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猪卵泡抑制素主动免疫对山羊生殖的影响 被引量:4
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作者 刘桂琼 姜勋平 +1 位作者 丁家桐 杨利国 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期37-39,共3页
Inhibin was purified from swine ovarian fluid by deposition and column deposition.The purified inhibin was diluted with ureasodiumacetate,and then was mixed with Freund adjuvant with same volume.Each of the twenty... Inhibin was purified from swine ovarian fluid by deposition and column deposition.The purified inhibin was diluted with ureasodiumacetate,and then was mixed with Freund adjuvant with same volume.Each of the twenty goats was given subcutaneous injections of the purified inhibin 2 mg at neck.The goats were given boosterinjections of the inhibin 1 mg that was mixed with ureasodiumacetate and Freund incomplete adjuvant after 30 and 50 days.Five goats in control group were given admixture of urea and sodium acetate and adjuvant at the same time.The goats were injected with prostaglandin F2a 005 mg at 21 d and 31 d after the last immunization.The blood samples were collected at 30 d,51 d and 60 d after the first immunization and before immunization.The plasma FSH concentrates was assayed with RIA and the inhibin antibody titer was assayed with agar plate diffusion method.The plasma antibody titer was 1∶16256 at 60 d after first immunization.The plasma FSH concentrates of the immunized goats was higher than those of the control group(202 vs.12 mIU/ml,PZ<005).The number of follicle and the number of corpora lutea of the immunized group were as twice as those of the control(1931 vs.1223 and 225 vs.110,respectively).It indicated that inhibin purified from swine ovarian fluid could induce goat produce high ovulation rate and it can improve reproductive traits of goat. 展开更多
关键词 猪卵泡抑制素 主动免疫 山羊 生殖
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猪卵泡液在猪体外受精中的应用 被引量:10
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作者 沈文正 李权武 《动物医学进展》 CSCD 2000年第S1期116-118,共3页
自 1 96 5年观察了猪卵泡液 (p FF)对小鼠卵母细胞减数分裂的作用 [1 ]以来 ,对p FF在猪卵母细胞体外成熟、体外受精和卵裂及体外胚胎发育中的作用已进行了深入研究。对 p FF组分的研究和应用 ,能促进卵泡液等重要生殖资源的充分利用 ,... 自 1 96 5年观察了猪卵泡液 (p FF)对小鼠卵母细胞减数分裂的作用 [1 ]以来 ,对p FF在猪卵母细胞体外成熟、体外受精和卵裂及体外胚胎发育中的作用已进行了深入研究。对 p FF组分的研究和应用 ,能促进卵泡液等重要生殖资源的充分利用 ,并有利于为生殖细胞的体外发育寻求新的培养基添加剂。 展开更多
