三氯苯达唑治疗斯氏狸殖吸虫病的初步观察

目的 观察三氯苯达唑对人体斯氏狸殖吸虫病的治疗作用。 方法 用三氯苯达唑治疗 4例斯氏狸殖吸虫病患者 ,随访 6～ 10个月 ,观察患者的症状、体征和胸部X线表现及嗜酸性粒细胞等的变化情况。 结果 经治疗后 ,全部患者的症状如皮下游走性包块与体征及胸部X线表现 ,肺部浸润及胸腔积液均消失 ,嗜酸性粒细胞恢复正常。患者服药过程中及随访时均未出现任何不良反应。 结论 三氯苯达唑治疗斯氏狸殖吸虫病具有疗效好、疗程短、耐受性极好的优点。

大剂量吡喹酮治疗脑脊髓型斯氏狸殖吸虫病的疗效观察

目的观察大剂量吡喹酮对人脑脊髓型斯氏狸殖吸虫病的治疗作用。方法用吡喹酮治疗24例脑脊髓型斯氏狸殖吸虫病患者，随访6—12个月，观察患者中枢神经系统症状体征及周围血嗜酸性粒细胞的变化情况。结果经治疗后，全部患者的中枢神经系统症状体征均已消失，周围血嗜酸性粒细胞恢复正常。患者服药期间及随访过程中均未出现明显的不良反应。结论大剂量吡喹酮治疗脑脊髓型斯氏狸殖吸虫病具有疗效好、疗程短、耐受性好的优点。

斯氏狸殖吸虫动物模型的研究

斯氏狸殖吸虫囊蚴经口感染家兔、小鼠、豚鼠和大鼠,25～120d分期解剖。重点观察肺部虫囊有无成虫及虫卵,以寻求适宜的宿主作为斯氏狸殖吸虫的实验动物。检查结果家兔、小鼠和豚鼠在接种后死亡甚多。均未查到成虫,仅见童虫。接种38只大鼠,感染60d即在肺部出现虫囊;感染90d及110d的肺部虫囊检出童虫及少部分成虫;感染120d时,87.5％虫体成熟,且成虫及卵的形态与感染犬体的斯氏狸殖吸虫的形态相似。提示大鼠是建立斯氏狸殖吸虫动物模型的理想动物。

斯氏狸殖吸虫豚鼠动物模型的建立

以斯氏狸殖吸虫囊蚴感染实验动物豚鼠,不同时期分别解剖观察虫体发育分布及检出情况,结果在豚鼠体腔、肝、肺及肌肉等部分闰均能查到童虫,未见成虫及虫卵。初步证实豚鼠是斯氏狸殖吸虫的转续宿主,可以用于斯氏狸殖吸虫实验动物模型研究。

犬体内斯氏狸殖吸虫多部位寄生及其损害

斯氏狸殖吸虫囊蚴经口感染犬 4 0 d,从体腔、肝、肺、肌肉等部位检出发育不同程度的童虫 ;6 0 d时 ,在肝 ,肺等处有虫囊形成 ;90 d后 ,所有虫囊中检出虫体均发育成熟。结果表明 ,斯氏狸殖吸虫在犬体内多部位寄生并产生不同程度损害。

三氯苯达唑治疗大鼠斯氏狸殖吸虫感染的实验观察

目的：观察三氯苯达唑对大鼠斯氏狸殖吸虫感染的治疗效果。方法：从四川威远县和重庆万盛区采集的溪蟹中分离斯氏狸殖吸虫囊蚴，腹腔内注射感染大鼠。感染后１月和２月分别用总剂量为３００ｍｇ／ｋｇ，２ｄ分服，４５０ｍｇ／ｋｇ，３ｄ分服和６００ｍｇ／ｋｇ，３ｄ分服的三氯苯达唑治疗。结果：治后１月解剖，活虫减少率依次为５０％、８０％和８７％，并在肌肉、肝脏、腹腔、胸腔和肺部均发现虫体明著缩小（约１．５ｍｍ）呈灰白色的死虫。对照组大鼠肺部可见较大的黑色虫囊，内含活的成虫及虫卵。治疗组大鼠肺部虫囊大多数萎缩，成为出血及坏死性病灶。结论：三氯苯达唑对斯氏狸殖吸虫有良好的杀虫作用。

