几种猪囊尾蚴抗原用于斑点-ELISA法诊断囊尾蚴病的观察

本研究以囊液10000g上清、囊液100000g上清、全囊抗原、头节抗原和头节尿素溶解性抗原等5种囊尾蚴抗原，对124份各类血清进行斑点-ELISA试验，结果除2种囊液抗原外，都有很高的假阳性反应。2种囊液抗原中以100000g离心者为优，检测70例囊虫病患者，阳性率为82．8％；30例正常人，假阳性率为6．7％；5例血吸虫、5例华支睾吸虫及5例并殖吸虫患者血清，均未出现阳性反应；但9例包虫病患者血清均出现交叉反应。

猪囊尾蚴抗原诱生肿瘤坏死因子(TNF)和一氧化氮(NO)的观察

本文应用猪囊尾蚴囊液抗原刺激Ｃ５７小鼠腹腔巨噬细胞，诱生肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和一氧化氮（ＮＯ）。结果表明，抗原浓度在１０、５０和１００μｇ／ｍｌ分别刺激８、４和１ｈ即可检测出ＴＮＦ和ＮＯ，并且其活性随抗原浓度的增加、刺激时间的延长而增加。检测人体猪囊尾蚴结节１９个，每个囊结周围的巨噬细胞分泌ＴＮＦ和ＮＯ的阳性率为１００％。检测脑型和混合型猪囊尾蚴患者血清４１份，ＴＮＦ和ＮＯ阳性率分别为３９．０％（１６／４１）和４１．５％（１７／４１）；ＣＳＦ１５份，ＴＮＦ和ＮＯ的阳性率均为２６．７％（４／１５）。认为ＴＮＦ和ＮＯ可能为寄生虫感染早期的主要免疫保护因素，并参与带虫免疫。ＣＳＦ中ＮＯ的升高可能与脑囊虫患者的神经系统症状有关。

猪囊尾蚴抗原的纯化及其应用

猪囊尾蚴抗原的纯化及其应用胡亚梅，向莉，李宏河南省人民医院（４５０００３河南郑州）在猪囊尾蚴病的免疫诊断中，由于使用的抗原不同，所得结果也不尽一致［１、２］。本文就用Ａｆｆｉ－Ｇｅｌ（１０）凝胶进行免疫亲和层析，纯化后的猪囊尾蚴囊液抗原和囊液粗抗原，...

猪囊尾蚴期特异性抗原cC1的克隆与高效可溶性原核表达

目的克隆猪囊尾蚴期特异性抗原cC1基因,并进行高效可溶性原核表达。方法利用PT-PCR从猪囊尾蚴中获得cC1编码基因,T-A克隆后,将cC1插入原核表达载体pET28a中,经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌E.coli BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化表达条件,表达的融合蛋白Ni+-亲和层析柱纯化后经快速液相蛋白层析分离系统检测其纯度。采用SDS-PAGE和Western-blotting对目的蛋白进行分析和鉴定。结果RT-PCR扩增出的片段长度为1056bp,构建的重组表达质粒经PCR、酶切验证,和预期的结果一致,测序鉴定与Genbank中cC1基因相比于423位存在1个同义突变。转化有重组质粒的E. coli BL21(DE3)经过0.05mmol/LIPTG 37℃诱导6h高效表达了占菌体蛋白总量60%的可为囊虫病患者血清识别的相对分子质量约为40000的可溶性融合蛋白,经Ni+-亲和层析柱纯化后纯度达94%。结论成功克隆并高效可溶性原核表达了猪囊尾蚴期特异性抗原cC1,为其进一步研究和应用奠定了基础。

猪带绦虫抗原刺激囊虫病患者PBMC Th1/Th2细胞因子的表达及其免疫调节

目的检测猪带绦虫不同虫期抗原刺激囊虫病患者外周血单个核细胞(PBMC)Th1/Th2细胞因子的表达水平,并分析其在囊虫病免疫调控中的作用。方法用流式细胞仪检测囊虫病患者新鲜血T淋巴细胞亚群,并以猪带绦虫六钩蚴抗原或囊尾蚴抗原刺激囊虫病患者PBMC,分别在刺激的第0d、5d、10d和15d时检测Th1/Th2细胞因子(IFN-γ及IL-4),对分泌IFN-γ或IL-4的不同细胞群体进行数据分析。结果囊虫病患者新鲜血T淋巴细胞亚群CD3+与CD4+细胞较正常人升高,CD4+/CD8+较正常人升高,分泌IFN-γ及IL-4的CD3+细胞百分率较正常人升高;猪囊尾蚴抗原刺激囊虫病患者PB-MC第0d、5d、10d和15d时,分泌IFN-γ的CD3+细胞百分率分别为25.42%±5.53%,30.46%±4.94%,36.52%±4.73%,38.69%±5.58%;分泌IL-4的CD3+细胞百分率分别为2.52%±0.52%,3.00%±0.57%,3.81%±0.70%,5.03%±0.73%。六钩蚴抗原刺激囊虫病患者PBMC分泌IFN-γ及IL-4的CD3+细胞百分率亦呈现相同的变化趋势。结论囊虫病患者与正常人相比PBMC中存在T淋巴细胞的极化水平异常,CD3+与CD4+细胞百分率均显著升高,T细胞亚群比例失调,免疫功能紊乱;随着囊尾蚴抗原刺激外周血PBMC时间延长,分泌IFN-γ和IL-4的CD3+细胞百分率逐渐升高。

带科绦虫的膜联蛋白研究进展

膜联蛋白是一类依赖钙离子的磷脂结合蛋白家族。这类蛋白广泛存在于多种生物,如哺乳动物、霉菌和植物等物种中,常常与质膜或内膜系统相结合,具有依赖于钙离子的磷脂结合、抗凝合、抗炎症等生物学活性。由于膜联蛋白具备与钙离子结合的能力,

几种家畜寄生虫基因工程疫苗研究进展

1.囊虫及绦虫病疫苗 将编码绦虫保护性抗原的基因(45w)分别克隆到真核质粒表达载体pcDNA3和羊腺病毒载体(OAV200),构建成的pcDNA3-45W核酸疫苗和OAV205重组病毒疫苗,免疫接种羊后,诱发羊产生了特异性免疫应答,保护羊抵抗绦虫卵的攻击.