为0．098～49μmol/L，最低检出浓度为0．02μmol/L，回收率为90．82％～93．45％；Trp保留时间为8．1min，线性范围为4．9～490μmoL／L，最低检出浓度为0．20μmol/L，回收率为95．51％～98．67％。Kyn和Trp日内、日间测定的相对标准偏差均小于4％，苯丙氨酸、酪氨酸、5-羟色胺和犬尿喹啉酸等物质对该法均无干扰。该方法简便、快速、稳定、可行，可应用于临床和科研工作。

帕金森病患者血清中犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及色氨酸的测定及临床意义

目的研究帕金森病(Parkinson's disease,PD)患者血清犬尿氨酸(kynurenine,KYN)、犬尿喹啉酸(kynurenic acid,KYNA)和色氨酸(trptophane,TRP)浓度及代谢改变,探讨其临床意义。方法采用高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)检测16例首发PD患者、36例美多巴(Madopar)治疗PD患者2、0例正常对照人群血清KYN、KYNA和TRP的浓度,比较血清KYN、KYNA、TRP以及KYNA/KYN和KYN/TRP比值的差异性。结果美多巴治疗PD患者血清KYNA水平和KYNA/KYN比值较首发PD患者和正常对照人群显著升高(P<0.01);首发PD患者及美多巴治疗PD患者血清中TRP水平较正常对照人群显著升高(P<0.01)。结论采用HPLC-FLD检测PD患者血清中的KYN、KYNA及TRP的含量,可为帕金森病的临床诊断和药物治疗提供部分实验室依据。

高效液相色谱法同时测定血清色氨酸和犬尿氨酸浓度的方法建立及应用

目的 建立一种高效液相色谱-紫外检测法同时测定血清中色氨酸（Trp）和犬尿氨酸（Kyn）浓度的方法。方法 色谱柱采用Agilent Hypersil ODS（125．0mm×4．0mm，5μm），流动相为15mmol／L乙酸钠缓冲液（pH4．0）和乙腈95：5（V／V），流速为0．8ml／min，柱温25℃，紫外检测λKyn=360nm，λTrp=278nm。结果 Kyn和Trp的保留时间分别为3．3min和5．2min，线性范围分别为0．083～21．000μmol／L和2．650～678．000μmol／L，检测限分别为0．028μmol／L和0．053μmol／L，日内和日间相对标准偏差分别低于5％和10％，回收率分别为91．99％～113．89％和95．81％～118．82％。结论 该方法简便、快速、特异，适合于临床检测。

慢性乙型肝炎患者色氨酸和犬尿氨酸的检测及意义

目的探讨血浆中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)的定量检测在乙型肝炎(乙肝)中的临床意义。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定60例慢性乙肝患者(乙肝患者组)和41例正常人(正常对照组)血浆中色氨酸和犬尿氨酸含量,并对两组数据进行比较。结果正常对照组Trp含量为(76.99±10.88)μmol/L,Kyn含量为(2.16±0.32)μmol/L,Kyn/Trp为0.028±0.003;乙肝患者组Trp含量为(68.04±8.52)μmol/L,Kyn含量为(2.18±0.26)μmol/L,Kyn/Trp为0.032±0.004。乙肝患者组血浆Trp含量明显低于正常对照组(P<0.01),Kyn/Trp明显高于正常对照组(P<0.01),两组Kyn含量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢性乙肝患者色氨酸代谢发生异常,检测患者血浆中Trp和Kyn有重要的临床意义。

中药通过色氨酸-犬尿氨酸代谢途径治疗抑郁症的研究进展

抑郁症是一种危害人类身心健康的疾病,其发病率日益上升,中药在临床治疗抑郁症方面已显优势。近年来,由炎症引发的色氨酸-犬尿氨酸途径及其代谢物水平的改变参与抑郁症发病机制的研究越来越受到广泛关注,针对这一机制,本文系统梳理了中药调控色氨酸-犬尿氨酸代谢机制的研究进展,为抗抑郁中药开发提供依据。

原发性高血压患者血浆色氨酸、犬尿氨酸和犬尿喹啉酸浓度的变化

目的通过测定血浆色氨酸(TRP)、犬尿氨酸(KYN)和犬尿喹啉酸(KYNA)浓度,探讨外周吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)活性与原发性高血压(EH)的关系。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定100例EH患者和80名健康体检者(对照组)血浆TRP、KYN和KYNA浓度,计算产物/底物的百分比来评价酶活性,即IDO活性=KYN/TRP×100%,KAT活性=KYNA/KYN×100%。结果 EH组血浆TRP浓度为(59.85±9.89)μmol/L,明显高于对照组[(48.19±7.72)μmol/L,P<0.001];KYN浓度为(2.01±0.48)μmol/L,明显低于对照组[(2.17±0.43)μmol/L,P<0.05]。EH组和对照组血浆KYNA浓度分别为(24.10±9.12)、(23.59±7.27)μmol/L,二者差异无统计学意义(P>0.05)。EH组IDO活性为3.40%±0.85%,明显低于对照组(4.54%±0.81%,P<0.001);而KAT活性为1.20%±0.36%,明显高于对照组(1.09%±0.27%,P<0.05)。EH组血浆TRP浓度与年龄呈负相关(r=-0.316,P=0.001),而对照组二者之间无明显相关性(r=-0.208,P=0.064)。EH组和对照组血浆IDO活性均与年龄呈正相关(EH组:r=0.264,P=0.008;对照组:r=0.305,P=0.006)。2组血浆KYN、KYNA浓度及KAT活性与年龄均无明显相关性。结论EH组血浆TRP浓度明显增高而KYN浓度明显降低,提示外周TRP-KYN代谢途径的IDO活性可能与EH有关。

