猪丹毒杆菌的分离鉴定及耐药性试验

本试验通过细菌检测、生化试验、血清型鉴定、动物回归试验等对长春市某猪场送检疑似细菌感染的病死猪进行系统地分析,初步判定为猪丹毒杆菌致死。药敏试验分析结果表明,该菌株仅对青霉素、红霉素、呋喃唑酮、呋喃妥因4种药物敏感,对大多数抗菌药物高度耐药。经电镜负染观察及传代细胞系进行病毒分离,结果均为阴性。

急性死亡猪中猪丹毒杆菌的分离鉴定

本试验从江西省南昌市某规模化猪场送检的2份疑似猪丹毒杆菌引起的急性死亡猪组织中分离出2株可疑菌株,经细菌分离培养、染色镜检、生化试验等实验室诊断,进一步以猪丹毒杆菌16SrRNA的特异性引物进行PCR鉴定,确定2株分离菌为猪丹毒杆菌。然后进行动物致病性试验及药敏试验,并对该厂常用的消毒药进行最小抑菌浓度(MIC)的测定。结果表明,1×108 CFU的剂量可致死小白鼠;分离菌对β-内酰胺类抗菌药高度敏感,对多数抗菌药耐药;该厂常用消毒药的抑菌作用已明显下降。本试验结果对临床防制猪丹毒具有参考意义。

PCR方法诊断猪瘟病毒和猪丹毒杆菌混合感染

应用PCR快速检测急性病死猪的病原。采集病死猪脾等组织,用PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)。同时采集病死猪肝、心血,无菌接种血平板进行细菌分离,用16 S rRNA基因测序法鉴定分离菌。对分离菌株进行药敏试验。PCR检测结果显示检测样品用CSFV引物扩增出475 bp的条带,用PCV-2和PRRSV引物未扩增出条带。细菌分离结果显示,在血平板出现针尖大小的菌落,16 S rRNA基因测序法鉴定分离菌为猪丹毒杆菌。药敏试验结果显示,分离菌对强力霉素和环丙沙星等药物敏感。应用PCR方法对病死猪的病原快速鉴定,结果表明病死猪为猪瘟病毒和猪丹毒杆菌混合感染。

猪丹毒杆菌的分离鉴定及药敏试验

对江西省南昌市某规模化猪场急性死亡的育肥猪进行病理剖检,无菌操作采集病死猪肺脏进行细菌分离,从肺脏中分离到1株病原菌,通过细菌分离培养、培养特性观察和动物试验,确定病原菌为猪丹毒杆菌;药敏试验结果表明,分离菌对头孢类药物、青霉素G、阿莫西林高度敏感。综合流行病学、临床症状、病理剖检、细菌分离、生化鉴定和临床用药效果,判定该场育肥猪急性死亡是由猪丹毒杆菌感染所致。

猪丹毒杆菌临床分离鉴定与药敏试验

猪丹毒是由猪丹毒杆菌（E．rhusiopathiae，ER）引起的一种急性、热性传染病，临床上表现为急性败血性、亚急性疹块型及慢性关节炎和心内膜炎。

闽西地区猪丹毒杆菌的分离及生物特性鉴定

为确诊福建省龙岩市范围内4个养猪场疑似猪丹毒病例,从病猪脏器中分离、纯化细菌,并进行生物特性鉴定。根据其培养特性、形态特征、生化试验及PCR鉴定,确定为猪丹毒杆菌。16S r RNA基因测序结果表明,4株分离株16S r RNA序列全部相同,与Gen Bank中NR_074878_Fujisawa、NR_040871_DSM_14972、NR_113036_JCM_8533、NR_04083-7_ATCC 19414同源性为98.7%。药敏试验结果显示,4株分离株对阿莫西林、头孢噻呋、替米考星高度敏感;对庆大霉素、恩诺沙星产生耐药;对林可霉素、泰妙菌素、氟苯尼考、土霉素敏感性存在差异,其中LY-WP株对林可霉素耐受,LY-CT株对土霉素耐受。

