瑞香狼毒根中狼毒色原酮对朱砂叶螨的触杀毒性

【目的】为了研究瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)根的杀螨活性物质基础。【方法】采用多种色谱技术从瑞香狼毒根部萃取物中的乙酸乙酯部分分离到1个黄酮类化合物,利用核磁共振技术和质谱对其进行结构鉴定,并采用玻片浸渍法测定其对朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus B.)的触杀毒性。【结果】确定了其化学结构为狼毒色原酮(1)。其对朱砂叶螨的半致死浓度(LC50)为3.53 mg/m L。【结论】与阳性对照药克螨特LC50的0.86 mg/m L相比,其杀螨活性中等偏弱,作为主成分之一的狼毒色原酮具有杀螨活性,这一结果对于瑞香狼毒杀螨剂的进一步开发具有积极意义。

瑞香亭与狼毒色原酮对昆虫的拒食和胃毒作用

采用叶碟法和夹碟法两种方法,分别就瑞香亭(daphnoritin)和狼毒色原酮(chmechromone)两种化合物对菜粉蝶(Pieris rapae L.)5龄幼虫的拒食作用和胃毒作用进行了测定.结果表明:瑞香亭与狼毒色原酮两者都有较强的拒食作用和胃毒作用.瑞香亭的拒食作用和胃毒作用比狼毒色原酮强,并随着时间的增加,两种化合物的拒食作用和胃毒作用增强.

瑞香亭和狼毒色原酮对昆虫酯酶同工酶的影响

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析法,就瑞香亭(daphnoretin)和狼毒色原酮(chamechromone)对菜粉蝶(Pieris rapae L.)5龄幼虫处理24 h后的酯酶同工酶进行了测定.结果表明:瑞香亭和狼毒色原酮对菜粉蝶5龄幼虫的酯酶同工酶有较大的影响,即部分酶带被削弱,部分酶带被加强,还产生新酶带.

瑞香狼毒药材中伞形花内酯和狼毒色原酮含量的高效液相色谱法测定

目的建立RP-HPLC法测定瑞香狼毒药材中伞形花内酯和狼毒色原酮的含量。方法采用反相高效液相色谱法,PDA检测器,选用Hypersil GOLDaQ-C_(18)(250mm×4.6mm,5μm),色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),进行梯度洗脱;检测波长伞形花内酯为327 nm,狼毒色原酮为297nm;流速1.0ml/min;进样量10μl,柱温25℃。结果2种活性成分在13 min内实现良好分离,伞形花内酯、狼毒色原酮的线性范围分别为1.22~19.6μg·ml^(-1)(r=0.9998)、20.0~320μg·ml^(-1)(r=0.9997),平均回收率分别为100.5%,101.8%,RSD分别为1.2%,1.5%。13批不同产地瑞香狼毒药材中伞形花内酯的含量范围为:0~0.57mg/g;狼毒色原酮的含量范围6.46~30.92mg/g。结论该方法操作简便、重现性好、结果准确可靠,可用于中药瑞香狼毒的质量控制。

超高效液相色谱法同时测定瑞香狼毒中伞形花内酯和狼毒色原酮的含量

目的:建立超高效液相色谱(UPLC)法测定瑞香狼毒药材中伞形花内酯和狼毒色原酮的含量。方法:超高效液相色谱法,Waters BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B),进行梯度洗脱;检测波长伞形花内酯为327 nm,狼毒色原酮为297 nm;流速0.3 mL·min^(-1);进样量2μL,柱温25℃。结果:伞形花内酯、狼毒色原酮的线性范围分别为0.74~19.64μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、14.70~352.8μg·mL^(-1)(r=0.999 8),平均回收率分别为99.20%,99.63%,RSD分别为1.81%,1.65%。13批瑞香狼毒药材中伞形花内酯的含量范围为0~0.602 mg·g^(-1),狼毒色原酮的含量范围6.08~33.37 mg·g^(-1)。结论:该方法操作简便、快速、重复性好、结果准确可靠,可用于中药瑞香狼毒的质量控制。