关键词 猪卵泡 制备 体外受精
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胰岛素在能量影响猪卵泡发育中的作用 被引量:3
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作者 于淼瑛 周虚 《黑龙江动物繁殖》 2005年第2期12-15,共4页
胰岛素是体内具有重要生理作用的激素。能量是影响猪生长的主要因素。能量通过胰岛素,IGF-Ⅰ及葡萄糖等代谢信号作为媒介,影响垂体促性腺激素的分泌,这些代谢信号也可以直接作用于卵巢,影响性腺激素的分泌及卵泡的发育。而胰岛素是这其... 胰岛素是体内具有重要生理作用的激素。能量是影响猪生长的主要因素。能量通过胰岛素,IGF-Ⅰ及葡萄糖等代谢信号作为媒介,影响垂体促性腺激素的分泌,这些代谢信号也可以直接作用于卵巢,影响性腺激素的分泌及卵泡的发育。而胰岛素是这其中较重要的代谢信号之一。本文将介绍胰岛素在能量影响猪卵泡发育中的作用。 展开更多
关键词 胰岛素 能量 猪卵泡发育
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猪卵泡液提取物制备人抑制素α单抗的研究
4
作者 高晓东 丁明杰 +5 位作者 张志坚 宫亚欧 汤黎明 夏辉明 鲁桂琛 孙颖 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期30-32,共3页
目的制备人抑制素α(INHα)亚基多肽单克隆抗体(McAb)。方法以猪卵泡液粗提物为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS-1小鼠骨髓瘤细胞融合。杂交瘤细胞用人工合成的人抑制素α亚基37~65片段包被,间接ELISA法筛选。结果获稳定分泌抗... 目的制备人抑制素α(INHα)亚基多肽单克隆抗体(McAb)。方法以猪卵泡液粗提物为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与NS-1小鼠骨髓瘤细胞融合。杂交瘤细胞用人工合成的人抑制素α亚基37~65片段包被,间接ELISA法筛选。结果获稳定分泌抗人抑制素α亚基37~65片段单抗细胞3株。结论免疫学和免疫组化的结果表明3株细胞有特异性和实用性。 展开更多
关键词 人抑制素α 单克隆抗体 猪卵泡
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猪卵泡卵母细胞的体外成熟与体外受精
5
作者 徐小波 周晓龙 +1 位作者 于建宁 王公金 《养猪》 2012年第3期36-38,共3页
本试验对猪卵泡卵母细胞不同体外成熟培养时间、不同精子获能时间、不同精卵共孵育时间对体外受精的影响进行了研究。结果表明,体外成熟培养44 h左右,精子获能时间在1~2 h之间,精卵共孵育时间在6~8 h之间,受精后卵裂率最高。
关键词 猪卵泡卵母细胞 体外受精 体外成熟培养 精子获能
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氯化钴通过诱发DNA氧化损伤抑制猪卵泡颗粒细胞增殖的研究 被引量:1
6
作者 魏甲园 邾倩 +1 位作者 杨亚星 申明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期2982-2992,共11页
旨在探究氯化钴(CoCl_(2))诱导的DNA氧化损伤对猪卵泡颗粒细胞增殖的影响。本研究选取猪卵泡颗粒细胞作为试验材料,使用化学性低氧模型诱导剂CoCl_(2)处理猪卵泡颗粒细胞建立缺氧模型。前期研究已确定CoCl_(2)最适处理浓度,用200μmol&#... 旨在探究氯化钴(CoCl_(2))诱导的DNA氧化损伤对猪卵泡颗粒细胞增殖的影响。本研究选取猪卵泡颗粒细胞作为试验材料,使用化学性低氧模型诱导剂CoCl_(2)处理猪卵泡颗粒细胞建立缺氧模型。前期研究已确定CoCl_(2)最适处理浓度,用200μmol·L^(-1) CoCl_(2)处理猪卵泡颗粒细胞12 h,将培养出的传代细胞分成4组处理,分别为:对照组、CoCl_(2)诱导缺氧处理组、GSH处理组、GSH+CoCl_(2)联合处理组。对照组为完全培养基培养12 h,CoCl_(2)诱导缺氧处理组给予终浓度200μmol·L^(-1) CoCl_(2)的培养基培养12 h,单独GSH处理组加入浓度为2 mmol·L^(-1)的GSH处理12 h,GSH+CoCl_(2)联合处理组加入200μmol·L^(-1) CoCl_(2)和2 mmol·L^(-1)的GSH联合处理细胞后培养12 h。12 h后检测各组细胞增殖活性、ROS水平、γH2AX蛋白活性水平和Oxo-8-G水平。