斯氏狸殖吸虫抗原分析和血清学诊断方法的研究

[目的 ]分析斯氏狸殖吸虫囊蚴、童虫和成虫各期抗原和建立特异性抗原的斯氏狸殖吸虫病血清学诊断方法。 [方法 ]用SDS PAGE分离斯氏狸殖吸虫的各虫期抗原 ,经免疫印迹识别成虫期特异性诊断抗原。采用电洗脱技术分离 10～ 30kDa蛋白组分 ,建立纯化抗原的dot ELISA血清学诊断斯氏狸殖吸虫病。 [结果 ]斯氏狸殖吸虫病患者血清与成虫抗原的 10～ 30kDa显示较多免疫识别带 ,主带为 2 2、2 4和 2 6kDa。与血吸虫病和华支睾吸虫病患者血清的交叉反应带出现于 6 0～ 90kDa。斯氏狸殖吸虫成虫 10～ 30kDa抗原的dot ELISA与成虫粗抗原的ELISA检测 2 8例疑诊病人血清 ,两法阳性率间差异无显著性。而检测 38例感染其它吸虫和肺部疾病患者血清 ,粗抗原的ELISA交叉反应率为 13 2 % (5 /38)。 [结论 ]斯氏狸殖吸虫成虫 10～ 30kDa抗原的dot ELISA为斯氏狸殖吸虫病高度特异和敏感的血清学诊断方法。

斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA诊断肺吸虫病研究

目的 探索斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的免疫诊断价值。方法 采用斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot-ELISA检测 2 8例斯氏狸殖吸虫病人血清、6份日本血吸虫病人血清、4份华支睾吸虫病人血清、2 0份健康人血清中抗斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原的抗体IgG。结果 斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原与 2 8例斯氏狸殖吸虫病人血清均呈阳性反应 ,与其它 2种吸虫病和健康人血清未发生反应。结论 斯氏狸殖吸虫幼虫排泄分泌抗原Dot -ELISA为诊断肺吸虫病敏感。

免疫组化技术对斯氏狸殖吸虫成虫免疫诊断相关抗原的初步研究

目的初步分析斯氏狸殖吸虫成虫表膜和肠相关抗原,探讨肺吸虫病的免疫诊断的特异性诊断抗原。方法斯氏狸殖吸虫成虫制备成15μm的冰冻切片,肺吸虫患者血清识别斯氏狸殖吸虫成虫特异性抗原,采用免疫金标记和免疫酶标记检测技术对抗原进行定位,激光共聚焦显微镜技术进行半定量分析以及免疫透射电镜对其细微结构的观察。分实验组和对照组。结果肺吸虫患者血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原定位于虫体的表膜和肠腔,表膜抗原半定量分析平均灰度值为80.65,肠腔抗原半定量分析平均灰度值为71.26,电镜下可见胶体金附着于肠腔和表膜的双层结构。结论肺吸虫患者血清识别的斯氏狸殖吸虫成虫抗原都为表膜相关抗原和肠相关抗原,因此与肺吸虫病免疫诊断相关的诊断抗原为虫体表膜和肠上皮产生的相关蛋白。

斯氏狸殖吸虫病53例临床资料分析

目的探讨食源性斯氏狸殖吸虫病的流行病学特征、临床表现及误诊的原因。方法回顾性分析2003-2006年53例住院治疗的斯氏狸殖吸虫病的临床资料。结果53例斯氏狸殖吸虫病患者中,城镇居民占54.7%(29/53),儿童占83%(44/53),主要因生食或半生食溪蟹和生饮溪水而感染。临床表现复杂多样,以胸肺型和脑型为主,嗜酸性粒细胞增多者占62.3%(33/53),痰、粪检查均未发现虫卵,皮下包块活检后病理检查主要表现为嗜酸性肉芽肿和隧道样改变,误诊率达41.5%。吡喹酮治疗取得较好疗效。结论斯氏狸殖吸虫病流行呈"城镇"化态势,临床医生应提高对斯氏狸殖吸虫病的认识。吡喹酮可作为斯氏狸殖吸虫病治疗首选药物,而预防本病的关键措施是加强健康教育工作,不生食或半生食溪蟹。

斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段的克隆和序列分析

目的 克隆斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,获得其序列 ,并进行序列分析。方法 利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏狸殖吸虫囊蚴半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。结果 RT PCR扩增出了一 5 0 0bp左右的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 498bp。推导出的氨基酸序列长 166;氨基酸序列的同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着很高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。