高效液相色谱——紫外、荧光双检测器同时测定人尿中犬尿氨酸和犬尿喹啉酸

目的建立高效液相色谱(HPLC)同时测定人尿中犬尿氨酸(KYN)和犬尿喹啉酸(KYNA)方法。用KYNA/KYN比值评价人体犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)活性。方法采用HPLC测定KYN、KYNA,分析柱为安捷伦HCC18反相色谱柱;流动相为10mmol/L乙酸钠-乙酸缓冲液∶7%乙腈=93∶7;流速1mL/min;检测器波长:紫外365nm,荧光344nm(激发)/398nm(发射)。结果KYN和KYNA保留时间分别为6.9和11.5min。水溶液标准与标准加入工作曲线斜率差异无统计学意义(KYN:P=0.4068;KYNA:P=0.6462)。KYN和KYNA的平均回收率分别为98.74%±7.53%、95.17%±8.17%;稳定性试验的变异系数(CV)分别为3.35%和0.88%;精密度CV分别为2.73%和2.79%;最低检测限分别为0.4和0.2μmol/L。30份健康成年人尿样的KYNA/KYN比值为2.45±1.54。尿中KYNA与KYN含量呈正相关关系(r2=0.3758,P<0.001)。结论测定方法灵敏、准确、稳定。KYNA/KYN比值评测KAT活性具有简便、实用等特点,可用于相关疾病的临床辅助诊断和基础研究。

再生障碍性贫血中色氨酸和犬尿氨酸的检测方法及意义

目的:建立检测再生障碍性贫血(aplastic anemia,简称再障)血清中色氨酸(Trp)及其代谢产物犬尿氨酸(Kyn)水平的方法,探讨其与疾病之间的关系。方法:应用反向高效液相色谱法检测,以荧光检测器检测Trp,以紫外检测器检测Kyn的血清水平。结果:再障患者血清Trp浓度明显低于正常对照,Kyn浓度明显高于正常对照(P<0.05);再障动物模型结果与患者血清结果相同。结论:再障中吸哚胺-2,3-双加氧酶的活性较正常明显增高,促进色氨酸向犬尿氨酸转化,造成细胞内的"色氨酸饥饿状态"从而抑制T细胞的活化和增殖,可能是机体的一种自我保护机制。

高效液相色谱法测定细胞培养液中色氨酸和犬尿氨酸含量研究报告

目的 建立色氨酸和犬尿氨酸含量测定的方法。方法 采用高效液相色谱-紫1外法同时测定细胞培养液中的色氨酸和犬尿氨酸含量。结果 及结论 经测定,犬尿氨酸在2.01~31.52mol/L范围内线性关系良好（Y=18.175X-27.361 r=0.998 3）,色氨酸在2.44~97.51mol/L范围内线性关系良好（Y=13.923X-5.3782 r=0.999 5）,方法学考察专属性、回收率、精密度、稳定性良好,可用于色氨酸和犬尿氨酸的测定。

基于HPLC的标准加入法同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸

目的 建立一种同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸浓度的高效液相色谱（HPLC）法，用于评价小鼠给予IDO抑制剂后体内IDO活性。方法 血清用6%高氯酸沉淀蛋白法处理,离心后取上清进样，采用标准加入法定量。选用ThermoHypersil GOLD色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）分离，流动相为乙腈-醋酸钠（15 mmol/L，冰醋酸调pH至 4.0），流速1.1 mL/min，柱温30 ℃，犬尿氨酸和色氨酸的紫外检测波长分别为360 nm和280 nm。结果 犬尿氨酸保留时间为6.10 min，线性范围为0.25～10 μmol/L，检测限为0.09 μmol/L；色氨酸保留时间10.12 min，线性范围为25～1 000 μmol/L，检测限为0.25 μmol/L。精密度、回收率及稳定性等均符合生物样品定量分析方法验证指导原则的要求，并成功应用于62只小鼠血清犬尿氨酸和色氨酸浓度的测定。结论 建立了一种简单、快速、准确的HPLC分析方法，采用标准加入定量方式，可同时测定小鼠血清中犬尿氨酸和色氨酸血药浓度，并成功应用于实际生物样本的测定。