独活香豆素对帕金森病模型大鼠抗氧化功能及谷氨酸含量的影响

目的研究独活香豆素对帕金森病(PD)模型大鼠抗氧化功能及兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)含量的影响。方法采用蛋白酶体抑制剂Lactacystin脑定位注射制备PD大鼠模型,测定模型大鼠血清、脑组织中丙二醛(MDA)、Glu水平、血清中总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性。结果独活香豆素能明显降低PD模型大鼠血清、脑组织中MDA、Glu的含量,提高血清中T-SOD的活性。结论抑制血清和脑组织脂质过氧化反应、提高抗氧化酶活性、降低血清和脑组织兴奋性氨基酸Glu含量可能是独活香豆素对抗PD的作用机制之一。

独活香豆素对Aβ所致神经元损伤的神经保护作用研究

目的:探究独活香豆素(TCA)对Aβ所致的小鼠海马神经元损伤的神经保护作用及其作用机理。方法:从胎鼠大脑海马中分离出神经元细胞,培养9 d待神经元成熟后将细胞分为正常组(control)、模型组(30 mmol/L Aβ孵育24 h)和给药组(经Aβ处理后给予不同浓度TCA处理的细胞)。MTT法和LDH法检测各组海马神经元的活性,RTPCR法检测环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA表达的变化,免疫组织化学染色法检测突触素-1(synapsin^(-1))、磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)和BDNF蛋白表达的变化。结果:孵育Aβ的海马神经元显现较强神经毒性。与模型组比较,TCA组明显增强神经细胞的存活能力,增加synapsin^(-1)的表达量,提高BDNF mRNA的表达,增强p-CREB和BDNF蛋白的表达。结论:TCA对Aβ所致的海马神经元损伤具有保护作用,此神经保护作用可能是与促进CREB的磷酸化使p-CREB表达增多,并刺激神经营养因子BDNF的生成增多有关。

独活香豆素组分对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响

目的观察独活香豆素组分(TCA)对戊巴比妥钠及巴比妥钠催眠作用的影响。方法将小鼠随机分为溶媒(5%吐温-80,20mL/kg)、氯霉素(25mg/kg)及TCA(50、100mg/kg)组,等容灌胃给药1h后,再腹腔注射戊巴比妥钠40mg/kg或巴比妥钠200mg/kg,观察催眠潜伏期和催眠时间。结果氯霉素和高、低剂量的TCA使戊巴比妥钠的催眠时间延长249.8%、171.1%和78.7%,均P<0.01;对巴比妥钠的催眠作用无明显影响。结论TCA对小鼠肝微粒体细胞色素P450具有一定的抑制作用。

独活香豆素对乳胞素诱导的帕金森病模型大鼠血清炎症因子的影响

目的：探讨独活香豆素对帕金森病模型大鼠血清炎症因子的影响。方法：利用乳胞素（Lactacystin）脑黑质致密部注射建立帕金森病（PD）大鼠模型,于第7、14、21、28天进行阿扑吗啡（APO）检测,根据大鼠行为学异常程度,应用分层随机法将模型复制的大鼠随机分为模型对照组、吐温80组、独活香豆素组、独活颗粒剂组、独活复方颗粒剂组、塞来昔布组、美多芭组7组。另设假手术组和正常对照组,假手术组脑黑质致密部注射等量生理盐水。正常对照组、假手术组、模型对照组用生理盐水灌胃,其他组大鼠同时间予以等体积相应药物灌胃,共10周。给药后第14、28、42、56、70天分别进行APO检测,观察记录其旋转行为异常、旋转方向、旋转圈数。在进行最后一次APO检测后的次日,每组随机取8只大鼠釆用ELISA方法检测其血清中IL-1α、IL-1β、IL-6及TNF-α的含量。结果：独活香豆素能改善PD模型大鼠行为学异常,降低血清IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子的异常升高。结论：独活香豆素有可能是通过降低大鼠血清IL-1α、IL-1β、IL-6、TNF-α炎症因子的表达,对PD起到保护作用。

独活和独活香豆素对帕金森病模型大鼠脑黑质CHOP和Caspase12表达的影响

目的:通过观察独活及独活香豆素对乳胞素(Lactacystin)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠脑黑质CHOP和Caspase12表达水平的影响,探讨其与内质网应激的关系。方法:利用乳胞素(Lactacystin)脑黑质致密部注射建立PD大鼠模型,于第7、14、21、28天进行阿扑吗啡(APO)检测,根据大鼠行为学异常程度,应用分层随机法将模型复制的大鼠随机分为模型对照组、吐温80组、独活香豆素组、独活颗粒剂组、独活复方颗粒剂组、塞来昔布组、美多芭组七组。另设假手术组和正常对照组,假手术组脑黑质致密部注射等量生理盐水。正常对照组、假手术组、模型对照组用生理盐水灌胃,其他组大鼠同时间予以等体积相应药物灌胃,共10周。给药后第14、28、42、56、70天分别进行APO检测,观察记录其旋转行为异常、旋转方向、旋转圈数。在进行最后一次APO检测后的次日,过量麻醉处死大鼠,断头,取左侧脑黑质,采用RT-PCR、Western-blot法,对大鼠脑黑质CHOP、Caspase12 mRNA及蛋白表达水平进行检测。结果:应用Lactacystin诱导的PD模型大鼠脑黑质CHOP和Caspase12的表达明显上调;予以药物干预后,独活香豆素、独活颗粒剂、独活复方颗粒剂、美多芭、塞来昔布组大鼠脑黑质CHOP和Caspase12的表达均有下降,以独活香豆素和或独活颗粒剂组最为显著。结论:独活和独活香豆素可能是通过抑制内质网应激对PD起到保护作用。

