狗肝菜多糖通过抗氧化应激对大鼠腮腺放射性损伤的保护作用

目的 探讨狗肝菜多糖通对腮腺放射性损伤大鼠腮腺氧化应激的影响,阐明狗肝菜多糖对放射性损伤腮腺的可能作用机制。方法 将60只大鼠随机分为正常组、正常药物组、放射组、放射药物组,每组15只。采用头颈部18 Gy60Co γ线照射建立放射性腮腺损伤模型。药物组每天给予狗肝菜多糖(200 mg/kg)灌胃。苏木素-伊红(HE)染色观察腮腺病理学变化,免疫组化染色测定腮腺组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达,测定腮腺组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,Western印迹测定各组腮腺组织SOD1、SOD2蛋白水平。结果 与正常组和正常药物组比较,放射组体质量、腮腺质量明显降低,腮腺组织PCNA阳性细胞数明显降低,MDA含量明显升高,SOD活力明显降低,SOD1、SOD2蛋白水平明显降低(P<0.05)。与放射组比较,放射药物组体质量、腮腺重明显升高,腮腺组织PCNA阳性细胞数明显升高,MDA含量明显降低,SOD活力明显升高,SOD1、SOD2蛋白水平明显升高(均P<0.05)。正常组和正常药物组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。正常组和正常药物组腮腺腺泡细胞形态未见明显异常;放射组腮腺腺泡细胞明显皱缩,细胞核碎裂、固缩;放射药物组腮腺腺泡细胞皱缩较轻,细胞核碎裂不明显。结论 狗肝菜多糖可抑制腮腺氧化应激反应,减轻放射性腮腺损伤。

狗肝菜总黄酮微波辐射预处理提取工艺及其生物活性研究

为了更深入研究狗肝菜总黄酮的提取工艺,为后续的研究奠定基础,本文采用微波辐射预处理结合传统水浴法对狗肝菜总黄酮进行提取,并以芦丁标准品作为对照品,采用紫外可见分光光度计测定吸光度并分析狗肝菜中总黄酮的含量。以单因素试验为基础,采用响应面优化工艺参数得到狗肝菜总黄酮的最佳提取率。结果显示:微波辐射预处理提取狗肝菜总黄酮的最佳工艺条件为微波功率350 W、微波时间77 s、汽化剂用量4.3 mL,在此条件下狗肝菜总黄酮提取率为8.382‰。在抗肺癌活性细胞试验中,狗肝菜总黄酮提取物的半抑制浓度为9.516 mg/mL,在药物浓度27 mg/mL时,抑制率达到了88.419%。研究结果表明:微波辐射预处理提取狗肝菜总黄酮是可行的,其总黄酮提取物(乙醇提取物)具有一定的抗肿瘤细胞活性,可以为今后的研究提供参考。

狗肝菜多糖减轻D-氨基半乳糖与脂多糖诱导的大鼠急性肝损伤

目的:观察壮药狗肝菜多糖对D-氨基半乳糖(D-GalN)及脂多糖(LPS)所致大鼠急性重症肝炎的影响。方法:将48只雄性Wistar大鼠随机分成模型、狗肝菜多糖高、低剂量和对照组;狗肝菜多糖高剂量组(300mg·kg-1)、低剂量组(150mg·kg-1)在造模前灌胃给药6d,其它各组用生理盐水对照;末次给药后1h除对照组外均在腹腔内注射D-GalN(500mg.kg-1)和LPS(20μg/kg)建立大鼠急性重症肝炎模型,对照组用生理盐水对照。于6h、12h分别观察并计算各组动物死亡率;存活动物于6h行眶后静脉窦采血用于检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β);12h摘除眼球采血用于检测血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β和一氧化氮(NO);分光光度法检测血清ALT、AST、NO含量,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β水平。12h后全部处死存活动物,肝组织切片观察肝脏病理形态学变化。结果:6h各组动物均存活;与模型组相比,狗肝菜处理组12h死亡率明显低于模型组。模型组血清ALT、AST活力和TNF-α、IL-1β、NO水平均升高,狗肝菜多糖高、低剂量组血清指标均明显低于模型组。模型肝组织大片坏死、淤血,狗肝菜多糖高、低剂量组组织损伤程度明显降低,以高剂量组效果最佳。结论:狗肝菜多糖能减轻D-GalN/LPS诱导的肝损伤,可能通过降低炎性介质TNF-α、IL-1β和NO的水平发挥作用。