采用CCK-8法检测其增殖活性;采用双氯荧光素(2’,7’-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA)检测ROS水平;Western blot检测γH2AX蛋白活性水平,采用FITC荧光小鼠单克隆抗体检测Oxo-8-G水平。为了进一步明确CoCl_(2)诱导的颗粒细胞增殖阻滞与DNA氧化损伤的关系,本试验在CoCl_(2)处理的基础上添加抗氧化物GSH处理12 h后检测细胞增殖、ROS水平、DNA氧化损伤等相关指标。与对照组相比,200μmol·L^(-1) CoCl_(2)处理猪卵泡颗粒细胞后,细胞增殖活力极显著降低(P<0.0001),缺氧组ROS水平极显著升高(P<0.0001),γH2AX蛋白表达极显著升高(P<0.0001),Oxo-8-G水平极显著升高(P<0.0001)。与缺氧组相比,在CoCl_(2)处理基础上添加GSH后,ROS、Oxo-8-G、γH2AX水平极显著降低(P<0.0001),并伴随细胞增殖活性的显著恢复(P<0.0001)。CoCl_(2)可抑制猪卵泡颗粒细胞增殖活性,机制与诱导DNA氧化应激损伤有关。 展开更多
关键词 氯化钴 化学缺氧 猪卵泡颗粒细胞 细胞增殖 DNA氧化损伤
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世界首创用昆虫细胞表达重组猪卵泡刺激激素
7
作者 孙国凤 《生物技术通报》 CAS CSCD 1995年第3期19-19,共1页
群马大学生理活性物质中心助教授加藤幸雄小组用昆虫细胞表达重组猪卵泡刺激激素(FSH),确认重组FSH具有与天然FSH相同的生物活性。据说目前有用人、牛生产重组FSH的,但是用猪生产重组FSH是世界首创。得到了纯度高的FSH。它除对卵泡刺激... 群马大学生理活性物质中心助教授加藤幸雄小组用昆虫细胞表达重组猪卵泡刺激激素(FSH),确认重组FSH具有与天然FSH相同的生物活性。据说目前有用人、牛生产重组FSH的,但是用猪生产重组FSH是世界首创。得到了纯度高的FSH。它除对卵泡刺激激素的机能和作用机制的分析有用外,还能应用于猪体外受精系统的研究。于10日2~8日在新泻召开的日本畜产学会上发表了这项成果。 群马大学与日生研、大阪府立大学、东北农业试验场、冈山大学合作,在一个杆状病毒载体上插入了FSH的α链和β链两个基因,使昆虫细胞Tn5感染。 展开更多
关键词 昆虫细胞表达 猪卵泡 卵泡刺激激素 杆状病毒载体 生产重组 体外受精 作用机制 生物活性 东北农业 畜产学
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猪卵泡液中的一种非甾体抗原因子可阻断由雌二醇诱导的猴体LH峰
8
作者 袁其晓 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 1985年第1期41-42,共2页
临床使用人绝经期促性腺激素(hMG)以期刺激产生自然的卵巢周期,实践证明,不论治疗时间、用药剂量或是周期中所能达到的雌激素浓度,都难于出现自发的 LH 峰。同样,在用纯的 FSH 或hMG 刺激的猴,也证明若存在卵巢过度刺激可阻断雌激素对于... 临床使用人绝经期促性腺激素(hMG)以期刺激产生自然的卵巢周期,实践证明,不论治疗时间、用药剂量或是周期中所能达到的雌激素浓度,都难于出现自发的 LH 峰。同样,在用纯的 FSH 或hMG 刺激的猴,也证明若存在卵巢过度刺激可阻断雌激素对于 LH 峰的正反馈作用。作者提出当卵巢受到外源性刺激时可能分泌某种(或某些)因子,这些因子能阻断雌激素诱导的 LH 峰。已知猪卵泡液(pFF) 展开更多
关键词 LH 雌激素 BIO 雌性激素 性甾体 雌二醇 粗制剂 猪卵泡
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猪卵泡液(抑制素)抑制切除卵巢大鼠的FSH脉冲式分泌
9
作者 肖恩年 《国际生殖健康/计划生育杂志》 CAS 1985年第1期38-39,共2页
已知一些雌性哺乳动物 LH 的分泌是呈脉冲式的,但是尚未证实 FSH 的分泌是否也呈脉冲式,因此作者用切除卵巢的大鼠观察 FSH 分泌形式,并从猪卵泡液(PFF)中获得抑制素(inhibin),用以研究其对 FSH 分泌的影响。材料与方法成年雌性大鼠,实... 已知一些雌性哺乳动物 LH 的分泌是呈脉冲式的,但是尚未证实 FSH 的分泌是否也呈脉冲式,因此作者用切除卵巢的大鼠观察 FSH 分泌形式,并从猪卵泡液(PFF)中获得抑制素(inhibin),用以研究其对 FSH 分泌的影响。材料与方法成年雌性大鼠,实验前4周切除卵巢,静脉插入硅胶管,24小时后开始采血,每10分钟取血250μl,连续3小时。放射免疫法测定血FSH 和 LH 浓度,取血后补入等量盐水。 展开更多
关键词 FSH 放射免疫法测定 PFF 猪卵泡 抑制素 脉冲式 切除卵巢 大鼠
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猪卵泡内促卵丘扩展因子的来源 被引量:3
