猪圆环病毒2型抗体胶体金免疫层析检测方法的建立

为建立便捷、快速检测猪圆环病毒2型(PCV2)抗体的免疫层析方法,本研究利用G蛋白标记胶体金制备金标垫,以PCV2病毒样颗粒(VLPs)和兔Ig G分别作为检测线与质控线组装胶体金试纸条。检测结果显示,该试纸条与A型塞内卡病毒(SVA)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)等猪其它病毒抗体阳性血清无交叉反应,仅对PCV2抗体阳性血清具有高度的特异性;对PCV 2阳性血清最低检测限为1∶6 400稀释度,敏感性较高;批内、批间变异系数CV均小于5%,重复性较好。试纸条在4℃保存6个月,其特异性和敏感性无明显变化。对采集的100份临床血清样品进行检测,该方法与标准ELISA的总符合率为98%。表明本研究建立的PCV2抗体的胶体金免疫层析检测方法具有敏感、特异、稳定等特点,可以做为评价PCV2疫苗免疫效果及其感染筛查的检测方法。

某规模猪场猪圆环病毒2型感染抗体检测与防制

应用ELISA方法检测广西南宁某猪场在不同时段血清样品的猪圆环病毒2型抗体(PCV2),同时制定一系列详细、科学饲养管理制度、生物安全体系以及免疫防治的措施,经过一年半时间的净化,猪群中猪圆环病毒2型抗体阳性率由35%下降到7.5%。结果表明,该猪场制定的防制商品猪和种猪群PCV2的综合措施行之有效,值得规模化猪场借鉴。

福建漳州市规模猪场伪狂犬病野毒和猪圆环病毒2型感染的血清学调查

为了解漳州地区猪伪狂犬病野毒和猪圆环病毒2型感染状况,2013—2014年笔者选择漳州市50个规模猪场开展血清学调查。调查结果表明:2013年、2014年规模猪场伪狂犬病野毒抗体阳性率分别为58.8%、51.5%,其中母猪血清学样品阳性率26.4%、35.0%,仔猪血清学样品阳性率19.4%、19.7%;2013年、2014年规模猪场猪圆环病毒2型抗体阳性率分别为64.7%、78.8%,其中母猪血清学样品阳性率54.2%、90.0%,仔猪血清学样品阳性率33.3%、74.2%。规模猪场两种病的混感率由2013年的29.4%上升到2014年的42.4%。规模猪场在净化伪狂犬病野毒的同时,要做好猪圆环病毒2型的免疫,才能取得比较理想的防治效果,提高猪场的经济效益。

Preparation and Identification of Specific Monoclonal Antibody against Porcine Circovirus Type 2

BALB/c mice were immunized using synthetic tandem polypeptide of Cap protein epitope of porcine circovirus type 2 （PCV2） as the antigen. By using lym-phocyte hybridoma technique, a hybridoma cellline stably secreting monoclonal an-tibody against PCV2-rCap protein was successful y obtained and named as 670#. The ascites titer of the obtained monoclonal antibody was 1∶100 000. Western blot results showed that the monoclonal antibody could react with prokaryotical y ex-pressed PET32a-ORF2 recombinant protein, eukaryotical y expressed ORF1-ORF2 tandem protein and PCV2 whole virus celllysate. Indirect EILSA demonstrated that the monoclonal antibody could bind with ORF1-ORF2 tandem protein. Indirect im-munofluorescence assay （IFA） indicated that the monoclonal antibody could identify native PCV2 virus. The preparation of this monoclonal antibody provided technical tools for epitope analysis and molecular diagnosis of PCV2 virus.