狗肝菜的化学成分研究

目的对狗肝菜Dicliptera chinensis全草的化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱和制备性薄层色谱进行分离、纯化,IR、NMR和MS等方法进行结构鉴定。结果从环己烷萃取部分得到13个化合物,分别鉴定为正三十六烷醇(Ⅰ)、硬脂酸(Ⅱ)、羽扇烯酮(Ⅲ)、羽扇豆醇(Ⅳ)、谷甾烷-4-烯-3-酮(Ⅴ)、豆甾烷-5-烯-7-酮-3β-棕榈酸酯(Ⅵ)、β-谷甾醇(Ⅶ)、齐墩果酸(Ⅷ)、3β,6β-豆甾烷-4-烯-3,6-二醇(Ⅸ)、6β-羟基-豆甾烷-4-烯-3-酮(Ⅹ)、3β-羟基-豆甾烷-5-烯-7-酮(Ⅺ)、去氢催叶萝芙叶醇(Ⅻ)和催叶萝芙叶醇(ⅩⅢ)。结论除Ⅱ化合物和Ⅶ外,皆为首次从该属植物中发现。

狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤的影响。方法建立D-半乳糖胺(D-GalN)诱发的大鼠急性肝损伤模型,不同浓度狗肝菜多糖干预后,测定动物血清ALT、AST。肝组织常规制片及HE染色观察组织病理学改变。结果狗肝菜多糖能使肝损伤动物血清ALT、AST水平显著降低。组织病理学检测发现狗肝菜多糖处理后肝组织损害程度降低。结论狗肝菜多糖对D-半乳糖胺所致大鼠急性肝损伤具有保护作用。

狗肝菜多糖对抗结核药物致肝损伤的研究

【目的】研究狗肝菜多糖(DCP)对抗结核药物致肝损伤的保护作用及机制。【方法】将60只小鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、葡醛内酯组(剂量为200 mg/kg)及狗肝菜多糖高、中、低剂量组(剂量分别为600、400、200 mg/kg)。除正常对照组外,其他各组均灌胃异烟肼和利福平各100 mg/kg造模,同时给予治疗药物,每天1次。在实验的第30天,取血和肝组织,采用生物化学法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)以及微粒体一氧化氮(NO)生化指标;采用酶联免疫吸附法检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;应用苏木精—伊红(HE)染色进行肝组织病理学检查。【结果】狗肝菜多糖可减轻抗结核药物引起的小鼠肝组织病理损害,减少炎性细胞,对肝损伤小鼠血清ALT、AST、AKP活性及肝组织中TNF-α、IL-6、NO含量具有抑制或降低作用(P<0.05或P<0.01)。【结论】狗肝菜多糖对抗结核药物致肝损伤的保护作用可能与其介导的抗炎作用有关。

狗肝菜多糖通过抗炎抗氧化抑制酒精高糖高脂引起的大鼠肝损伤

目的基于抗炎、抗氧化研究狗肝菜多糖(Dicliptera chinensis polysaccharide,DCP)对大鼠酒精性脂肪肝(AFLD)的作用及机制。方法将60只大鼠随机分为6组,即正常对照组、模型组、水飞蓟宾组及DCP高、中、低剂量组。正常组喂普通饲料,其余各组以高糖高脂饲料喂养,并每天从5%酒精开始以5 m L·kg^(-1)灌胃,浓度每周递增5%,于第7周末造成大鼠AFLD模型;继续35%酒精和高糖高脂饲料处理,受试药物干预5周后,取血和收集肝组织。检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)水平;测定肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和转化生长因子-β1(TGF-β1)含量;蛋白质印迹法检测肝组织NF-κB蛋白表达情况;HE染色进行肝组织病理学检查。结果 DCP可抑制或降低AFLD大鼠血清或组织中ALT、AST、AKP、TG、TC、LDL-C、MDA、TNF-α、IL-6、TGF-β1的活性或含量(P<0.05),升高HDL-C、SOD和GSH的活性或含量(P<0.05);明显抑制肝脏组织中NF-κB蛋白的表达(P<0.01);病理检查显示,DCP可使肝细胞脂肪变性和炎症反应得到明显改善。结论 DCP可抑制大鼠AFLD形成,其作用机制可能与抗氧化,清除自由基代谢产物,抑制脂质过氧化反应,抗炎及抑制TGF-β1、NF-κB的表达有关。