猪丹毒杆菌血清型鉴定及药敏特性研究

为确诊导致广西部分地区猪场发生生猪大量死亡的原因,采集病死猪心血、肝、脾等组织,经细菌分离、生理生化鉴定、致病性试验、16SrDNA序列分析、血清型鉴定等系统的鉴定与分析。结果表明,分离到12株猪丹毒杆菌,确定猪场发病的病原为猪丹毒杆菌,血清型为1a型。所有的分离菌株具有一致的形态特征和生理生化特性,致病性较强。按分离地区选择4株临床分离菌株与20世纪50至80年代分离的4株菌株同时进行药敏试验,结果发现:所有菌株对β-内酰胺类、氯霉素类、大环内酯类、硝基呋喃类和双萜类药物仍保持高敏,是治疗猪丹毒的首选药物;但对四环素、林可霉素、诺氟沙星敏感性出现差异,4株临床分离菌株对上述3种药物的敏感性显著低于4株老菌株,表现为一定的耐药。多数菌株对氨基糖苷类、多肽类、磺胺类、硝基咪唑类、利福霉素家族药物表现为耐药。MIC测定结果显示青霉素仍然是治疗猪丹毒的首选药物。

广西猪丹毒杆菌分离鉴定及生物学特性研究

试验收集2013年6月至2014年2月广西南宁、桂林、柳州、玉林、贵港、钦州等6个市送检的疑似猪丹毒发病的材料,用鲜血琼脂平板对病料进行细菌分离,37℃恒温箱培养24~48 h,观察分离细菌的菌落形态,并进行革兰氏染色观察,初步确定其为革兰氏阳性的细小杆菌。为进一步确定分离出的是否为猪丹毒杆菌,试验进一步纯化细菌,提取细菌DNA用16S rRNA随机引物进行扩增,将扩增出来的目的片段连接到p MD18-T载体上,进行克隆、酶切鉴定及序列测定;最终将测序获得16S rRNA序列在NCBI上进行BLAST,结果表明试验最终分离出5株猪丹毒杆菌,为进一步确定分离出来猪丹毒杆菌的生物学特性,试验做了进一步深入研究：药物敏感性试验、小白鼠攻毒试验、耐药基因的检测、免疫攻毒保护性试验。

猪丹毒杆菌C43005株的制备及检定

为研究猪丹毒杆菌C43005株的菌种特性,制备了一批猪丹毒杆菌C43005株并对菌种的真空度、剩余水分、形态、培养特性、生化特性、血清学特性、毒力、免疫原性等参数进行检定,重点对该菌种的毒力进行重复试验并对影响毒力的因素进行分析。结果表明,菌种的真空度、剩余水分、形态、培养特性、生化特性、血清学特性、免疫原性均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》二〇〇〇版相关质量标准的规定,毒力试验结果明显受培养基质量和动物个体差异的影响。本研究可以为猪丹毒杆菌C43005株的制备和检定提供参考依据。

生产用培养基对猪丹毒杆菌G_4T_(10)株安全及免疫原性试验的比较研究

为明确生产用培养基对猪丹毒杆菌G4T10株安全性及免疫原性影响,采用2种不同批次的肉肝胃膜消化汤(20120123批和130226批)及马丁琼脂(20120904批和130129批)进行猪丹毒杆菌G4T10株培养和选菌,然后进行安全及免疫原性试验。结果共筛选出4种不同优势菌落,其中一株的菌落(20120123批肉肝胃膜消化汤+20120904批马丁琼脂)形态最好,具有良好的安全性及免疫原性(小鼠全试验9/10存活,其免疫后攻毒达9/9保护);而有一株菌落(20120123批肉肝胃膜消化汤+130129批马丁琼脂)形态最差,其安全性及免疫原性试验结果差(小鼠安全试验仅6/10存活,其免疫后攻毒仅达2/5保护)。试验表明,不同批次生产用培养基对猪丹毒活疫苗(G4T10株)质量影响大。

一起急性死亡母猪中猪丹毒杆菌的分离鉴定及药敏试验

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的一种急慢性、热性人兽共患病[1]。临床与剖检特征为高热、急性败血症、亚急性疹块性和慢性疣状心内膜炎及多发性非化脓性关节炎[2]。该病呈世界性广泛分布,也为我国主要的猪传染病之一,炎热潮湿季节多发,主要感染3~12月龄猪,发病率一般为10%~15%,严重时死亡率可达50%[3]。2014年7月,江西省抚州市某规模化猪场母猪出现急性死亡情况,病程急,常常无法察觉便病死于栏中。

从绵羊药浴池底湿土中分离一株猪丹毒杆菌

从绵羊药浴池底湿土中分离一株猪丹毒杆菌钱心元，罗玉峰，张存帅（中国兽药监察所）为了查明新疆农五师绵羊药浴后严重发病之病因，１９９３年９月由上海汽巴—嘉基畜禽保健有限公司将五份药浴池湿土送我所进行病原微生物检验。我们从其中一份池底温土中分离到一株猪丹毒...

