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仔猪附红细胞体与传染性胸膜肺炎放线杆菌混合感染的诊治
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作者 张博 《浙江畜牧兽医》 2024年第4期45-45,47,共2页
猪附红细胞体病是由猪附红细胞体附着在猪红细胞上或游离在猪血浆中,从而导致病猪发生贫血、黄疸、电解质失衡等临床症状,属于人畜共患病。猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的肺部炎症,属于革兰氏阴性杆菌,主要以体温升高,口... 猪附红细胞体病是由猪附红细胞体附着在猪红细胞上或游离在猪血浆中,从而导致病猪发生贫血、黄疸、电解质失衡等临床症状,属于人畜共患病。猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌引起的肺部炎症,属于革兰氏阴性杆菌,主要以体温升高,口鼻流带血泡沫,胸痛,咳嗽为典型症状。 展开更多
关键词 附红细胞体 胸膜肺炎放线杆菌 革兰氏阴性杆菌 传染性胸膜肺炎 人畜共患病 红细胞 混合感染 典型症状
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猪传染性胸膜肺炎发病机制研究进展
2
作者 黄麒霖 仇正英 +3 位作者 王贵波 景小涵 李维 辛蕊华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第3期31-37,共7页
猪传染性胸膜肺炎(porcine pleuropneumonia,PCP)是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一种严重呼吸道疾病,在全世界广泛流行。APP主要通过直接接触、气溶胶和污染物在猪群之间传播,猪只感染后,多种毒力... 猪传染性胸膜肺炎(porcine pleuropneumonia,PCP)是由猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)引起的一种严重呼吸道疾病,在全世界广泛流行。APP主要通过直接接触、气溶胶和污染物在猪群之间传播,猪只感染后,多种毒力因子触发一系列细胞因子级联反应,引发“炎症风暴”造成脓毒血症,导致肺脏病变及坏死,最急性型的死亡率可达80%~100%。PCP在我国的发病率呈逐年上升趋势,已成为危害养猪业最严重的疾病之一,给我国养殖业造成严重的经济损失。临床上常用抗生素治疗PCP,但由于细菌耐药性日益严重,使得抗生素对该病的防控愈发困难。此外APP血清型较多,不同类型血清型之间交叉免疫不强,导致疫苗防控效果不理想,感染后死亡率和发病率均处于上升趋势。目前,人们对APP发病机制的研究主要集中在毒力因子方面,关于该菌的侵袭过程(如细菌的定植和营养获取、逃避宿主防御、诱导组织损伤等)对PCP的发生、发展及预后的影响尚不清楚。因此,文章主要综述了PCP的发病机制,揭示了多种因素的作用,以期了解APP的感染过程及机体的免疫机制,在抗炎和增强免疫力等环节为防治PCP提供理论依据。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌(APP) 传染性胸膜肺炎(PCP) 动物传染 发病机制 毒力因子
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柚皮苷可通过多种途径修复猪胸膜肺炎放线杆菌诱导的小鼠肺上皮屏障损伤
3
作者 黄麒霖 刘晨 +5 位作者 景晓涵 黄丽娜 潘香逸 石雄伟 仇正英 辛蕊华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期5299-5309,共11页
旨在研究柚皮苷(naringin,NAR)对猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)感染引起小鼠肺上皮屏障损伤的防治效果。将40只6~8周龄的雄性昆明小鼠随机分为5组,分别为对照组、模型组、NAR低剂量组、NAR中剂量组以及NAR... 旨在研究柚皮苷(naringin,NAR)对猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)感染引起小鼠肺上皮屏障损伤的防治效果。将40只6~8周龄的雄性昆明小鼠随机分为5组,分别为对照组、模型组、NAR低剂量组、NAR中剂量组以及NAR高剂量组。连续灌胃给药8 d,空白组和模型组给予生理盐水。在第7天,小鼠以气管插管灌注的方式感染APP(1×10^(8)CFU·mL^(-1),100μL·只^(-1)),空白组灌注等体积无菌生理盐水,各组小鼠于造模后48 h处死,采样并评估NAR的防治作用。通过X射线图像表明,NAR可降低小鼠肺泡灌洗液中APP载菌量,并且能够缓解肺部病理损伤;此外,NAR干预后,可逆转由于APP诱导的小鼠肺组织中ZO-1、Occludin-1和Claudin-1紧密连接蛋白的表达降低,从而促进肺上皮屏障修复。为进一步探讨NAR促进肺上皮屏障修复的机制,研究发现NAR不仅减少小鼠肺组织中促炎因子IL-6和TNF-α的分泌,还增加了抑炎因子IL^(-1)0表达,同时能够增加抗氧化酶SOD2和Hmox1表达,表明NAR能够增强机体抗炎及抗氧化能力;此外,NAR可抑制TGF-β1/Smad2/3通路,减少由APP诱导的肺纤维组织增生;通过分析凋亡相关关键蛋白和Tunel荧光标记发现,NAR可呈剂量依赖性的减少细胞凋亡。综上所述,NAR可通过抗炎、抗氧化、抗纤维化和抗凋亡等途径,修复小鼠肺上皮屏障损伤,从而有效逆转APP诱导的肺部炎症损伤、发挥防治APP的功效。 展开更多