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作者 孙兴参 岳奎忠 +3 位作者 马所峰 伊亚玲 邹义 谭景和 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第15期1164-1166,共3页
猪卵丘的扩展不依赖于卵母细胞,因此推测,猪卵母细胞可能不是卵泡内促卵丘扩展因子(cumulus expansion enabling factor,CEEF)的惟一来源,实验应用小鼠摘除卵母细胞的卵丘-卵母细胞复合体(oocytectomized complex,OOX)检验猪透... 猪卵丘的扩展不依赖于卵母细胞,因此推测,猪卵母细胞可能不是卵泡内促卵丘扩展因子(cumulus expansion enabling factor,CEEF)的惟一来源,实验应用小鼠摘除卵母细胞的卵丘-卵母细胞复合体(oocytectomized complex,OOX)检验猪透明带、不同质量生发泡期卵母细胞以及卵泡内的其他细胞成分产生CEEF的情况。结果证明:(1)猪和小鼠的空透明带都不能产生CEEF。(2)猪不同质量(A,B,C三类)未成熟卵母细胞均能分泌CEEF,其分泌CEEF的能力和CEEF活性没有明显差异(P>0.05).(3)猪3~6mm卵泡的OOX和小于1mm卵泡的颗粒细胞都有较高的CEEF分泌能力,且此能力不依赖于激素作用;但3~6mm卵泡的壁颗粒细胞不能分泌CEEF。(4)3~6mm卵泡的卵泡液中含有CEEF,但其活性与培养时所用的卵泡液浓度有关,浓度过高CEEF活性反而下降。(5)进行培养时必须添加促性腺激素,小鼠OOX才发生扩展,说明由猪卵母细胞和卵泡成分产生的CEEF的促卵丘扩展作用依赖于促性腺激素。 展开更多
关键词 猪卵泡 促卵丘扩展因子 卵母细胞 卵丘-卵母细胞复合体 促性腺激素 分泌能力
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猪卵子体外受精研究
11
作者 王祖昆 雷春 +3 位作者 魏平华 王建忠 孔梅青 巫廷光 《草食家畜》 1992年第S1期96-99,共4页
本研究旨在探讨影响猪卵子体外成熟、猪精子体外获能和猪卵子体外受精的某些因素。主要研究:(1)猪卵体外成熟所需的时间;(2)促性腺激素和猪卵泡液对猪卵体外成熟的影响;(3)咖啡因、肝素和离子钙I-A_(23187)对猪精子体外获能的促进作用;... 本研究旨在探讨影响猪卵子体外成熟、猪精子体外获能和猪卵子体外受精的某些因素。主要研究:(1)猪卵体外成熟所需的时间;(2)促性腺激素和猪卵泡液对猪卵体外成熟的影响;(3)咖啡因、肝素和离子钙I-A_(23187)对猪精子体外获能的促进作用;(4)不同体外受精次数对猪卵体外受精结果的影响;(5)不同种类猪精液的体外受精能力。各试验组的结果比较主要根据体外受精后卵子的卵裂率,数据用卡方(x^2)进行统计学分析。 试验结果表明:(1)猪卵子体外成熟需要32—36小时,经32—36小时体外成熟的 卵子体外受精后卵裂率(2—4细胞期)达31.16%,明显高于其他对照组(P<0.01);(2)促性腺激素和猪卵泡液能够促进猪卵子体外成熟,当0.25国际单位/毫升PMSG和10%猪卵泡液,或者0.25国际单位/毫升FSH和10%猪卵泡液分别加入到猪卵子体外成熟中,经此培养后的猪卵子体外受精卵裂率分别达到23.95%和35.00%,明显高于对照组(P<0.05);(3)咖啡因、肝素、离子钙I-A_(23187)对猪精子体外获能有促进作用。在精子预培养液中加入0.05毫克/毫升肝索,在受精液中加入2毫克/毫升咖啡因,获得了体外受精后最高的卵裂率36.16%,明显高于其他组(P<0.01);(4)多次体外受精法有助于提高体外受精率,因为卵子的体外成熟是不同步的,但是超过2次又是有害的。 展开更多
关键词 体外受精 体外成熟 促性腺激素 猪卵泡 卵裂率 细胞期 精液 离子钙 国际单位 获能
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聚乙烯醇和卵泡液添加方式对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响
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作者 张笠 沈开元 +7 位作者 黄玥萌 司景磊 程晓芳 蒋钦杨 刘庆友 郭亚芬 兰干球 蒋和生 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1202-1207,共6页
