猕猴脑胱天蛋白酶-3活化及其靶蛋白的体外研究(英文)

凋亡的主要生化过程包括胱天蛋白酶的活化及其对细胞内蛋白质的选择性切割 .在已知的胱天蛋白酶中 ,可被多种凋亡刺激信号激活的胱天蛋白酶 3备受注目 .为进一步揭示灵长类动物神经组织中未知的胱天蛋白酶 3靶蛋白 ,采用成年猕猴脑组织粗提物作为无细胞体系 ,通过加入 granzymeB引发凋亡途径的部分反应 ,如胱天蛋白酶 3的活化及随后发生的蛋白质水解 .经蛋白质印迹分析发现 ,与 granzymeB共孵育后 ,猕猴脑胱天蛋白酶 3以两步方式从酶原转化为活性酶 .对猕猴脑组织自身蛋白质的进一步分析显示 ,多聚ADP 核糖聚合酶 (PARP)被水解为长 85ku的片段 ,此片段提示胱天蛋白酶 3的特异切割活性 .此外 ,神经元凋亡抑制蛋白 (NAIP)也被切割 ,产生长约 4 0ku的小片段 ,但是它的出现不被胱天蛋白酶 3特异性抑制剂Ac DEVD CHO阻断 ,因此可能是 granzymeB直接作用于NAIP所致 .以上结果提示 ,凋亡相关酶切反应可在成年猕猴脑组织提取物中得到重现 ;NAIP可能是granzymeB而非胱天蛋白酶 3的作用靶点 .

猕猴早期胚胎脑的发育与NF-κB的表达

目的检测NF-kB转录因子在早期猕猴脑的表达,探讨非人类灵长类猕猴脑发育与NF-κB的关系。方法应用单克隆抗体链菌素亲生物蛋白过氧化酶(SP)免疫组织化学方法及电子计算机图像分析技术,观察NF-κB的表达。结果NF-κB在早期猕猴脑各部均有表达。在40d胎脑NF-κB呈弱表达;在55d胎脑NF-κB表达较前者明显增强,特别是在下丘脑、尾状核、豆状核和丘脑近第3脑室旁的神经细胞内NF-κB呈强阳性表达。结论NF-κB参与早期猕猴脑发育的调控。