关键词 天然药物 柚皮苷 胸膜肺炎放线杆菌 肺上皮屏障损伤
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猪传染性胸膜肺炎的发病及综合防控
4
作者 方集 《中国畜牧业》 2024年第14期94-95,共2页
猪传染性胸膜肺炎(Porcine pleuropneumonia,简称PP)是一种由胸膜肺炎放线杆菌引起的严重猪呼吸道疾病,在全球广泛分布。该病因其高度传染性、高死亡率以及对经济造成的巨大损失而备受关注。猪传染性胸膜肺炎病菌侵入猪的呼吸道后,会引... 猪传染性胸膜肺炎(Porcine pleuropneumonia,简称PP)是一种由胸膜肺炎放线杆菌引起的严重猪呼吸道疾病,在全球广泛分布。该病因其高度传染性、高死亡率以及对经济造成的巨大损失而备受关注。猪传染性胸膜肺炎病菌侵入猪的呼吸道后,会引发严重的胸腔积液和肺炎,导致呼吸困难、咳嗽、精神萎靡、食欲不振等明显症状。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 高度传染性 呼吸道疾病 呼吸困难 综合防控 高死亡率 胸腔积液
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猪场接触传染性胸膜肺炎的综合防治
5
作者 张磊 单丽萍 《中国畜牧业》 2024年第15期103-104,共2页
猪接触性传染性胸膜肺炎是一种由胸膜肺炎放线杆菌引起的严重呼吸道传染病,是猪场养殖中常见的疾病之一。一旦发生此病,必须及时采取科学合理的管控和防治措施,以避免养殖户遭受经济损失。基于此,笔者以山东乳山市地区某猪场为例,分析... 猪接触性传染性胸膜肺炎是一种由胸膜肺炎放线杆菌引起的严重呼吸道传染病,是猪场养殖中常见的疾病之一。一旦发生此病,必须及时采取科学合理的管控和防治措施,以避免养殖户遭受经济损失。基于此,笔者以山东乳山市地区某猪场为例,分析了猪接触性传染性胸膜肺炎的流行特征及相关症状表现,并提出了针对性的综合防治措施,旨在提高猪场养殖管理的质量和效率。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 呼吸道传染 场养殖 接触性传染性胸膜肺炎 山东乳山 接触传染性胸膜肺炎 综合防治措施 流行特征
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猪传染性胸膜肺炎的诊断及治疗方法
6
《兽药市场指南》 2024年第5期39-39,共1页
猪传染性胸膜肺炎,是由胸膜肺炎放线杆菌引起的猪呼吸系统的一种严重的接触性传染病。寒冷的冬季和气温较低的初春猪极易患病,且传染迅速,死亡率高,对养猪效益威胁很大。因此,冬季养猪要重视对传染性胸膜肺炎的防治。
关键词 传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 接触性传染 死亡率高 效益 呼吸系统 冬季养 初春
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猪接触性传染性胸膜肺炎与附红细胞体病混合感染的诊治
7
作者 李威 《北方牧业》 2024年第19期31-31,共1页
猪接触性传染性胸膜肺炎是由猪胸膜肺炎放线杆菌引起的一种急性、热性、高度接触性呼吸道传染病,急性病例常以急性纤维素性的肺炎为特征,慢性型常表现为慢性坏死性胸膜肺炎。附红细胞体病是以溶血性贫血、发热、黄疸为特征的人畜共患传... 猪接触性传染性胸膜肺炎是由猪胸膜肺炎放线杆菌引起的一种急性、热性、高度接触性呼吸道传染病,急性病例常以急性纤维素性的肺炎为特征,慢性型常表现为慢性坏死性胸膜肺炎。附红细胞体病是以溶血性贫血、发热、黄疸为特征的人畜共患传染病,多发生于夏季,隐性感染比例较高,常呈现继发感染,加重原发病情。笔者曾诊治了一起猪接触性传染性胸膜肺炎与附红细胞体病混合感染的病例,现报告如下。 展开更多
关键词 附红细胞体病 人畜共患传染 胸膜肺炎放线杆菌 混合感染 纤维素性 胸膜肺炎 溶血性贫血 继发感染
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育肥猪伪狂犬病病毒、蓝耳病病毒和胸膜肺炎放线杆菌混合感染案例分析
8
作者 张敏 张坤 《今日养猪业》 2024年第2期49-51,共3页
【目的】为猪场防治猪伪狂犬病提供经验借鉴,提升猪场疫病防控水平,提高养殖经济效益。【方法】介绍一起猪伪狂犬病病毒(PRV)变异毒株引起17~18周龄生长育肥猪陆续出现严重呼吸道疾病(死亡率高达10%)的案例,通过病猪解剖、胸膜肺炎放线... 【目的】为猪场防治猪伪狂犬病提供经验借鉴,提升猪场疫病防控水平,提高养殖经济效益。【方法】介绍一起猪伪狂犬病病毒(PRV)变异毒株引起17~18周龄生长育肥猪陆续出现严重呼吸道疾病(死亡率高达10%)的案例,通过病猪解剖、胸膜肺炎放线杆菌(APP)分离和常规抗生素药敏试验,以及蓝耳病病毒(PRRSV)和猪伪狂犬病病毒的病原荧光定量PCR(qPCR)检测,对疫情进行综合诊断。【结果】病料中分离到猪胸膜肺炎放线杆菌,荧光定量PCR检测PRRSV和PRV病原均为阳性,确诊为感染猪伪狂犬病病毒后,继发蓝耳病病毒、胸膜肺炎放线杆菌感染。采取伪狂犬病疫苗免疫+药物保健等措施后,疫情得到控制。【结论】猪场一定要对猪伪狂犬病引起足够的重视,日常生产中需要做好猪伪狂犬病的防控,尤其要执行科学的免疫程序。面对伪狂犬病病毒和其他病原的混合感染,要分清楚哪个是原发病原,哪些是继发感染,从而采取针对性的治疗措施,从根源上控制疫情。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒变异株 蓝耳病病毒 胸膜肺炎放线杆菌 细菌分离 荧光定量PCR