斯氏狸殖吸虫中间宿主及其孳生环境的调查研究

目的 :湖北十堰地区生态环境对斯氏狸殖吸虫中间宿主孳生的影响 ,分析本地肺吸虫病流行趋势。方法 :观察不同温度、雨量、植被、人类行为对中间宿主孳生环境的影响 ,剖解不同动物 ,检查自然感染情况。结果 :自然因素、特别是人类的行为对肺吸虫中间宿主的孳生有较大的影响。野生动物作为保虫宿主可能为频繁活动的中小型动物 ,对肺吸虫病的流行具有实际意义。结论 :十堰地区作为斯氏肺吸虫病的流行区 ,区域生态环境类型基本相同。作为南水北调中线工程的水源区 ,随着南水北调中线工程的启动 ,实施退耕还林 ,防止水土流失 ,区域生态环境将得到进一步改善 ,肺吸虫病的疫源地也将会长期存在 ,加强宣传教育是预防和控制本地肺吸虫病的有效措施。

六地卫氏并殖吸虫及斯氏狸殖吸虫种间和种内虫体重复DNA序列的比较

从湖南、广东两省六地采集卫氏并殖吸虫和斯氏狸殖吸虫,分别制备各地虫体基因组DNA,用 BamHI、HaeⅢ及 HindⅢ 3种限制性内切酶消化,琼酯糖凝胶电泳后,比较酶切片段长度。结果显示两种虫种间重复 DNA序列带型有明显的差异,而同种虫种不同地区虫体的重复 DNA序列带型则多数相同或完全相同。

鄂西北斯氏狸殖吸虫生态学及动物宿主感染的调查研究

目的 调查鄂西北斯氏狸殖吸虫生态环境及其动物宿主感染情况 方法 观察不同温度、雨量、植被、人类行动对中间宿主孳生环境的影响 ,解剖不同动物 ,检查动物体内斯氏狸殖吸虫的自然感染情况。 结果 共调查第二中间宿主华溪蟹的感染率为 5 3 1% ;用从华溪蟹体内分离出的囊感染家犬、大白兔、小白兔和豚鼠后 ,从豚鼠中查出囊虫 ;小白兔感染数日后死亡 ;大白兔感染 12 2d后查到成虫和虫卵 ;家犬感染 3 0d后查到童虫 ,90d后感染率达10 0 %。家猫、家犬的自然感染率分别为 5 6 2 5 % ( 18 3 2 )和 14 2 9% ( 1 7) ,并从家犬的肺中检出成虫。 结论 人类的行为对肺吸虫中间宿主的孳生有较大的影响 ,中间宿主孳生地的生态环境的变化 ,导致华溪蟹的感染率明显下降。该地区肺吸虫中间宿主的孳生有较大的影响 ,中间宿主孳生地的生态环境的变化 ,导致华溪蟹的感染率明显下降。该地区肺吸虫病除在野生动物中流行外 ,家养动物的自然感染率也较高 ,可能是斯氏狸殖吸虫的终宿主。

斯氏狸殖吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆及由体定位

目的 克隆斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,并研究该酶在斯氏狸殖吸虫的表达部位。方法 通过RT-PCR方法扩增斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,TA克隆入pUCm-T载体,鉴定、测序;利用DNASIS程序推导其编码氨基酸序列,并比较分析与其相关虫种半胱氨酸蛋白酶氨基酸序列同源性。采用地高辛标记原位杂交技术检测该酶基因在斯氏狸殖吸虫成虫的表达及组织定位。结果 经RT-PCR和对阳性克隆鉴定、测序后获得一cDNA序列,长495bp;同源性分析结果显示,该序列与相关虫种的半胱氨酸蛋白酶存在较高同源性,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。原位杂交结果显示斯氏狸殖吸虫成虫的肠管上皮呈阳性着色。结论 克隆获得了斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,该片段包含了与半胱氨酸蛋白酶活性和空间结构相关的重要基因位点。斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶的表达部位主要为肠管上皮。

鄂西北斯氏狸殖吸虫中间宿主生态学的研究

目的调查分析鄂西北生态环境对斯氏狸殖吸虫中间宿主密度和感染度的影响.方法定期对中间宿主孳生环境和中间宿主的密度观察,并解剖检查中间宿主自然感染情况. 结果斯氏狸殖吸虫第一中间宿主拟钉螺和第二中间宿主华溪蟹的密度受水温、气温和雨量影响明显,5～10月螺与蟹的密度达高峰,其密度螺为95,蟹为22.11月至次年3月螺与蟹密度最低,皆不易捕捉.结论鄂西北是斯氏狸殖吸虫病的流行区,中间宿主孳生环境的改变对该地区斯氏狸殖吸虫病的流行有重要意义.