狗舌草黄酮类化合物对3种肿瘤细胞的药物敏感试验

用MTT法检测狗舌草黄酮类化合物对 3种不同肿瘤细胞的药物敏感试验表明 ,狗舌草黄酮类化合的不同浓度均对肝癌细胞Hep G2 不敏感 ;10 0 μg ml时对肝癌细胞HCC为中度敏感 ;在 10μg ml和 10 0μg ml时对淋巴性白血病细胞L1 2 1 0 分别为中度敏感和高度敏感 ,且半数致死浓度 (IC50 )为 7.75 6 μg ml。表明狗舌草黄酮类化合物对L1 2 1 0 有很强的抑制作用。

狗舌草生物碱成分分析

为了更好地评价狗舌草的药理活性和毒性,利用溶剂萃取法从狗舌草中得到总生物碱,通过色谱和波谱技术对总生物碱进行了分离和鉴定。从TLC及GC-MS判断,狗舌草中至少含有4个双稠吡咯啶生物碱(PAs),GC-MS确定化合物 ～ 分别为千里光宁、千里光非灵和全缘千里光碱。经柱层析和制备性TLC得化合物 ,MS,IR及13CNMR鉴定其为当归酰天芥菜定;化合物 水解产物之一经制备性TLC分离得化合物 ,MS鉴定为天芥菜定。这些化合物的存在说明狗舌草可能具有抗肿瘤活性,并提示其对肝脏的毒性不可忽视。

狗舌草抗淋巴性白血病有效部位的急性毒性

利用体重 19～ 2 2 g的 BAL B/ c-C雌性小鼠 ,通过腹腔注射 ,从急性半数致死量 L D50 和供试鼠的临床表现等方面 ,检查了狗舌草 60 %乙醇提取物冻干粉的急性毒性。结果发现 ,狗舌草 60 %乙醇提取物对雌性 BAL B/ c-C小鼠腹腔注射的 LD50 为 ( 791.2 2± 170 .17) mg/ kg,95 %可信限为 63 9.15～ 979.49m g/ kg。急性死亡小鼠 (剂量达到 3 3 6.11mg/ kg以上 )在死前表现四肢抽搐 ,盲目运动 ,呼吸急促 ,翘尾 ;未死亡的小鼠表现食欲减退 ,反应迟钝 ,在随后的长期饲养中 。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞毒作用研究

目的:研究狗舌草提取物对266细胞的细胞毒作用。方法:U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,用CCK-8试剂检测细胞毒作用。结果:狗舌草提取物对266细胞有细胞毒作用,半数抑制(质量)浓度约为3.2mg.L-1。结论:狗舌草提取物对266细胞有体外细胞毒作用。

狗舌草总黄酮的提取及其毒性试验

从狗舌草中提取分离到黄酮类化合物并测定其含量 ,用改良寇氏法测定总黄酮的小鼠LD50 为 ( 1392 52± 94 6 2 )mg/kg ,属于中等毒范围。初步表明其与临床牧区的狗舌草中毒病相关不大 ,可能与狗舌草的抗癌。

狗舌草提取物诱导L1210细胞的凋亡

以环磷酰胺、槲皮素和单猪屎豆碱为参照,观察狗舌草60%乙醇提取物体外对L1210细胞的凋亡形态变化的影响;利用流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双参数法,研究狗舌草60%乙醇提取物对L1210细胞早期凋亡的影响,探讨狗舌草60%乙醇提取物致L1210细胞凋亡的机理。结果发现,狗舌草60%乙醇提取物能使L1210细胞发生典型的细胞凋亡,形成凋亡小体;狗舌草60%乙醇提取物引起的AnnexinⅤ-FITC+/PI-细胞百分比为86.8%,能诱导L1210细胞发生早期凋亡。