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定、致病性与药敏试验 被引量:12
9
作者 田永祥 檀永强 +6 位作者 刘泽文 郭锐 段正赢 杨克礼 周丹娜 罗咏梅 袁芳艳 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第21期5204-5207,共4页
从湖北省几个猪场具有严重呼吸道症状的疑似病例中,采集了肺脏、扁桃体、关节液及心包液等病料,进行了细菌的分离培养及菌落形态观察、染色镜检、生化试验、PCR检验、血清型鉴定、药敏试验及致病性试验。结果表明,分离到的8株细菌为猪... 从湖北省几个猪场具有严重呼吸道症状的疑似病例中,采集了肺脏、扁桃体、关节液及心包液等病料,进行了细菌的分离培养及菌落形态观察、染色镜检、生化试验、PCR检验、血清型鉴定、药敏试验及致病性试验。结果表明,分离到的8株细菌为猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)。血清型分型鉴定结果为1型的6株,3型的2株。药敏试验结果显示,分离的菌株对头孢类、先锋霉素类表现较高的敏感性,为猪场用药提供了科学参考。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎放线杆菌(actinobacillus pleuropneumoniae APP) 鉴定 耐药性 致病性
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验 被引量:24
10
作者 张东超 杨宁宁 +4 位作者 林静 弓建芳 高珂珂 李小慧 金天明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第6期1604-1609,共6页
为了给天津某规模猪场提供猪传染性胸膜肺炎(PCP)的科学防控和合理的用药方案,本试验对该猪场疑似患PCP的病猪进行临床综合诊断和病理组织学观察,无菌采集病料,通过细菌的分离与培养、镜检、生化试验、卫星试验、PCR检测、动物致病性试... 为了给天津某规模猪场提供猪传染性胸膜肺炎(PCP)的科学防控和合理的用药方案,本试验对该猪场疑似患PCP的病猪进行临床综合诊断和病理组织学观察,无菌采集病料,通过细菌的分离与培养、镜检、生化试验、卫星试验、PCR检测、动物致病性试验及药敏试验等实验室方法对分离菌进行系统分析。结果发现,病猪呼吸困难,病理剖检和病理组织学观察可见有典型的纤维素性肺炎变化;显微镜下分离菌呈多形性的革兰氏阴性杆菌,且其生化试验、卫星试验结果与传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)特性一致;用APP APXⅣA毒素基因特异性引物扩增结果为阳性;该APP分离菌对小鼠具有致病性,且对头孢噻肟、氟苯尼考等药物高度敏感。根据实验室检测结果并结合临床综合诊断,最终判定该细菌分离株为猪传染性APP。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 分离 PCR检测 药敏试验
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因的克隆和表达 被引量:9
11
作者 邵美丽 刘思国 +3 位作者 王春来 郭设平 宫强 佟恒敏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期25-28,共4页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型25-4株基因组DNA为模板,用PCR扩增外膜蛋白(OMP)基因特异片段,并克隆于pMD 18-T中,经酶切及核苷酸序列分析鉴定后,亚克隆于原核表达载体pGEX-6P-1,成功构建了重组表达载体pGEX-omp;以此转化大肠... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清7型25-4株基因组DNA为模板,用PCR扩增外膜蛋白(OMP)基因特异片段,并克隆于pMD 18-T中,经酶切及核苷酸序列分析鉴定后,亚克隆于原核表达载体pGEX-6P-1,成功构建了重组表达载体pGEX-omp;以此转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),经SDS-PAGE鉴定,表达的可溶性融合蛋白分子质量约为61 ku,命名为GST-OMP。以GST亲和层析柱纯化并利用Xa因子酶解,获得切掉标签的OMP。经ELISA检测,该OMP蛋白能够与兔抗APP的阳性血清反应,具有很好的免疫活性。GST-OMP蛋白的成功表达为APPOMP相关分子生物学功能的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 外膜蛋白基因 克隆 表达
