猪瘟兔化弱毒疫苗与猪圆环病毒2型灭活疫苗同时接种的免疫效果评价

为评价猪瘟兔化弱毒疫苗和猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗同时免疫效果,本实验采用猪瘟活疫苗(细胞源)和PCV2灭活疫苗(LG株)两种疫苗同时分点注射和混合注射35日龄仔猪,于免疫后间隔3周、5周、7周、9周采血,通过猪瘟病毒(CSFV)抗体检测试剂盒和PCV2抗体检测试剂盒进行CSFV和PCV2特异性抗体检测。结果显示,无论是两种疫苗同时颈部两侧分点分别注射,还是用PCV2灭活疫苗稀释CSFV活疫苗后混合免疫,免疫后3周CSFV和PCV2抗体均呈阳性,CSFV抗体滴度和PCV2抗体滴度于7周和9周达到峰值,与各疫苗单独免疫对照组抗体产生时间和滴度无明显差异。实验表明,两种疫苗可以同时注射或采用PCV2灭活疫苗稀释CSFV活疫苗进行免疫,均不影响各自免疫抗体的产生。因此,可以将PCV2灭活疫苗作为CSFV活疫苗的稀释剂,采用一次性注射的形式同时接种这两种疫苗,为简化这两种病临床疫苗免疫注射方面提供了实验依据。

不同乳化工艺对猪圆环病毒2型灭活疫苗稳定性的影响

为探讨乳化工艺中影响猪圆环病毒2型油包水剂型灭活疫苗的稳定性因素,以提升猪圆环病毒疫苗的质量,分别对圆环病毒抗原pH值、乳化剪切机转数、乳化时间进行筛选,并以疫苗黏度、粒径、保存温度评价疫苗稳定性。结果表明,抗原pH值为7.0~7.5时疫苗稳定性较好;剪切机转数越高,乳化时间越短,乳化效果越好,样品稳定性较高;在一定的时间内样品随乳化时间的延长,样品稳定性增强,但黏度不断增大。在本试验条件下,选择抗原pH值7.0~7.5,剪切机转数19 000r/min,乳化时间8min乳化的样品稳定性好,黏度合适,建议不同厂家在疫苗产业化生产时需调节抗原pH值至7.0~7.5,根据不同的乳化设备进行乳化试验摸索乳化剪机的转速及乳化时间,从而保证疫苗的稳定性。

猪圆环病毒2型灭活疫苗安全性及免疫效力的评价

为了对制备的猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)灭活疫苗进行安全性及免疫效力的评价,本试验将3批次猪圆环病毒2型灭活疫苗以2倍剂量接种PCV2阴性仔猪后,进行了安全性分析抗体检测和攻毒试验。结果显示:3批次疫苗以2倍剂量接种仔猪后,仔猪均无异常临床反应,可达到1∶1600以上,而攻毒对照组及空白对照组仔猪的抗体水平均在1∶400以下;攻毒后免疫组可以达到100%保护,攻毒对照组出现100%发病。结果表明,所制备的猪圆环病毒2型灭活疫苗对仔猪不仅安全性好,而且可以为仔猪提供有效的保护,为疫苗推广奠定了重要基础。

猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体二联灭活疫苗与猪瘟活疫苗混合免疫效果评价

为评价猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体二联灭活疫苗(以下简称圆支二联苗)与猪瘟活疫苗混合免疫效果,本研究利用圆支二联苗作为稀释剂稀释猪瘟(CSFV)活疫苗,稀释后的混合疫苗在室温放置0、1 h、2 h取样测定CSFV含量,结果显示放置2 h CSFV含量未下降,表明圆支二联苗作为稀释剂不影响CSFV含量。用圆支二联苗对仔猪首次免疫,首免后14 d用稀释后的混合疫苗二免,分别在二免后21 d和28 d利用猪圆环病毒2型(PCV2)和猪肺炎支原体(Mhp)攻毒,结果显示圆支二联苗和CSFV活疫苗混合使用的免疫效果与单独使用圆支二联苗的免疫效果相当,针对PCV2的攻毒保护率均为80%,针对Mhp攻毒,混合疫苗免疫的仔猪肺炎病变减少率分别为73.1%和75.0%。此外,分别在混合疫苗和CSFV活疫苗免疫仔猪后不同时间采血,检测血清中CSFV抗体水平,结果显示混合疫苗免疫一次与CSFV活疫苗免疫一次后CSFV抗体水平相当。以上结果表明圆支二联苗可以作为稀释剂稀释CSFV活疫苗,一次性注射免疫,各疫苗免疫效力均不受影响。本研究为临床免疫程序优化及相关疫病的防制提供了实验依据。

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫试验

采用勃林格殷格翰动物保健公司生产的猪圆环病毒2型杆状病毒载体灭活疫苗,在光明农牧科技有限公司3个畜牧场分别进行免疫核心试验。结果显示,相比对照组,实验组猪成活率、日增重、整齐度等都有较大的改善,投入产出经济效益较好。

