一株拮抗猕猴桃叶枯病的美丽短芽孢杆菌NF2的He-Ne激光诱变育种

对一株拮抗猕猴桃叶枯病的美丽短芽孢杆菌NF2进行He-Ne激光诱变育种,通过测定菌株的生长曲线确定诱变时的菌龄为摇瓶培养8h,此时菌体没有产芽孢;分别设置不同的诱变强度和时间,确定最佳的诱变条件为5mW,10min,此时菌株的拮抗效果提高了20.63%;SPSS软件分析诱变后菌株拮抗能力可稳定遗传至少15代。He-Ne激光诱变是一种安全有效的微生物育种技术,低剂量激光辐射更有利于菌株诱变效果的提高。

猕猴桃叶枯病病原菌广谱拮抗菌株的筛选与鉴定

为筛选获得对猕猴桃叶枯病病原菌具有拮抗作用的菌株,以病原菌Pseudomonas syringae pv.Syringae为靶标,采用抑菌圈法和牛津杯法从猕猴桃根际分离筛选出3株具有拮抗作用、且抑菌谱较广的拮抗菌株MX3-11、TJKB-24和NF2。菌体细胞显微镜观察、菌落形态描述及生理生化实验的结果显示,这3株菌的表型和生理特征与美丽短芽孢杆菌高度一致。16S rDNA序列分析及系统进化分析结果表明,这3株菌的核酸序列与美丽短芽孢杆菌的同源性为100%,综合实验结果最终鉴定菌株MX3-11、TJKB-24和NF2均为美丽短芽孢杆菌(Brevibacillus formosus)。

猕猴桃细菌性叶枯病生防芽孢杆菌筛选及田间防效

从猕猴桃大田根际土壤和青海牦牛粪中分离到86株芽孢杆菌。平板对峙试验发现其中8个菌株对猕猴桃细菌性叶枯病病原菌Pseudomonas syringae var. syringae的拮抗性能明显。经管碟法复筛,得到2株对病原菌具有显著拮抗作用的芽孢杆菌M24和Q13。田间试验表明,发酵液(109cfu/ml)稀释100倍时喷施,菌株M24和Q13对猕猴桃细菌性叶枯病的防效分别达到85.9%和80.6%,均显著高于95%CT杀菌剂的60.5%防效。2个菌株均具有良好的田间应用潜力。

芽胞杆菌Q13和Q14在猕猴桃叶面的定殖及其对叶面菌群的影响

为了进一步明确芽胞杆菌Q13、Q14菌株对猕猴桃叶枯病的生防作用,分别对芽胞杆菌Q13、Q14菌株在猕猴桃叶面上的定殖作用及其对叶面其他微生物种类和数量的影响进行了考察。结果表明,在田间条件下,芽胞杆菌Q13、Q14能在猕猴桃叶面定殖,但随时间的变化呈下降趋势;在无降雨等恶劣天气影响的情况下,该菌能在猕猴桃叶面有效定殖8 d左右,8 d后叶面检测到的Q13、Q14菌株的菌量为4.5×106cfu/g成熟叶。与未喷施菌剂的猕猴桃叶面菌群对比,喷施菌剂后的猕猴桃叶面细菌种类多了芽胞杆菌属(Bacillus subtilis),少了条件致病菌不动杆菌属(Acinetobacter soli);真菌在数量上癣囊腔菌(Plectosphaerellacucumerina)、Pseudozyma flocculosa和米曲霉菌(Aspergillus oryzae)增加了,泡状莫氏黑粉菌(Moesziomyces bullatus)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)减少了。

枯草芽孢杆菌ZM12菌株抗菌物质初步研究

对生防菌株ZM12发酵滤液的抑菌作用机理进行初步探索。盆栽试验结果表明该菌株的发酵滤液对猕猴桃细菌性叶枯病菌具有较强的保护作用;田间试验结果表明发酵滤液稀释100倍喷施时,其防效可达85.2%,显著高于95%CT杀菌剂的防效(64.8%)。同时,施药后植株SOD和POD酶活性都有明显趋势变化,先迅速增强,保持一段时间的高活性后缓慢下降。此外还对该菌株的发酵滤液稳定性和作用机理进行初步探索,试验结果表明菌株的发酵滤液具有耐热、耐酸、耐储藏性,但在强碱性条件下其抑菌活性降低较多。