山梨猕猴桃根提取物抗肿瘤作用的机制研究

目的:探讨山梨猕猴桃根提取物活性成分(单体R6,R8)的抗肿瘤作用机制。方法:采用原位免疫组化(Tunel)法、瑞氏和姬姆萨混染法、Hoechst 33258-PI双染色法,随机分为对照组和R6,R8给药组,给药组分别给予0.05,0.05 g.L-1药物,观察R6,R8对人胃癌细胞株(SGC7901)肿瘤细胞凋亡的影响;用药72 h后,应用流式细胞分析术(FCM)法观察R6,R8对肿瘤细胞凋亡的影响;应用Comet(彗星)琼脂糖单细胞电泳法,观察R6,R8对肿瘤细胞DNA损伤的影响,探讨其抗肿瘤作用机制。结果:Tunel法24,48,72 h R6,R8细胞凋亡率分别为(17.08±2.78)%,(29.68±2.96)%,(52.46±3.81)%;(14.75±2.14)%,(27.35±3.79)%,(45.64±5.24)%,明显高于对照组(1.94±1.55)%,(2.78±1.84)%,(11.8±2.79)%(P<0.01),瑞氏和姬姆萨混染法、Hoechst33258-PI双染色法和FCM法均可检测到R6,R8可诱导细胞凋亡,与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.01);彗星琼脂糖单细胞电泳法显示R6,R8可导致肿瘤细胞的DNA损伤,与阴性对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:R6,R8体外抗SGC7901的作用机制可能通过引起DNA损伤、促进细胞凋亡有关。

山梨猕猴桃根提取物抗肿瘤活性研究

目的从山梨猕猴桃根中筛选抗肿瘤活性成分。方法采用MTT法、细胞集落形成法筛选山梨猕猴桃根提取物的抗肿瘤活性成分。结果山梨猕猴桃根提取物用集落形成法R6,R8对胃癌细胞株SGC7901、白血病细胞株L1210、神经性肿瘤细胞株NG108-15、肝癌细胞株Bele7404的增殖有抑制作用;用MTT法对NG108-15,SGC7901的增殖有抑制作用。山梨猕猴桃根两种提取物(R6,R8)对脾淋巴细胞没有免疫毒性。结论山梨猕猴桃根提物R6,R8有抗肿瘤活性。

猕猴桃根提取物体外抗氧化活性研究

[目的]探讨猕猴桃根提取物的体外抗氧化作用。[方法]采用DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢和还原力反应体系,测定猕猴桃根提取物的体外抗氧化作用,并用维生素C进行对照试验。[结果]试验条件下,ERHM对DPPH自由基、超氧阴离子(O2-.)、羟基自由基(.OH)、过氧化氢(H2O2)等均有较强的清除或抑制作用,且显示较好的量效关系,同时具有一定的还原力。其消除DPPH自由基的EC50为8.03μg/ml,清除超氧阴离子(O 2-.)的EC50为1.28 mg/ml,抑制羟基自由基(.OH)能力可达69.4%,浓度为100μg/ml时,对过氧化氢(H2O2)的清除率为42%。[结论]猕猴桃根提取物具有较强的还原力,能有效清除DPPH和超氧阴离子自由基,并抑制羟基自由基的产生。所以,ERHM有效成分具有较为显著的抗氧化作用。

猕猴桃根提取物体外抗氧化作用的研究

探讨猕猴桃根提取物的体外抗氧化作用。采用DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基、过氧化氢和还原力的反应体系,测定猕猴桃根提取物的体外抗氧化作用,并用VC进行对照实验。实验条件下,ERHM对DPPH自由基、超氧阴离子(.O2-)、羟基自由基(.OH)、过氧化氢H2O2等均有较强的清除或抑制作用,且显示较好的量效关系,同时具有一定的还原力。其消除DPPH自由基的EC50为8.03μg/mL,清除超氧阴离子(.O2-)的EC50为1.28 mg/mL,抑制羟基自由基(.OH)能力可达69.4%,浓度为100μg/mL时对过氧化氢(H2O2)的清除率为42%。猕猴桃根提取物具有较强的还原力,能有效清除DPPH和超氧阴离子自由基,并抑制羟基自由基的产生。所以,ERHM有效成分具有较为显著的抗氧化作用。