高效液相色谱-质谱法测定大鼠尿、粪便中狼毒色原酮的含量及其排泄研究

目的建立大鼠尿、粪便中狼毒色原酮含量测定的方法，并考察其排泄特征。方法采用高效液相色谱．质谱联用法测定给药后大鼠尿、粪中狼毒色原酮的含量，分别计算狼毒色原酮在尿、粪便中的累积排泄量及排泄率。色谱条件：XbridgeTM C18（2．1min×50mm，3．5μm，Waters柱，流动相为0．1％甲酸甲醇-0．1％甲酸水溶液梯度洗脱，流速0．4mL·min～，电喷雾型质谱检测器，采用MRM方式同时进行测定；用于定量分析的离子反应分别为：狼毒色原酮（m／z543．3→198．9），瑞舒伐他汀（m／z481．9～＋258．3）。结果在8～6400ng·mL“狼毒色原酮在尿液和粪便复溶液中线性良好（r2≥0．9995，n=5），最低检测限为4ng·mL-1。低、中、高浓度的质控样品日内、日间精密度和准确度均符合要求。灌胃给予狼毒色原酮后48h的尿、粪便中累积排泄率分别为（1．84±0．290）％、（41．5±6．917）％。结论所建立的分析方法准确、灵敏、快速，符合生物样品分析要求，适用于粪便、尿液中狼毒色原酮的分析。排泄实验结果表明，粪便是狼毒色原酮的最主要的排泄方式。

高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定瑞香狼毒5种黄酮类成分的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)梯度洗脱方法同时测定瑞香狼毒中狼毒色原酮、新狼毒素A、狼毒素、异狼毒素及7-甲氧基新狼毒素A 5种黄酮类成分的含量。方法采用HPLC-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)法,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18 (3.0 mm×100 mm,3.5μm);流动相A为0.1%甲酸水溶液,流动相B为纯乙腈,洗脱梯度为0~6 min 20%B、6~10 min 20%~35%B、10~50 min 35%B;流速为0.4 mL/min;平衡时间设置为10 min;采集时间为50 min;柱温为25℃;DAD检测波长为290 nm;进样量为5μL。结果狼毒色原酮、新狼毒素A、狼毒素、异狼毒素及7-甲氧基新狼毒素A在该条件下分离良好,分别在4.680~468.0、2.016~201.6、3.784~378.4、5.520~552.0、0.974~97.40μg/mL浓度范围内线性关系良好,且其精密度、稳定性、重复性和回收率均良好。结论 HPLC-DAD法稳定性、重复性好,可用于测定瑞香狼毒中狼毒色原酮、新狼毒素A、狼毒素、异狼毒素及7-甲氧基新狼毒素A 5种黄酮类成分的含量。

瑞香狼毒中抑制植物病原真菌活性物质研究

以草莓灰葡萄孢霉、辣椒炭疽病菌、桃褐腐病菌、棉花红腐病菌、马铃薯干腐病菌植物病原真菌为试材,采用适于大规模分离抑菌活性物质的大孔树脂等分离技术从瑞香狼毒根中分离抑菌活性物质,并确定了瑞香狼毒根部抑菌活性物质提取工艺。结果表明:瑞香狼毒根宜用乙醇浸提法获得粗提浸膏,再用乙酸乙酯进一步萃取,随后用大孔树脂进一步分离,得到的组分9对灰葡萄孢霉等有较好的抑菌效果(半抑制浓度(IC50)值为0.39mg/mL)。核磁鉴定组分9的主成分为狼毒色原酮,抑菌活性测定结果表明狼毒色原酮对草莓灰葡萄孢霉、桃褐腐病菌和辣椒炭疽病菌等均有较好的抑菌效果。

