独正岗接骨膏对体外培养兔骨髓间充质干细胞成骨活性的影响

目的观察独正岗接骨膏对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨活性的影响。方法分离、培养兔骨髓间充质干细胞,选取生长良好第3代BMSCs分组培养。依据培养基中加入影响因子的不同分为4组:对照组,不加任何影响因子;独正岗接骨膏组,分别加入三种不同浓度独正岗接骨膏水提液(5%、10%、20%);Chordin干预组,分别于三种不同浓度独正岗接骨膏水提液(5%、10%、20%)中均加入Chordin (100μg/L)进行干预;Noggin干预组,分别于三种不同浓度独正岗接骨膏水提液(5%、10%、20%)中加入Noggin(100μg/L)进行干预。各组分别于培养第4、7、10天进行指标检测。采用MTT法测定各组BMSCs细胞相对数量;采用磷酸苯二钠法测定各组细胞ALP活性;采用Real-time PCR法检测各组细胞中BMP-2,7,9基因的表达情况。结果加药干预4、7 d后,与对照组相比,各组细胞均有明显增殖趋势(P <0.05),其中各组内10%浓度细胞增殖趋势显著高于同期5%、20%浓度(P <0.05),20%浓度细胞增殖趋势高于同组5%浓度(P <0.05);加药干预10 d后,各组细胞增殖趋势低于对照组(P <0.05);加药干预4、7、10 d后,除对照组外,各组细胞ALP活性、BMP-2,7,9基因表达量均在7 d时达到最高,随后开始下降(P <0.05);各组间比较,在各时间段(4、7、10 d),独正岗接骨膏组ALP活性、BMP-2,7,9基因表达量均高于同期Chordin干预组和Noggin干预组(P <0.05);结论独正岗接骨膏可能通过促进BMP的早期表达,促进BMSCs向OB分化,达到促进骨折愈合的作用。

HPLC法测定土家药独正岗中齐墩果酸的含量

目的:建立独正岗中齐墩果酸含量测定方法。方法:采用ypersilODS(200×4.6mm,5um)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液(67:33)为流动相;检测波长210nm;流速1mL/min;柱温30℃。结果:齐墩果酸在0.483ug-9.66ug范围内峰面积与进样量线性关系良好,r=0.9998,n=5;平均回收率为99.6%,RSD为0.84%,n=6。结论:该方法简便快速、结果准确可靠、可用于独正岗中齐墩果酸的含量测定。