广西猪人肉孢子虫实验感染研究

目的研究确定广西是否存在人-猪相互感染的肉孢子虫病。方法采用人-猪-人循环感染方法。取自然感染病例的粪便,用薛氏糖漂浮法收集肉孢子虫孢子囊(10000个以上),拌入饲料,用吞食法感染猪。取含成熟肉孢子虫包囊的新鲜生猪肉,剁碎,用吞食法感染志愿者(含包囊数约71000个以上)。观察感染后症状及肉孢子虫在宿主体内发育情况。结果人感染后约5h出现腹胀,8～36h腹泻水样便13次,呕吐4次,畏寒、发热(体温达38.5℃)、头昏、头痛、关节及肌肉酸痛、腰痛、上腹部隐痛,腿部抽筋,全身乏力,食欲明显减退。感染后第10天粪检查见未孢子化的孢子囊,第12天检出孢子化的孢子囊,孢子囊平均大小为11.9(8.8～14.5)μm×9.2(7.5～12.5)μm。猪感染后第5～8天轻度厌食,疲乏无力、便秘、毛疏松,第17天恢复正常。包囊平均大小为299.2(175～575)μm×62.3(30～102.5)μm。缓殖子大小为11.5(9.5～13.5)μm×4.1(2.8～5.0)μm。人感染后第46天口服乙酰螺旋霉素(0.2g/次,4次/d,连服15d),服药后第30天粪检孢子囊阴转。结论广西存在猪-人相互感染的肉孢子虫病。

广西猪人肉孢子虫感染情况的调查

目的了解广西地区人群猪人肉孢子虫的感染情况,为防治工作提供科学依据。方法采用硫酸锌浮聚法和直接压片法分别检查人粪中猪人肉孢子虫孢子囊(或卵囊)和猪肉中猪人肉孢子虫包囊。结果在6个县10个乡(镇)27个村粪检3003人,猪人肉孢子虫自然感染率为2.4%。男性感染率为3.6%,高于女性;壮族居民感染率为5.3%,高于其他民族;≥30岁的感染者占检出总感染人数的94.4%,年龄组间的感染率差异有显著性。检查市售肉猪192头,猪人肉孢子虫自然感染率为37.0%。结论广西部分少数民族地区有猪人肉孢子虫病流行,壮族居民感染率高于其他民族,与吃生猪肉的习惯有关。

广西猪人肉孢子虫的发现与研究

目的调查研究广西是否存在猪人肉孢子虫的感染情况,并建立感染模型,研究广西猪人肉孢子虫的易感性及临床药物治疗效果。方法选择有吃生猪肉习惯的地区为调查点,对1岁以上常住户口居民取新鲜粪便用硫酸锌漂浮法离心镜检肉孢子虫孢子囊。用薛氏糖漂浮法从肉孢子虫自然感染患者粪便中收集孢子囊,用吞食法感染实验猪,感染后第56d将其杀死取新鲜肌肉100g和50g,用同法分别感染实验猴和志愿者。实验猪和调查乡(镇)市售猪肉抽样取肌肉标本每部位各2g,用压片法镜检肉孢子虫包囊。结果调查7个县11个乡(镇)30个村庄3428人,其中6个县6个乡(镇)12个村庄人群肉孢子虫平均自然感染率2.07%。10个乡(镇)市售猪肉肉孢子虫平均感染率33.64%。实验猪感染后第56d查见肉孢子虫包囊,志愿者感染后第12d粪检查见孢子化的孢子囊或卵囊。结论广西流行猪人肉孢子虫病。

猪源肉孢子虫双重套式PCR检测方法的建立

为了准确快速检测猪源肉孢子虫的种类,本研究根据米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫的18S rRNA基因序列设计双重套式PCR引物,优化并建立能够同时检测这两种猪源肉孢子虫的双重套式PCR方法。结果显示,双重套式PCR对米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫扩增产物的大小分别为415 bp和591 bp,而对枯氏肉孢子虫、刚地弓形虫、犬新孢子虫的检测结果均为阴性,对两种猪源肉孢子虫重组质粒标准品的检测下限均为5拷贝/μL,表明该双重套式PCR具有较强的特异性和较高的敏感性。利用本研究建立的方法随机对22份猪肉样品的检测结果显示,本研究建立的方法与肌肉压片镜检法的阳性符合率为100%,阴性符合率为89.5%,总符合率为90.9%,本研究建立的双重套式PCR方法可以实现对猪肉样品中米氏肉孢子虫和猪人肉孢子虫的快速检测。