瑞香狼毒根的抑菌活性成分研究(Ⅱ)

采用生物活性跟踪法 ,首次从瑞香狼毒根中分离出两个具有广谱性杀菌活性的物质 ,通过波谱分析分别鉴定为新狼毒素 B和狼毒色原酮 .生测结果表明 ,两个化合物在 2 2 0 0 m g· L- 1浓度对苹果干腐病菌、小麦赤霉病菌、蕃茄早疫病菌、南瓜枯萎病菌、玉米大斑病菌。

瑞香狼毒杀虫活性成分的提取与分离（Ⅰ）

以莱粉蝶（Pieris rapae L.)5齿幼虫为度虫，进行生物活性跟踪。采用浸提、萃取、层析等多种方法，从瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)根中分离出3种活性成分单体。通过物质结构的四大谱（IR,UV,NMR,MS)鉴定，它们分别为伞形花内酯、瑞香亭和狼毒色原酮。

瑞香狼毒杀虫活性成分对昆虫生理生化的影响

采用生理生化技术，就β－谷甾醇、瑞香亭以及狼毒色原酮3种化合物对菜粉蝶5龄幼虫生理生化的指标进行了测定。结果表明：在整体糖原含量而言，β－谷甾醇提高了其含量，狼毒色原酮降低了其含量，瑞香亭对其无显著影响；就血淋巴糖含量而言，β－谷甾醇与瑞香亭提高了其含量；狼毒色原酮对其无显著影响；就蛋白质含量而言，β－谷甾醇、瑞香亭以及狼毒色原酮都降低了其含量；就中肠的酯酶活力而言，β－谷甾醇与狼毒色原酮提高了其活力，而瑞香亭降低了其活力。

瑞香狼毒杀虫活性成分的提取与分离

以菜粉蝶(Pieris rapae L.)5龄幼虫为试虫,进行生物活性跟踪;采用浸提、萃取、层析等多种方法,从瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)根中分离出3种活性成分单体,并通过物质结构的四大谱(IR,UV,NMR,MS)鉴定,它们分别为伞形花内酯、瑞香亭和狼毒色原酮.

β—谷甾醇等化合物对昆虫整体糖原含量的影响

采用“蒽酮法”，就β－谷甾醇（β－sitosterol）、瑞香亭（daphnoritin）以及狼毒色原酮（chamechromone）3种化合物对菜粉蝶（Pieris rapae L.）5龄幼虫整体糖原含量进行了测定。结果表明：24h后，β－谷甾醇对其整体糖原影响最明显；48h后，β－谷甾醇与狼毒色原酮对其影响最明显。

瑞香亭等化合物对昆虫的生物活性测定

采用叶碟法,用瑞香亭(daphnoritin)、伞形花内酯(7-hydro-coumarin)和狼毒色原酮(chamechromone)3种化合物对菜粉蝶(Pieris rapae L.)5龄幼虫处理1d和2d后的拒食作用和7d后死亡率进行了测定.结果表明:瑞香亭、伞形花内酯和狼毒色原酮对菜粉蝶5龄幼虫都具有较强的生物活性,且随着时间的延长,其生物活性增强.瑞香亭对菜粉蝶5龄幼虫的生物活性与伞形花内酯的生物活性相当,且狼毒色原酮的生物活性最低.

β—谷甾醇等化合物对昆虫中肠酯酶活力的影响

采用生物化学方法，就β－谷甾醇（β－ｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ）、瑞香亭（ｄａｐｈｎｏｒｉｔｉｎ）以及狼毒色原酮（ｃｈａｍｅｃｈｒｏｍｏｎｅ）３种化合物对菜粉蝶（Ｐｉｅｒｉｓ ｒａｐａｅ Ｌ．）５龄幼虫中肠酯酶活性的影响进行了测定。结果表明：处理７２ｈ后，β－谷甾醇３种化合物都明显降低了幼虫中肠酯酶活力。