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣ毒素基因的克隆与表达 被引量:14
12
作者 王方昆 王一成 +1 位作者 袁秀芳 徐丽华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期657-660,共4页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清2型标准菌株基因组DNA为模板,用PCR方法扩增ApxⅣ毒素基因特异片段1.5 kb左右,将PCR产物纯化后与pMD18-T连接并测序,结果该片段的碱基序列与GenBank中标准株序列的同源性为98%。随后将该片段亚克隆到原核表达载体pET-28a(+)的多克隆位点,经鉴定后得到重组质粒pET-ApxⅣ,将此重组质粒转化到受体菌BL21-DL3中,并用诱导剂乳糖进行诱导表达,5 h后表达达到高峰。经12%SDS-PAGE电泳检测,表达得到的融合蛋白约为61 000。经Western blotting分析,表达蛋白能与APP阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 ApxⅣ 克隆 表达
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型7型25-4株ApxIICA基因的克隆和基因缺失 被引量:7
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作者 王春来 刘思国 +3 位作者 王牟平 彭永刚 宫强 孔宪刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期94-97,共4页
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型7型25_4株ApxIICA基因用特异性引物进行PCR扩增并克隆到T载体上,构建重组质粒pMD18_ApxIICA,将pMD18_ApxIICA转化到E.coliJM83中并测序。序列分析表明血清型7型25_4株ApxIICA与其它血清型(5型和9型)... 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型7型25_4株ApxIICA基因用特异性引物进行PCR扩增并克隆到T载体上,构建重组质粒pMD18_ApxIICA,将pMD18_ApxIICA转化到E.coliJM83中并测序。序列分析表明血清型7型25_4株ApxIICA与其它血清型(5型和9型)核苷酸序列同源性达98%以上,氨基酸序列同源性达90%以上。利用ApxIIC基因内部单一的SpeI位点,设计特异性的引物,利用PCR技术在ApxIIC基因内部缺失165bp的核苷酸片段,PCR产物再用SpeI进行酶切,并体外连接构建得到含有ApxIIC缺失基因的重组质粒pMD18_ApxII△CA。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎放线杆菌 ApxIICA 基因克隆 基因缺失
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猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌血清3型分子鉴定及药敏试验 被引量:9
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作者 李海利 徐引弟 +5 位作者 宋毓民 朱文豪 张青娴 王克领 冯亚杰 候自花 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第1期280-284,共5页
为了解猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的血清型及耐药情况,本研究根据GenBank数据库设计1对引物,特异性的扩增950bp核苷酸片段,对血清3型APP进行分子鉴定及药敏试验。结果显示,所得PCR产物经过测序... 为了解猪接触传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)的血清型及耐药情况,本研究根据GenBank数据库设计1对引物,特异性的扩增950bp核苷酸片段,对血清3型APP进行分子鉴定及药敏试验。结果显示,所得PCR产物经过测序,与GenBank已发表的血清3型APP的同源性达99%以上,所分离菌株耐药性较强,大多为多重耐药。通过对血清3型APP进行分子鉴定及药敏试验,为猪传染性胸膜肺炎的鉴定、诊断及防制提供了基础。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 血清3型 药敏试验
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的研究进展 被引量:12
15
作者 郭坤 高晓娜 +4 位作者 罗军荣 王天成 郭小权 胡国良 刘平 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第2期59-62,共4页