一株猪丹毒杆菌的分离鉴定及其致病性实验

从湖南邵阳某猪场的急性发病育肥猪体内分离到一株革兰氏阳性小杆菌,通过对其形态特征、PCR检测、生化反应、动物回归等试验,确定其为猪丹毒杆菌.通过对小鼠和猪的攻毒试验表明：该菌对ICR小鼠的LD50为1.75CFU,11×10^7CFU能使8～10周龄的阴性猪致死,且攻毒死亡猪呈典型的猪丹毒临床症状.说明所分离到的猪丹毒杆菌对小鼠和猪致病性极高,为强毒株.

猪丹毒杆菌毒力和敏感性检查试验用家鸽素质的影响

猪丹毒杆菌是人畜共患病原菌,在疫苗生产中我们常用家鸽测定其菌种毒力和检验氢氧化铝灭活菌苗中猪丹毒强毒菌灭活的可靠性。我们多年的实践证明,使用敏感性好的家鸽作为模型动物检测猪丹毒菌的毒力是可行的。我组常用的试验用鸽还没做到标准化,有的来自农贸市场,有的来自鸽繁殖场,买来就用,没有建立必要的预检。较常碰到的问题是试验结果不规律,试验往往需要重复,影响工作进程。我们首先注意试验用鸽的素质问题,用48只鸽作了血清学试验,结果查明其中有25只(52％)

猪丹毒杆菌的分离与鉴定

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的一种急性热性传染病,其主要特征为高热、急性败血症、皮肤疹块（亚急性）、慢性疣状心内膜炎、皮肤坏死与多发性非化脓性关节炎（慢性）。猪丹毒一般分为急性型、亚急性型和慢性型,不同年龄的猪均可发病,但多见于3-12月龄猪,病程2~4天,一年四季均可发病。目前该病在世界上大多数国家都有分布,呈散发或流行性发生,发病率高,危害严重,也给人体健康带来威胁。

一例母猪混合感染猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪丹毒杆菌的实验室诊断及药物敏感性实验

对一猪场疫病进行了实验室诊断以及分离细菌的药物敏感性检测,结果表明该场生猪合并感染了猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪丹毒杆菌。该丹毒杆菌对青霉素及几种头孢、喹诺酮类药物敏感而对卡那霉素、阿米卡星、新霉素等不敏感。

一例母猪混合感染猪蓝耳病病毒和猪丹毒杆菌的实验室诊断

本试验对一猪场疫病进行了实验室诊断以及分离细菌的药物敏感性检测,结果表明该场生猪合并感染了猪繁殖与呼吸综合征病毒(猪蓝耳病病毒)和猪丹毒杆菌。该丹毒杆菌对青霉素及几种头孢、喹诺酮类药物敏感而对卡那霉素、阿米卡星、新霉素等不敏感。

猪轮状病毒与肠杆菌、猪丹毒杆菌混合感染的诊断

为查明毕节市某规模化种猪场腹泻流行的原因,通过流行病学调查、病理剖检、RT-PCR检测、细菌分离培养和药物敏感性试验对发病的10头新生仔猪进行诊断。结果:病理变化为颌下淋巴结出血和肠系膜淋巴结充血;猪轮状病毒RTPCR检测为阳性;细菌分离鉴定为革兰氏阴性肠杆菌和革兰氏阳性猪丹毒杆菌,对穿心莲等药物较为敏感。结论:猪腹泻由猪轮状病毒、肠杆菌和猪丹毒杆菌混合感染所致。

肉品中猪丹毒杆菌的快速检验

利用含猪丹毒免疫血清，吖啶橙，卡那霉素，叠氮钠及蚕蛹浸出液等混合配制的增菌培养基，进行猪丹杆菌的增菌培养，结合荧光菌闭检查，在含菌量为５×１０＾２～５×１０＾３ｃｆｕ／ｇ时，经３７℃培养１２ｈ，即可呈现阳性结果。