狗肝菜功能性成分的抗氧化活性

以狗肝菜为原料,对其中的黄酮、多糖、多酚等功能性成分进行提取,并对其抗氧化活性进行研究。结果表明:狗肝菜中含有丰富的黄酮、多糖和多酚类物质,其含量分别为2.4、180.5mg/g和61.2mg/g(以干基计)。抗氧化实验表明:狗肝菜黄酮、多糖和多酚具有较强的清除DPPH自由基和.OH的能力,对DPPH自由基的清除率分别为76.7%、88.2%和35.8%,对.OH的清除率分别为90.8%、95.7%和80.9%。

UV法测定狗肝菜与红丝线草的多糖含量

目的对狗肝菜和红丝线草中多糖含量进行测定和比较。方法紫外分光光度法。结果该方法线性关系良好(r=0.999 8);回收率为99.57%。测得狗肝菜多糖含量为5.23%,红丝线草多糖含量为9.85%。结论该方法灵敏度高,重现性好,可为狗肝菜和红丝钱草的质量标准提供科学依据。

狗肝菜多糖对免疫功能低下小鼠免疫功能的影响

目的研究狗肝菜多糖对小鼠免疫功能的影响。方法建立环磷酰胺(CTX)经直肠给药致免疫低下小鼠模型,测定胸腺和脾脏重量并计算脏器系数,碳粒廓清法测定单核巨噬细胞吞噬功能,比色法测定血清溶血素含量,MTT法测定小鼠脾脏淋巴细胞增殖情况。结果狗肝菜多糖能对抗环磷酰胺引起的小鼠脾萎缩和胸腺萎缩,提高免疫抑制小鼠对碳粒的吞噬作用,且对小鼠血清溶血素的生成有较强的促进作用,能促进小鼠脾脏淋巴细胞的增殖。结论狗肝菜多糖能增强免疫抑制小鼠的免疫功能。

狗肝菜多糖对肝纤维化MAPK信号通路调控作用的研究

目的:研究狗肝菜多糖对大鼠肝纤维化MAPK信号通路的调控作用及机制。方法:将90只大鼠随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.1 mg/kg)阳性组及狗肝菜多糖高(300 mg/kg)、中(150 mg/kg)、低(75 mg/kg)剂量组,每组15只。除正常对照组外,其余各组大鼠均腹腔注射0.5%DMN溶液(1.5 m L/kg),隔天1次,连续8w。造模同时秋水仙碱组与狗肝菜多糖各组按剂量灌胃给药,正常对照组与模型组灌胃等体积蒸馏水,第8周末取血和收集肝脏。酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C和血清Hyp、NO含量;肝脏病理组织经Masson染色加以验证;Western blot检测肝组织MAPK信号通路中JNK、ERK、p38相关蛋白及相应磷酸化蛋白的表达情况。结果:与模型组比较,狗肝菜多糖能显著降低肝纤维化大鼠肝组织HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C及血清Hyp、NO含量,并能降低肝组织p-JNK、p-ERK、p-p38蛋白表达;Masson染色结果与之呈一致性。结论:狗肝菜多糖可抑制HF大鼠MAPK信号通路的活化,从而缓解或阻止HF的进程。

狗肝菜乙醇提取物的化学成分研究

目的:对狗肝菜Dicliptera chinensis全草的化学成分进行研究。方法:采用硅胶柱色谱和制备性薄层色谱及反相HPLC进行分离、纯化,UV,NMR和MS等方法进行结构鉴定。结果:从狗肝菜乙醇提取物的醋酸乙酯萃取部分得到7个化合物,分别鉴定为环八硫(1),开环异落叶松脂醇二甲醚二乙酸酯(2),5-甲氧基-4,4′-二氧甲基开环落叶松脂醇二乙酸酯(3),羟基华远志内酯甲醚(4),黑麦草内酯(5),β-谷甾醇葡萄糖苷(6),豆甾醇葡萄糖苷(7)。结论:除化合物6外,其他化合物皆为首次从该属植物中发现。