猪传染性胸膜肺炎(PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌引起,以肺脏出血、坏死和纤维素性渗出为主要病理变化,是一种高度接触性急性呼吸道传染病,其发病率和死亡率常在20%以上,其中最急性型的死亡率可高达80%~100%。近年来,此病在我国多地爆发,其... 猪传染性胸膜肺炎(PCP)是由胸膜肺炎放线杆菌引起,以肺脏出血、坏死和纤维素性渗出为主要病理变化,是一种高度接触性急性呼吸道传染病,其发病率和死亡率常在20%以上,其中最急性型的死亡率可高达80%~100%。近年来,此病在我国多地爆发,其阳性检测率高达40%。因此,该病给畜牧业带来了严重的经济损失。在这种情况下,文章从病原学、流行病学、主要症状、实验室诊断及该病的防治等方面进行阐述。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎(PCP) 放线杆菌 病原学 流行病学 临床诊断 防治
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌磺胺类药物耐药基因的检测 被引量:8
16
作者 李海利 邓祖丽颖 +7 位作者 徐引弟 郎利敏 张青娴 游一 王克领 冯亚杰 侯自花 白献晓 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第5期135-139,共5页
为了解河南省及周边地区规模化猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)对磺胺类药物的耐药情况,本研究从河南省及周边地区49个规模化猪场的肺脏和气管中分离出79株疑似APP菌株,血清型鉴定结果显示,分离菌株... 为了解河南省及周边地区规模化猪场猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)对磺胺类药物的耐药情况,本研究从河南省及周边地区49个规模化猪场的肺脏和气管中分离出79株疑似APP菌株,血清型鉴定结果显示,分离菌株为1、2、3、5、7、8、9、10型APP,采用纸片扩散法对分离株进行了耐药表型鉴定,同时采用PCR方法对磺胺类药物耐药基因进行了检测。药敏试验结果显示,APP对磺胺类药物的耐药率为100%(79/79)。根据Gen Bank中登录的序列,设计了3对特异性引物,对磺胺类药物的耐药基因Sul1、Sul2、Sul3进行扩增检测。耐药基因检测结果显示,分离的79株细菌中,Sul2基因检出率为100%(79/79),Sul1基因的检出率为79.75%(63/79),Sul3基因的检出率为89.87%(71/79),Sul1和Sul2基因同时检出率为70.89%(56/79),Sul1和Sul3同时检出率为62.03%(49/79),Sul2和Sul3基因同时检出率为77.22%(61/79)。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎放线杆菌 磺胺类药物 耐药基因
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅡ^-/Amp^r突变株的构建 被引量:4
17
作者 贝为成 何启盖 +5 位作者 陈焕春 徐晓娟 洪文洲 肖少波 宋云峰 刘建杰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期186-191,共6页
根据已发表的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清5型核苷酸序列设计并合成了一对引物,从自行分离的APP菌株PCR扩增apxⅡCA基因,将该片段与pBluescriptSK(+)载体连接,得到质粒pSK CA。另外,从质粒pIC neo中得到的Ampr基因经XbaⅠ酶切消化... 根据已发表的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)血清5型核苷酸序列设计并合成了一对引物,从自行分离的APP菌株PCR扩增apxⅡCA基因,将该片段与pBluescriptSK(+)载体连接,得到质粒pSK CA。另外,从质粒pIC neo中得到的Ampr基因经XbaⅠ酶切消化后,克隆到pSK CA中的XbaⅠ位点,获得了重组转移质粒pSK CAmpr。pSK CAmprDNA通过电转化导入亲本菌,电转化后的产物涂布于TM平板,可获得突变株。提取突变株和亲本菌基因组DNA,用PCR检测含有apxⅡC基因的胸膜肺炎放线杆菌染色体区域。从突变株基因组DNA扩增得到的一条PCRDNA片段比从亲本菌基因组DNA扩增得到的一条DNA片段大1 3kb,增大的片段与所插入的Ampr基因大小相符合。用合成的Ampr基因引物从突变株基因组DNA中也能扩增到一条1 3kb的特异性DNA片段。同时South ernblot鉴定有特异性带。这表明我们所构建的突变株是成功的。测定了突变株的遗传稳定性及突变株对动物的安全性,为进一步研究用其它报告基因置换Ampr基因后,研制单基因工程疫苗及以APP毒力缺失突变菌株为载体,表达外源基因的APP基因工程菌的研究奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎 放线杆菌 apxⅡ^-/Amp^r突变株 基因构建 基因工程疫苗
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌变异株的分离与鉴定 被引量:5
18