本试验研究目的在于探讨在猪卵母细胞体外成熟(IVM)过程中,聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)和猪卵泡液(porcine follicular fluid,PFF)添加方式对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活早期胚胎发育的影响。卵母细胞、卵丘细胞复合体(COCs)在含... 本试验研究目的在于探讨在猪卵母细胞体外成熟(IVM)过程中,聚乙烯醇(polyvinyl alcohol,PVA)和猪卵泡液(porcine follicular fluid,PFF)添加方式对猪卵母细胞体外成熟及孤雌激活早期胚胎发育的影响。卵母细胞、卵丘细胞复合体(COCs)在含有HCG和PMSG的改良TCM-199+10%FBS+10%猪卵泡液(PMH-PFF)或改良TCM-199+10%FBS+0.1%PVA(PMH-PVA)成熟液中培养22~23 h;再移至无HCG和PMSG的PM-PFF或PM-PVA的成熟液中成熟培养至44 h。试验:(1)处理组1:使用PMH-PFF培养22~23 h后,更换PM-PFF继续培养至44 h;(2)处理组2:使用PMH-PFF培养22~23 h后,更换PM-PVA继续培养至44 h;(3)处理组3:使用PMH-PVA培养22~23 h后,更换PM-PVA继续培养至44 h;(4)处理组4:使用PMH-PVA培养22~23 h后,更换PM-PFF继续培养至44 h。将在不同成熟体系中IVM 44 h后的卵母细胞进行固定染色,鉴定卵母细胞核和细胞质成熟情况;对在不同处理组的成熟液中成熟培养44 h的卵母细胞进行孤雌激活后放入PZM-3中培养,分别于第2天、第7天统计分裂率和囊胚发育率。结果表明:经44 h成熟培养后,处理组1卵母细胞核成熟率(42.00%)显著低于处理组2(64.67%)、处理组3(69.00%)、处理组4(64.33%)核成熟率(p<0.05)。处理1、处理2、处理4的卵母细胞皮质颗粒分布类型Ⅲ比例(62.00%/54.67%/46.67%)均高于处理组3(28.67%),且处理组1、处理组2卵母细胞皮质颗粒分布类型Ⅲ比例显著高于处理组3卵母细胞皮质颗粒分布类型Ⅲ比例(p<0.05)。处理组1、处理组2、处理组4孤雌分裂率(81.92%/76.00%/73.33%)均高于处理组3(69.00%)。处理组3孤雌激活囊胚率(9.67%)显著低于处理组1(23.33%)、处理组2(25.00%)、处理组4(23.00%)(p<0.05)。结果表明,在本研究条件下,处理组2的各项指标均优于其它组,IVM液中添加猪卵泡液培养22~23 h后更换添加有PVA的IVM液继续培养至44 h,更有利于促进IVM猪卵母细胞核成熟、胞质成熟以及早期孤雌胚胎发育。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 PVA和猪卵泡液添加方式 孤雌胚胎发育
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体细胞核移植克隆民猪:培养液对卵母细胞成熟及胚胎发育的影响 被引量:19
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作者 刘忠华 田江天 +9 位作者 郑重 王振坤 宋军 尹智 高力 马海鹍 孔庆然 孙爽 李玉田 王洪斌 《中国科学(C辑)》 CSCD 北大核心 2007年第6期634-640,共7页
体外培养成熟的卵母细胞是进行克隆猪研究所需受体卵母细胞的主要来源,卵母细胞成熟质量与体细胞核移植胚胎发育能力关系密切.为提高卵母细胞体外成熟率和成熟质量,进而提高体细胞核移植猪的成功率,本实验以改进的TCM199培养液为基础液(... 体外培养成熟的卵母细胞是进行克隆猪研究所需受体卵母细胞的主要来源,卵母细胞成熟质量与体细胞核移植胚胎发育能力关系密切.为提高卵母细胞体外成熟率和成熟质量,进而提高体细胞核移植猪的成功率,本实验以改进的TCM199培养液为基础液(T),分别添加10%的猪卵泡液(T+pFF)和10%的胎牛血清(T+FBS)后进行卵母细胞成熟培养,以成熟率和体细胞核移植胚胎发育率等重要指标为标准,研究了pFF和FBS对卵母细胞成熟及核移植胚胎发育能力的影响.T,T+pFF和T+FBS组在成熟培养后42h卵母细胞成熟率分别为(53.2±3.8)%,(69.7±3.8)%和(70.2±3.7)%,添加10%的pFF和FBS显著(P<0.05)提高了卵母细胞成熟率;3组不同成熟培养液获得的成熟卵母细胞在体细胞核移植后囊胚发育率差异不显著,但T+pFF组的囊胚细胞数(34.5±2.24)显著(P<0.05)高于T组的囊胚细胞数(26.6±1.25).来自T+pFF组的体细胞核移植胚胎经手术法移植入发情周期为第0天或第1天的18头受体母猪输卵管,其中有3头受体母猪妊娠发育到期,获得克隆民猪14头,其中有6头健康成活至今.实验结果表明,培养液中添加10%pFF可以有效提高卵母细胞成熟比例和成熟质量,在含有10%pFF培养液中获得的成熟卵母细胞具有支持核移植胚胎全程发育的能力. 展开更多
关键词 体细胞核移植 体外成熟 胎牛血清 猪卵泡
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