狗枣猕猴桃叶黄酮提取工艺的研究

以乙醇作为提取剂,采用振荡提取法从狗枣猕猴桃叶中提取黄酮类化合物,研究了乙醇浓度、样品粒度、料液比、浸提温度、浸提时间及浸提次数对提取效果的影响。结果表明,料液比对黄酮提取效果影响最大,其次为提取时间和提取温度,而样品粒度和乙醇浓度影响较小。狗枣猕猴桃叶黄酮的最佳提取工艺条件为:乙醇浓度75%,粒度80目,料液比1∶15,浸提温度80℃,浸提时间2h,浸提次数3次,在此条件下黄酮提取率可达7.250%。

双水相萃取法分离纯化狗枣猕猴桃叶总黄酮

采用聚乙二醇-硫酸钠双水相体系分离纯化狗枣猕猴桃叶黄酮,确定其双水相体系组成24%PEG400-15%Na2SO4,并通过单因素试验和正交试验探讨黄酮粗提液质量浓度、KCl添加量、pH值和温度对萃取效果的影响。结果表明:黄酮粗提液质量浓度和pH值对黄酮萃取效果影响最大,其次为KCl添加量,温度的影响较小;最佳萃取条件为粗提液质量浓度C0、KCl添加量2%、pH9、25℃。在此条件下,狗枣猕猴桃叶黄酮主要分布在上相,分配系数为24.31,萃取率达到96.90%。此方法操作简单方便、成本低,是黄酮类化合物分离纯化的一种有效方法。

超声波法提取狗枣猕猴桃叶黄酮的工艺

以乙醇作为提取剂,采用超声波辅助法研究狗枣猕猴桃叶黄酮的提取工艺。结果表明,影响狗枣猕猴桃叶黄酮提取效果的主要因素是料液比,其次是颗粒粒度和超声温度,而乙醇浓度和超声时间的影响较小,最佳工艺条件为乙醇浓度45%,粒度100目,料液比1∶40(g/mL),采取室温下浸泡1 h后,50℃超声处理25 min,再于室温下浸泡1 h后,最后超声处理25 min,连续提取2次,黄酮得率为9.996%。

狗枣猕猴桃叶提取物黄酮对大鼠局灶性脑缺血损伤组织病理结构的影响

目的研究提取物黄酮对局灶性脑缺血大鼠损伤组织病理及其超微结构的影响。方法Nagasawa线栓法将大鼠制成局灶性大脑中动脉缺血模型。将Wistar雄性大鼠75只随机分为:假手术组、盐水对照组、小剂量给药组、中剂量给药组、大剂量给药组,每组15只。小剂量给药组、中剂量给药组、大剂量给药组于术前30min及术后2h分别给予不同剂量狗枣猕猴桃叶提取物黄酮腹腔内注射。应用TTC染色及图像分析系统测定局部脑缺血24h后的梗死灶体积,HE染色及透射电镜观察大鼠局灶脑缺血后组织病理及超微结构的变化。结果与盐水对照组相比,药物干预组局部缺血后在相同时间内梗死灶的体积较小(P<0.05),超微结构改变也较轻,在实验剂量范围内其病理变化与给药剂量呈负相关。结论狗枣猕猴桃叶提取物黄酮对缺血后大鼠神经元形态和超微结构具有保护作用。

狗枣猕猴桃叶多糖分离纯化及抗氧化活性研究

本文对狗枣猕猴桃叶的多糖进行分离纯化,同时对其抗氧化活性进行研究。先后利用DEAE-Sepharose Fast Flow柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex G-200柱色谱进行分离纯化得到APs-2-1、APs-3-1、APs-3-2三部分均一多糖;利用苯酚-硫酸法测得三部分均一多糖的总糖含量分别为91.26%、90.23%、88.63%,利用硫酸-咔唑法测得糖醛酸的含量分别为16.20%、27.20%、6.90%;此外,还对狗枣猕猴桃叶多糖及所分离的三种均一多糖的总抗氧化能力(FRAP值)、对羟基自由基和DPPH自由基的清除能力进行测定,结果表明所分离的三种多糖及狗枣猕猴桃叶多糖均具有一定的抗氧化能力,但是抗氧化能力均低于Vc。

狗枣猕猴桃叶提取物黄酮对大鼠急性脑缺血后caspase-3、VEGF表达的影响

目的探讨狗枣猕猴桃叶提取物黄酮对大鼠永久性缺血性脑损伤后急性期caspase-3、VEGF表达的影响。方法首先Nagasawa线栓法制备大鼠大脑中动脉永久性急性脑缺血模型(MCAO)。Wistar雄性大鼠随机分为盐水对照组(A组:生理盐水对照组)、小剂量给药组(B组:给药剂量10mg/kg)、中剂量给药组(C组:给药剂量20mg/kg)、大剂量给药组(D组:给药剂量40mg/kg)。A组按照0.5ml/100g体重腹腔注射生理盐水。B、C、D组于手术前30min及术后2h两次腹腔内给药。应用TUNEL法测缺血区凋亡细胞数;原位杂交法检测缺血区caspase-3mRNA表达;免疫组化的方法检测VEGF的表达变化。结果 B、C、D组TUNEL法测定缺血区凋亡细胞数明显少于A组(P(0.05);B、C、D组缺血区神经细胞Caspase-3表达明显低于A组(P(0.05)。B、C、D组缺血区神经细胞VEGF表达明显高于A组(P(0.05);D组VEGF表达高于B、C给药组(P<0.05)。结论狗枣猕猴桃叶提取黄酮可以减少脑缺血后神经细胞凋亡、促进VEGF的表达。

黄酮对运动大鼠腓肠肌抗氧化能力的影响

研究了狗枣猕猴桃叶黄酮对大鼠腓肠肌抗氧化能力的影响.24只雄性Wistar大鼠随机分为3组:对照组(C组)、运动组(E组)、运动+黄酮组(EF组,按40mg/(kg·d)补充狗枣猕猴桃叶黄酮),每组8只.E和EF组大鼠进行为期5周的跑台训练,跑台速度25m/min,坡度为0°.5周后测定大鼠血常规、腓肠肌POD,SDH活性及乳酸含量.结果表明:①与C组比较,E组大鼠Hb,RBC,Hct均显著性降低(P<0.01),WBC含量显著性升高(P<0.05),EF组无明显变化;②补充狗枣猕猴桃叶后大鼠SDH,POD活性显著升高(P<0.01和P<0.05),乳酸含量明显降低(P<0.05).由此可知,狗枣猕猴桃叶黄酮能够提高大鼠骨骼肌POD和SDH的活性,增强机体抗氧化能力;同时有利于加快体内乳酸的清除,延缓运动性疲劳的发生,提高机体的有氧运动能力.