独活香豆素对Aβ25-35损伤神经元的保护作用及机制研究

目的:研究独活香豆素对β淀粉样蛋白(Aβ25-35)损伤神经元的保护作用及可能机制。方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化神经元,与Aβ25-35、不同浓度独活香豆素和丹酚酸B共同孵育24 h,用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶(LDH)测定法检测细胞存活率与LDH释放量,用Hoechst 33258染色检测Aβ25-35诱导的神经元凋亡,用RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Caspase-3 mRNA的表达量。结果:独活香豆素(10、50、100、150μg/ml)能明显提高Aβ25-35(30μM)损伤神经元的存活率,降低LDH释放量,抑制神经元凋亡,以浓度为100μg/ml时作用最显著,作用强度与丹酚酸B相当;独活香豆素能提高神经元Bcl-2 mR-NA、降低Caspase-3 mRNA的表达量。结论:独活香豆素对Aβ25-35损伤神经元具有保护作用,其机制可能与抑制促凋亡基因Caspase-3、促进抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达有关。

独活香豆素组分对兔体内茶碱药动学参数的影响

目的:观察独活香豆素组分(TCP)对茶碱在家兔体内药动学的影响。方法:家兔16只随机分为A、B2组,A组静注单剂量氨茶碱15mg.kg-1;B组灌胃给予TCP50mg.kg-1,qd×3,末次给药1h后再静注等量氨茶碱,用紫外分光光度法测定茶碱血清浓度。结果:A、B2组茶碱的K分别为0.184,0.123h-1;t1/2为3.784,5.640h;Vd为1.112,1.119L;CL为0.204,0.138L.h-1;AUC为179.111,265.079mg.h.L-1。结论:TCP能抑制茶碱在兔体内的代谢,使K降低,t1/2延长,AUC增大,CL下降。

独活香豆素对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用

目的 :探讨独活香豆素(total coumarine of Angelica pubescentis,TCA)处理对APP/PS1双转基因阿尔茨海默模型小鼠的神经保护作用。方法:将7月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、独活香豆素高(14.4 mg/kg)、中(7.2 mg/kg)、低剂量组(3.6 mg/kg),每组10只。药物处理后,采用HE染色、尼氏染色检测独活香豆素对阿尔茨海默模型小鼠脑内椎体细胞和尼氏体的影响,用免疫荧光组织化学法观察脑内神经元的变化,并采用Hoechst33258染色观察神经细胞凋亡。结果:病理学观察结果显示:独活香豆素(14.4 mg/kg)组较阿尔茨海默模型组的小鼠椎体细胞数增加(77.56±5.82个/mm2),并且尼氏体数量增加;免疫荧光组化结果显示独活香豆素(14.4 mg/kg)组小鼠脑内海马区中分子量神经丝蛋白荧光强度(83.25±10.74%)明显高于模型组(26.28±3.08%);同时,独活香豆素(14.4 mg/kg)组显著减少凋亡细胞数(14.08±3.27%)。结论:独活香豆素14.4 mg/kg能够减少阿尔茨海默模型小鼠脑内神经性损伤,是通过增强中分子量神经丝蛋白表达和减少细胞凋亡。

独活香豆素对Lactacystin诱导的帕金森病模型细胞炎症因子IL-1β、TNF-α的影响

目的观察独活香豆素对Lactacystin诱导的神经元样PC12细胞活性和炎症因子IL-1β、TNF-α的影响。方法制备含药血清,筛选含药血清和Lactacystin的作用浓度和时间,体外培养PC12细胞,建立Lactacystin诱导PC12细胞损伤的模型。实验分为五组,分别为正常对照组、模型组、吐温组、塞来昔布组、独活香豆素组。应用MTT法检测各组细胞活性。应用ELISA法检测IL-1β、TNF-α的蛋白含量。应用RT-PCR法检测IL-1β、TNF-α的mRNA表达。结果模型组与吐温80组之间无统计学差异。模型组经15%正常大鼠含药血清保护24h,5μmol/L Lactacystin处理24h后,细胞活力比正常对照组降低。独活香豆素组细胞OD值高于模型组、吐温80组和塞来昔布组,但低于正常对照组。模型组细胞上清液中IL-1β、TNF-α蛋白含量和细胞中IL-1β、TNF-αmRNA表达的减少。而独活香豆素组细胞上清液中IL-1β、TNF-α蛋白含量和细胞中IL-1β、TNF-αmRNA表达高于模型组、吐温80组和塞来昔布组,但低于正常对照组。结论独活香豆素含药血清对Lactacystin诱导的神经元样PC12细胞具有保护作用,与其下调细胞炎症因子IL-1β、TNF-α蛋白的含量和IL-1β、TNF-αmRNA的表达,抑制Lactacystin诱导的神经元样PC12细胞的炎症反应密切相关。