犬瘟热H基因亚单位的克隆和融合表达

将犬瘟热H基因亚单位片段(Hs)克隆入原核表达载体pGEX-6p-1中,克隆采用限制性内切酶EcoR I和XhoI酶切pGEX-6p-1以及Hs基因PCR产物,连接成pGEX-6p-1-Hs重组质粒,并将它转化进入大肠杆菌表达受体菌BL21(DE3)中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,可见预计大小为32 kDa的融合蛋白,诱导菌体裂解物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,用GST单克隆抗体进行Western-blotting试验,结果确证了GST-Hs融合蛋白的正确表达,这为今后的进一步研究奠定了基础。