猪圆环病毒2型灭活疫苗细菌内毒素凝胶法的检测

为建立猪圆环病毒2型灭活疫苗(WH株)细菌内毒素检测方法,监测疫苗样品中的内毒素含量。本研究分别使用湛江安度斯和厦门生物的鲎试剂采用凝胶法对猪圆环病毒2型灭活疫苗(WH株)进行细菌内毒素检测。结果显示,当供试品稀释至40倍或以上稀释度(最大有效稀释倍数范围内)时对内毒素检查均无干扰。湛江安度斯鲎试剂和厦门生物鲎试剂对7批猪圆环病毒2型灭活疫苗(WH株)的细菌内毒素检测浓度均小于10 EU/ml。该结果表明采用凝胶法可对猪圆环病毒2型灭活疫苗(WH株)进行细菌内毒素检测。

中国首个“猪圆环病毒2型灭活疫苗”获准上市

由洛阳普莱柯生物工程有限公司（以下简称＂普莱柯公司＂）研制的＂猪圆环病毒2型灭活疫苗＂于2010年8月27日获得中华人民共和国新兽药注册证书【证号：（2010）新兽药证字25号】（《中华人民共和国农业部公告第1448号》颁布）,并获得农业部批准独家上市。

猪瘟病毒-猪圆环病毒2型疫苗联合免疫效果的评价

为建立一种既有效又简便的猪瘟和猪圆环病毒病疫苗联合免疫方法,通过细胞感染试验和动物免疫试验,评价了猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗和猪瘟病毒(CSFV)冻干活疫苗联合免疫的可行性。通过细胞感染试验证明了PCV2灭活疫苗稀释CSFV冻干活疫苗不影响CSFV疫苗的病毒活性;将PCV2灭活疫苗稀释的CSFV冻干活疫苗免疫试验猪群(联合免疫),以2种疫苗分边单独免疫的猪群为对照,在免疫后4、7、14、28、60和90 d采集血清检测2种疫苗对应的抗体,经统计学分析发现,2种疫苗的联合免疫不影响其抗体的产生,并且能够保持抗体在猪群个体间的稳定分布。

一种猪圆环病毒疫苗的免疫效果评估

为评价湖南某企业所生产的猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果,在一存栏450头的母猪场选择40头妊娠85天左右的母猪,随机分为试验组和对照组(每组20头母猪),对照组母猪每头接种2m L生理盐水,试验组母猪每头接种1头份(2m L/头份)猪圆环病毒2型灭活疫苗,接种后对所用疫苗的安全性、免疫效果和母猪免疫后的生产成绩做了评估。结果显示:两组母猪接种疫苗后均未出现红肿、起包及流产等症状;试验组母猪免疫后两周病毒血症阳性率下降特别明显,而对照组的病毒血症阳性率随着时间的延长,比率在逐渐增加;试验组的母猪其各项生产指标明显优于对照组母猪。

三种猪用疫苗联合免疫的可行性分析

为简化免疫程序,减少免疫次数,降低反复多次免疫对猪只的应激,采用三种猪用疫苗联合免疫进行可行性分析。首先将猪瘟、猪丹毒、猪多杀性巴氏杆菌病三联活疫苗与猪伪狂犬病活疫苗进行混合,测定了混合后猪瘟病毒、伪狂犬病病毒、猪丹毒杆菌和多杀性巴氏杆菌的活性。同时,在试验猪群中开展混合疫苗与猪圆环病毒2型灭活疫苗同步两点注射的联合免疫效果评价。结果显示,三联活疫苗和猪伪狂犬病活疫苗的混合疫苗与猪圆环病毒2型灭活苗的联合免疫不会降低疫苗的免疫效果,且能够达到较单独免疫更好的免疫效果,表明采用三种猪用疫苗进行联合免疫是完全可行的。

不同佐剂对猪圆环病毒2型灭活抗原免疫效果的影响

为了筛选到能有效提高猪圆环病毒2型(PCV2)灭活抗原免疫原性的佐剂,将ISA206、ISA15A、GEL、CP934、CP940五种佐剂与PCV2灭活抗原混合,配制疫苗后,进行小鼠免疫试验及猪体攻毒保护性试验。小鼠免疫试验结果显示,ISA206和ISA15A组的ELISA抗体、中和抗体水平和淋巴细胞转化试验刺激指数都显著高于空白对照组(P<0.05),但ISA206组与ISA15A之间无显著差异(P>0.05)。猪体攻毒保护试验结果显示,ISA206组的ELISA抗体水平、中和抗体水平明显高于其他组(包括ISA15A组)(P<0.01),二免后ISA206免疫组淋巴细胞转化试验刺激指数与ISA15A组之间差异不显著(P>0.05),但显著高于其他组(P<0.01)。攻毒后,ISA206组仔猪相对日增重高于其他各组(P<0.01),体内带毒和体外排毒的仔猪数量最少(各2头)、持续时间最短(分别在第11天和第7天消失)。病理切片显微观察显示,攻毒后ISA206组的组织病理变化最为轻微。上述结果说明,佐剂ISA206配制的疫苗免疫效果明显优于其他佐剂疫苗。