分光光度法测定猕猴桃根提取物清除自由基活性

[目的]寻求体外检测羟基自由基的简单有效方法。[方法]采用分光光度法测定猕猴桃根提取物溶液对羟基自由基的清除作用,并用Vc进行对照试验。[结果]猕猴桃根提取物溶液和Vc清除羟基自由基的作用具有很好的量效关系。[结论]分光光度法可用于清除羟基自由基的研究。

中华猕猴桃根提取物对肝癌细胞Bel-7402的放疗增敏作用

目的探讨中华猕猴桃根提取物对肝癌Bel-7402细胞的放疗增敏作用.方法采用流式细胞仪分析中华猕猴桃根提取物对Bel-7402细胞凋亡及形态的影响.采用克隆形成法检测Bel-7402细胞存活分数,并绘制细胞存活曲线.结果流式细胞仪结果显示,与单纯放疗组、单纯药物组相比,联合放疗组Bel-7402凋亡细胞的比例显著增多.从凋亡细胞分布情况进行分析,药物主要引起中、晚期Bel-7402细胞凋亡和坏死,对早期细胞凋亡无明显影响.与单纯放疗组相比,联合放疗组正常细胞数量逐渐减少,而凋亡细胞数量逐渐增多.与单纯放疗组相比,联合放疗组细胞存活曲线显示细胞存活分数明显降低,表明中华猕猴桃根提取物对肝癌细胞Bel-7402具有放疗增敏作用.结论中华猕猴桃根提取物可能通过诱导细胞凋亡来对Bel-7402细胞产生放疗增敏作用,其机制可能是阻滞肿瘤细胞在G1/M期,从而引起DNA损伤.

中华猕猴桃根提取物增敏索拉非尼对H22肝癌小鼠移植瘤生长及TNF-α的影响

目的 观察中华猕猴桃根提取物增敏索拉非尼对H22肝癌小鼠移植瘤生长及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法 将24只H22肝癌造模成功的小鼠按随机数字表分为4组:肝癌组给予生理盐水灌胃,猕猴桃根提取物组给予中华猕猴桃根提取物灌胃,索拉非尼组给予索拉非尼灌胃,联合组给予中华猕猴桃根提取物和索拉非尼灌胃,均1次/d,连续灌胃15 d。荧光素酶标记观察各组小鼠移植瘤生长情况,计算各组小鼠出瘤时间、瘤重、抑瘤率,免疫组化SABC染色法观察瘤组织中TNF-α表达情况。结果 索拉非尼组、联合组小鼠出瘤时间均明显长于肝癌组(P均<0.05),瘤重均明显低于肝癌组和猕猴桃根提取物组(P均<0.05),抑瘤率均明显高于猕猴桃根提取物组(P均<0.05);联合组小鼠出瘤时间明显长于索拉非尼组(P<0.05),瘤重明显低于索拉非尼组(P<0.05),抑瘤率明显高于索拉非尼组(P<0.05)。肝癌组瘤组织中TNF-α表达增多,猕猴桃根提取物组、索拉非尼组、联合组TNF-α阳性表达率均明显低于肝癌组(P均<0.05),索拉非尼组、联合组均明显低于猕猴桃根提取物组(P均<0.05)。结论 中华猕猴桃根提取物可能通过下调炎症因子TNF-α的表达增敏索拉非尼对H22肝癌小鼠的抑瘤作用。

野生猕猴桃根黄酮提取物对胃癌MKN-49P细胞增殖影响

目的探讨野生猕猴桃根黄酮提取物对胃癌MKN-49P细胞增殖作用的影响及机制。方法采用CCK-8比色法、流式细胞术、Western Blot法检测野生猕猴桃根黄酮提取物对胃癌MKN-49P细胞增殖作用的影响。结果野生猕猴桃根黄酮提取物对胃癌MKN-49P细胞增殖有明显的抑制作用,且呈时间-浓度依赖性;其浓度升高,细胞凋亡增加,G1期细胞增加,S、G2/M期细胞减少,抑制周期蛋白CyclinD1表达降低。结论野生猕猴桃根黄酮提取物可抑制胃癌MKN-49P细胞增殖、促进细胞凋亡、阻滞细胞周期于G1期,其主要机制可能与抑制周期蛋白CyclinD1表达降低有关。