狗舌草提取物的长期和蓄积毒性及特殊毒性研究

【目的】对狗舌草体积分数60%乙醇提取物的毒理学安全性进行评价。【方法】利用C57L-L小鼠,以生理盐水为阴性对照,环磷酰胺为阳性对照,进行狗舌草体积分数60%乙醇提取物的90 d长期毒性试验、30 d蓄积试验。并采用小鼠骨髓微核试验、小鼠生殖机能试验和小鼠胎儿外观畸形检查,对狗舌草体积分数60%乙醇提取物的长期毒性、蓄积毒性和特殊毒性进行评价。【结果】90 d长期毒性试验未见供试小鼠临床表现、体重和病理变化异常,30 d蓄积试验未见供试小鼠死亡,给药组与阴性对照组小鼠骨髓微核率无显著差异(P>0.05);与阴性对照组相比,用药后受孕鼠的受孕率、每窝活胎数、平均胎儿重、吸收胎儿数和死胎数均无明显变化(P>0.05),供试小鼠胎儿未见明显的外观畸形(P>0.05)。【结论】狗舌草体积分数60%乙醇提取物无长期毒性,无蓄积毒性,无致突变性和致畸胎性。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞株细胞凋亡的研究

目的:研究狗舌草提取物对U266细胞的细胞凋亡作用及其机制。方法:U266细胞株与狗舌草提取物共同培养,电镜观察细胞凋亡形态,DNA琼脂糖凝胶电泳观察凋亡条带。用流式细胞仪测定细胞周期及凋亡率。结果:狗舌草提取物作用U266细胞,电镜观察到细胞凋亡,DNA琼脂糖凝胶电泳出现凋亡条带,狗舌草提取物影响U266细胞周期,G0/G1期细胞减少,S期、G2/M期细胞增加,凋亡细胞增加,用Annexin V/PI染色流式细胞仪检测,均显示细胞凋亡与狗舌草提取物有剂量依赖关系。结论:体外实验证实,狗舌草提取物对266细胞有细胞凋亡作用,存在剂量依赖关系。

狗舌草提取物对L1210细胞的体外作用研究

利用淋巴性白血病L1 2 1 0细胞 ,以单猪屎豆碱、槲皮素和环磷酰胺为参照 ,检查狗舌草60 %乙醇提取物 (EX)对L1 2 1 0细胞生长情况的影响 ;通过L1 2 1 0细胞台盼蓝拒染率的测定 ,研究EX对L1 2 1 0细胞活力的影响。结果发现 ,一定剂量的EX、单猪屎豆碱、槲皮素和环磷酰胺具有明显的体外抑制淋巴性白血病L1 2 1 0细胞的作用 ,且这种作用具有明显的剂量依赖性。其中EX和槲皮素在体外对L1 2 1 0细胞的细胞毒性较小 ,而单猪屎豆碱在体外对L1 2 1 0细胞的细胞毒性较大。

猪狗舌草中毒的病理学研究

用质量分数为１０％的狗舌草饲料喂猪１４４ｄ，病理组织学特征变化为，肝脏出现巨肝细胞；肾脏近曲小管上皮细胞肿大，胞浆内陷；大脑神经细胞出现卫星化和噬神经现象，小脑浦肯野氏细胞肿胀，尼氏小体不清；心肌纤维颗粒变性，有的核变圆，淡染。透射电镜检查可见肝细胞核常染色质数量增加，异染色质边集，胞质内充满嵴溶解的线粒体，内质网及高尔基体消失；Ⅰ型肺泡上皮细胞核膜破裂；Ⅱ型肺泡上皮细胞游离端微绒毛增多，嗜锇性板层小体减少。

早花期和盛花期狗舌草中双稠吡咯啶生物碱对大白鼠的毒性试验

提取早花期和盛花期狗舌草中双稠吡咯啶生物碱（ＰＡｓ），分别按１００ｍｇ／ｋｇ给２组ＳＤ大白鼠腹腔注射。结果表明，２个时期狗舌草中ＰＡｓ对ＳＤ大白鼠均具有很强的肝毒性和一定的肺毒性及中枢神经毒性，以盛花期狗舌草中ＰＡｓ的毒性较弱；同时发现狗舌草对心、肾也具有一定的毒性作用。

狗舌草提取物对多发性骨髓瘤U266细胞周期的作用

中药狗舌草在世界范围内广泛分布,除了具有解痉、抗溃疡作用之外,对白血病细胞、恶性网状细胞肉瘤及皮肤癌有较强的抑制作用。其化学成分为生物碱。此前对狗舌草生物碱成分分析,对狗舌草化学成分及其抗淋巴性白血病效果进行试验,