狗肝菜中多糖提取工艺的比较研究

目的建立狗肝菜多糖的最佳提取方法和工艺。方法分别选取微波法、超声波法和溶剂回流提取法制备狗肝菜多糖。采用水提醇沉法得到粗多糖,再用Sevag法脱蛋白后,依次采用乙醚、无水乙醇、丙酮洗涤纯化,得精制多糖。比较3种方法所得多糖产率和含量,从中筛选出最佳提取方法。采用最佳提取方法进行正交实验,以筛选出其最佳提取工艺。结果 3种方法得到的多糖产率和含量存在较大差异,其中微波法多糖产率为7.10%,含量为70.10%,超声波法多糖产率为4.66%,含量为61.42%,溶剂回流提取法多糖产率为9.15%,含量为87.90%。狗肝菜的最佳提取方法为溶剂回流提取法,提取工艺最佳为料液比1∶20,提取时间2h,提取2次,温度85℃。结论该提取方法和工艺适合于狗肝菜中多糖的提取。

狗肝菜多糖提取工艺研究

以狗肝菜为原料,用水浸提狗肝菜中的多糖。通过单因素试验和正交实验确定了最佳提取工艺条件。结果表明,影响多糖提取提取率的因素大小表现为固液比>提取温度>提取时间,最佳工艺条件为固液比1∶12、提取温度75℃、提取时间3 h,在此条件下狗肝菜多糖提取率为18.16%。

狗肝菜多糖P2B对CCl_4致L-02肝细胞损伤的保护作用

目的:探讨狗肝菜多糖(P2B)对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝L-02细胞损伤的保护作用。方法:培养人肝L-02细胞,建立CCl_4肝细胞损伤模型,分组实验:正常对照组、CCl_4损伤组和不同浓度的P2B(0.125、0.25和0.5 mg·ml^(-1))样品组。采用MTT法检测生化分析培养液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)以及细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果:与CCl_4损伤组相比,各P2B样品组细胞活力明显增强,上清液中ALT、AST活性明显降低;细胞内SOD明显升高、MDA含量降低。结论:P2B对CCl_4诱导的体外L-02肝细胞损伤均具有保护作用,随着浓度的增加,作用也随着增强,其机制可能与其抗氧化作用有关。

狗肝菜凉茶的研制

以狗肝菜为原料制备凉茶。用水浸提狗肝菜制备凉茶,并对其进行感官评价,采用分光光度法和硫酸-苯酚法测定黄酮和多糖含量。最佳工艺条件为浸提温度90℃,料液比1∶55(g/mL),浸提时间75 min,糖添加量0.7%。所制备的凉茶中黄酮含量为1.12 mg/100 mL,多糖含量为92.27 mg/100 mL,黄酮和多糖回收率较高。研制出的狗肝菜凉茶口感和谐、风味独特,具有较好的保健功能。

狗肝菜化学成分研究

目的研究狗肝菜的化学成分。方法对狗肝菜全草95%乙醇提取物的三氯甲烷萃取部分利用反复硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶层析进行分离,根据光谱数据和理化性质确定各化合物的结构。结果分离并鉴定了8个化合物,分别为正十八烷醇(1),乌苏酸(2),7-羟基香豆素(3),异土木香内酯(4),齐墩果酸(5),滨蒿内酯(6),薯蓣皂苷元(7)和β-谷甾醇(8)。结论化合物2、3、4、6和7为首次从该植物中分离得到。

狗肝菜多糖保肝作用研究

目的:观察狗肝菜多糖对实验性肝损伤动物血清丙氨酸转氨酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST)的影响。方法:建立CC l4致大鼠肝损伤模型及卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱发的小鼠免疫性肝损伤模型,测定动物血清和肝组织ALT、AST。结果:狗肝菜多糖能使肝损伤动物血清ALT、AST活性显著降低。结论:狗肝菜多糖具有保肝作用。