作者 葛兆宏 陆广富 +3 位作者 陶洁 张志妮 何玲 朱国强 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期10-13,共4页
对江苏泰兴某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎病料进行实验室分离培养,成功分离到1株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,并对其进行生化特性、双抗夹心ELISA鉴定。为进一步分析该分离株的血清型,针对ApxIVA和ApfA保守基因设计2对检测引物,PCR结果表明... 对江苏泰兴某猪场疑似猪传染性胸膜肺炎病料进行实验室分离培养,成功分离到1株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌,并对其进行生化特性、双抗夹心ELISA鉴定。为进一步分析该分离株的血清型,针对ApxIVA和ApfA保守基因设计2对检测引物,PCR结果表明:该分离株未扩增出预期大小的片段,说明该分离株很有可能是1株猪传染性胸膜肺炎放线杆菌变异株,其血清型还有待进一步鉴定。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎放线杆菌 双抗夹心ELISA PCR
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxⅢA基因的克隆和表达 被引量:8
19
作者 邵美丽 刘思国 +4 位作者 王春来 郭洋 张秀华 郭设平 佟恒敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期139-141,共3页
以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型参考株基因组DNA为模板,PCR方法扩增出apxⅢA基因3.1kb的片段,扩增产物克隆于pMD18-T中,重组质粒经酶切鉴定后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中不同血清型胸膜肺炎放线杆菌apxⅢA基因进行比较,结果... 以猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清2型参考株基因组DNA为模板,PCR方法扩增出apxⅢA基因3.1kb的片段,扩增产物克隆于pMD18-T中,重组质粒经酶切鉴定后进行核苷酸序列测定,并与GenBank中不同血清型胸膜肺炎放线杆菌apxⅢA基因进行比较,结果显示核苷酸同源性均在96%以上。将该基因片段亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1的BamHⅠ/SalⅠ位点,成功构建了重组表达载体pGEX-apxⅢA,转化大肠杆菌BL-21(DE3)中并获得表达。SDS-PAGE结果显示,表达的融合蛋白分子量约为140Ku,与预测相符,Westernblot证明该融合蛋白具有免疫学活性。该融合蛋白的成功表达为猪传染性胸膜肺炎亚单位疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅢA基因
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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒的研制 被引量:9
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作者 徐景峨 蔡一鸣 +1 位作者 王璇 任荣清 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期209-211,共3页
根据GenBank中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅣA基因序列,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为600 bp,特异性与敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核... 根据GenBank中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅣA基因序列,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为600 bp,特异性与敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核酸检测量为50 CFU/mL,而对金黄色葡萄球菌、链球菌、多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。-20℃至少可保存12个月,且重复性良好。应用该PCR试剂盒对41份临床样本进行了检测,其PCR检测结果与细菌学检测结果相一致。结果表明,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒能够对APP临床样品进行快捷、灵敏、准确的检测。 展开更多
关键词 传染性胸膜肺炎放线杆菌 PCR试剂盒 apxⅣA基因
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