狗舌草的化学成分研究

目的探讨狗舌草的化学成分。方法采用硅胶,RP-C_(18),Sephadex LH-20和高效液相色谱法等色谱方法对狗舌草进行分离、纯化,根据化合物的理化性质和波谱学方法对狗舌草化学成分进行结构鉴定。结果从狗舌草中分离得到6个化合物,分别鉴定为白杨素(chrysin,1),芹菜素(apigenin,2),山柰酚(kaempferol,3),金合欢素(acacetin,4),异鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(isorhamnetin-3-O-β-D-glucopyranoside,5),咖啡酸乙酯(caffeic acid ethyl ester,6)。结论 6个化合物均为首次从狗舌草属中分离得到。

狗舌草提取物诱导淋巴细胞性白血病L1210细胞分化的研究

以单猪屎豆碱(MO)、槲皮素(QU)和环磷酰胺(CY)为参照,观察了狗舌草600 mL/L乙醇提取物(EX)对淋巴细胞性白血病L1210细胞体外试验的形态变化;利用流式细胞术,从DNA分子水平上检查了EX对L1210细胞各周期相的影响,探讨EX对L1210细胞的分化机理。结果发现,EX能够使L1210细胞向淋巴细胞方向发展;经EX作用24 h后,L1210细胞G0+G1期的百分比较对照组明显升高。提示EX对L1210细胞增殖的抑制作用可能是由于G1期的阻滞所致。

狗舌草总黄酮对L_(1210)细胞的体外作用研究

目的:研究狗舌草总黄酮对L1210细胞体外生长和细胞周期的影响。方法:用细胞计数法绘制细胞生长曲线,用细胞平均倍增时间(mPDT)检测L1210细胞增殖速度,台盼蓝拒染率测定细胞存活率,流式细胞术分析细胞周期。结果:狗舌草总黄酮能抑制L1210细胞生长且呈浓度依赖性,对L1210细胞的增殖具有显著抑制作用。S期细胞数目显著增加,并引起S-G2阻滞,从而阻断细胞周期的正常发展。结论:狗舌草总黄酮对L1210细胞体外生长、增殖有抑制作用,对细胞周期有阻滞作用,显示一定的抗肿瘤活性。

狗舌草中毒猪血液中吡咯代谢物的测定

用含 10 %狗舌草的饲料喂猪 144d ,进行了血液S—吡咯测定。染毒后第 8～ 96d ,试验猪血液S—吡咯TLC呈现较为明显的淡紫色斑 ,Rf值在 0 5 6～ 0 78之间 ;在试验的第 8d ,试验猪血液S—吡咯光密度值达 0 0 89± 0 0 0 7OD单位 。

狗舌草挥发油化学成分GC-MS分析

采用水蒸气蒸馏法从狗舌草中提取挥发油,利用GC-MS联用仪对狗舌草挥发油的化学成分进行分析,共分离到29个组分,鉴定了其中的21个,占全油的72.41%,占挥发油总量的97.629%。狗舌草挥发油主要成分是(E)-7,11-二甲基-3-亚甲基-1,6,10-十二碳三烯(27.365%)、[3aS-(3aα,3bβ,4β,7α,7aS*)]-八氢-7-甲基-3-亚甲基-4-(1-甲基乙基)-1H-环戊[1,3]环丙[1,2]苯(25.254%)、2,6-二甲基-6-(4-甲基-3-戊烯基)-二环[3.1.1]庚-2-烯(18.362%)、石竹烯(10.272%)、α-金合欢烯(6.503%)等。

狗舌草中总黄酮的提取工艺研究

目的:研究狗舌草中总黄酮的提取工艺并测定总黄酮含量。方法:采用单因素和正交试验相结合的方法,对提取时间、提取温度、提取次数、料液比4个因素进行研究,并以芦丁为标准品,紫外分光光度法测定总黄酮含量。结果:狗舌草总黄酮的料液比,提取温度影响较大,提取时间、提取次数相对较小。结论:最佳提取工艺:提取温度80℃,料液比1:10,提取时间3h,提取次数2次。

狗舌草提取物体内抗L1210白血病效果的研究

建立淋巴性白血病L1210细胞荷瘤DBA/2小鼠模型,从荷瘤鼠T/C及腹围测定、荷瘤鼠腹水中L1210细胞形态观察、荷瘤鼠白细胞象检查和骨髓象检查几方面,检查狗舌草60%乙醇提取物在体内对淋巴性白血病的作用效果。发现狗舌草60%乙醇提取物与单猪屎豆碱和槲皮素在体内抑制淋巴性白血病方面具有一致性。