猪抗人淋巴细胞球蛋白与兔抗人胸腺细胞球蛋白治疗重型再生障碍性贫血的疗效比较

目的比较猪抗人淋巴细胞球蛋白（ALG）与兔抗人胸腺细胞球蛋白（ATG）治疗重型再生障碍性贫血（再障）的疗效。方法回顾分析2004~2013年接受免疫抑制治疗的重型再障患者（猪ALG组43例,兔ATG组32例）6个月有效率,χ2检验比较组间差异。Kaplan-Meier法绘制生存曲线,log-rank检验比较组间差异。结果猪ALG组6个月有效率为79.07%,高于兔ATG组（56.25%）且差异显著（P=0.034）;5年总生存率为86.047%,高于兔ATG组（72.878%）,但差异不显著（P=0.190）。结论猪ALG血液学应答优于兔ATG,预后和安全性相似。

猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白联合环孢菌素A治疗重型再障的临床疗效

目的探讨使用国产猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白(p-ALG)联合环孢菌素A(CsA)治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的疗效及观察不良反应。方法应用p-ALG(30mg/kg/d,静脉滴注)联合CsA(起始量为5mg/kg/d)治疗SAA 8例,辅以促造血、成分血输注、造血生长因子等支持治疗。检测治疗前后外周血象及骨髓象变化,以流式细胞仪测定治疗前后外周血T淋巴细胞亚群的改变情况,观察不良反应及其处理效果。结果随访8例中,基本治愈2例,缓解3例,明显进步1例,早期死亡2例,总有效率75%。治疗显效时患者的外周血CD3+CD4+(Th)细胞比例升高,CD3+CD8+(Ts)细胞比例降低,Th/Ts比值升高,与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论使用国产p-ALG联合CsA作为初诊SAA的首次治疗方案效果良好,治疗费用较马或兔抗胸腺细胞免疫球蛋白(ATG)联合CsA方案更经济。

国产猪抗人淋巴细胞球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血的效果

目的探讨国产猪抗人淋巴细胞球蛋白(p-ALG)联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血(SAA)的效果及安全性。方法分析2004年4月~2016年12月江苏省连云港市第一人民医院血液科应用国产p-ALG联合环孢素治疗30例SAA患者的有效性、安全性并长期随访统计分析五年生存率。结果 30例SAA患者中位年龄为26.5(5~65)岁,随访中位时间为60(1~252)个月,6例死亡,总有效率为73.3%,中性粒细胞>0.5×109/L,中位时间为20(2~40)d,脱离红细胞输注的中位时间为30(0~150)d,脱离血小板输注的中位时间为35.5(5~140)d。五年生存率达78%,不良反应均能耐受,花费少。结论国产p-ALG联合环孢素治疗SAA的长期效果显著,不良反应轻微,值得临床推广。

抗人胸腺细胞免疫球蛋白与抗人T淋巴细胞免疫球蛋白体外淋巴细胞杀伤效价的比较

目的探讨相同浓度下抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）与抗人T淋巴细胞免疫球蛋白（ALG）杀伤淋巴细胞的效价。方法将相同浓度的ATG和ALG倍比稀释,对正常受试者外周血淋巴细胞进行淋巴细胞毒试验（CDC）,用流式细胞仪进行相关检测。结果体外淋巴毒试验中,ATG和ALG对6名健康志愿者外周血淋巴细胞的杀伤作用随着稀释滴度的增加逐渐下降。ATG及ALG滴度为1∶1时对淋巴细胞杀伤比率分别为54.06%～82.49%和38.06%～70.38%;ATG在1∶128时杀伤比率〈10%,ALG在1∶64时杀伤比率〈10%。ATG和ALG对外周血T淋巴细胞杀伤差异无统计学意义（P〉0.05）,对B淋巴细胞杀伤差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ATG和ALG均可显著清除正常人外周血淋巴细胞。相同浓度下,ATG的效价大约是ALG的2倍。ATG较ALG有更强的清除B细胞的作用。

猪抗淋巴细胞免疫球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血疗效观察

目的探讨猪抗淋巴细胞免疫球蛋白与环孢素联合应用于治疗重型再生障碍性贫血(再障)的临床疗效及临床转归。方法 50例重型再障患者作为研究资料,治疗组给予猪抗淋巴细胞免疫球蛋白与环孢素联合治疗,对照组给予猪抗淋巴细胞免疫球蛋白治疗,观察并对比两组患者疗效、起效时间以及不良反应。结果治疗组总有效率明显高于治疗组,基本治愈率、明显缓解率以及有所改善率均高于对照组。经过治疗后两组患者白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)以及血小板(PLT)均明显升高,但治疗后治疗组WBC、HGB以及PLT均明显高于对照组。治疗组平均起效时间、牙龈增生出现例数明显高于对照组,另出现5例手颤,3例继发性糖尿病,而对照组未发现此类不良反应。结论猪抗淋巴细胞免疫球蛋白与环孢素联合应用于治疗重型再障疗效优于单用猪抗淋巴细胞免疫球蛋白治疗,但不良反应较单用猪抗淋巴细胞免疫球蛋白治疗更多,可以推荐应用,如何防治并发症仍值得思考。

猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白致急性溶血2例报道

[目的]报道猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白治疗急性再生障碍性贫血中引起溶血的副反应,探讨可能引起溶血的原因。[方法]对2010年6月至2011年10月我科应用猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白治疗急性再生障碍性贫血出现急性溶血的2例患者进行回顾性分析,报道其对疗效的影响及有效控制溶血措施,讨论其出现药物相关急性溶血的原因。[结果]2例患者出现溶血症状后,立即停用ALG,给予甲强龙,水化碱化,输注洗涤红细胞治疗,3～5d后患者溶血症状均得到控制,其中1例患者疗效无明显影响。[结论]猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白作为国产的一种生物制剂,在治疗急性再生障碍性贫血中出现溶血可能与药物免疫动物的来源及使用剂量有关。再生障碍性贫血患者本身全血细胞减少,一旦发生重症溶血往往病情急重,在用药过程中,应密切观察患者的临床表现,以确保用药安全。

低温乙醇法纯化抗人T细胞猪免疫球蛋白的研究

用健康人T淋巴细胞免疫猪,检测指标合格后采集猪血浆,经热吸收去除相应的杂抗体后,用改进的低温乙醇法分离纯化得到抗人T细胞猪免疫球蛋白。试生产5批,其主要质量指标均符合《中国药典》的要求,表明改良的低温乙醇法可用于纯化抗人T细胞猪免疫球蛋白。

抗人T细胞猪免疫球蛋白与咪唑立宾致肾移植术后患者严重骨髓抑制并发感染死亡1例

1病例资料患者女,55岁,慢性肾功能不全尿毒症期。于2016年1月2日行肾移植术,术中给予兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）100 mg,ivd,诱导抗体治疗。术后继续使用ATG 200mg,qd,共2 d。

猪抗人淋巴细胞球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血的疗效及安全性分析

目的分析和探讨猪抗人淋巴细胞球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血的临床效果与安全性。方法 30例重型再生障碍性贫血患者随机分为观察组和对照组,各15例。观察组采用猪抗人淋巴细胞球蛋白联合环孢素治疗,对照组患者采用环孢素治疗,比较两组患者临床治疗效果与不良反应发生情况。结果观察组治疗有效率明显高于对照组,但同时不良反应发生率高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论在重型再生障碍性贫血治疗中,猪抗人淋巴细胞球蛋白联合环孢素治疗效果显著,但不良反应较多,在使用时应注意并发症及不良反应的防治。

分析雷公藤多苷片联合猪抗人淋巴细胞球蛋白治疗重型再生障碍性贫血的临床价值

目的观察雷公藤多苷片联合猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白在重型再生障碍性贫血治疗中的应用效果。方法随机选取本院60例重型再生障碍性贫血患者,选取时间2019年1月-2020年5月,分组基于平行对照法,每组30例;对照组采取单一的猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白治疗,观察组联合雷公藤多苷片与猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白,对比治疗效果。结果治疗总有效率方面,观察组(90.00%)比对照组(66.67%)高,差异明显(P<0.05);Hb及WBC方面,两组治疗前对比,差异较小(P>0.05);观察组治疗后更高,与对照组比较,差异显著(P<0.05)。结论给予重型再生障碍性贫血患者雷公藤多苷片与猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白治疗,不仅能够改善患者血常规指标,同时可促进整体治疗效果和生活质量的提高,值得临床采纳、推广。

3种抗人T淋巴细胞免疫球蛋白淋巴细胞毒效价检测方法比较

目的通过比较3种淋巴细胞毒效价检测方法测定抗人T淋巴细胞免疫球蛋白免疫血清及原液样品的效价结果, 阐明3种检测方法的相关性。方法采用中国药典2020年版三部淋巴细胞毒效价检测方法、基于人外周血单个核细胞的淋巴细胞毒流式检测方法及基于人白血病T细胞株(Jurkat细胞)的淋巴细胞毒流式检测方法测定3批次免疫血清及3批次原液的效价。免疫血清稀释128、256及512倍进行效价检测, 判定效价;原液稀释8~2 048倍进行检测, 计算半数效应浓度。结果中国药典方法与基于人外周血单个核细胞流式法检测3批次免疫血清的效价均为1∶512;基于Jurkat细胞流式法检测001批次免疫血清的效价为1∶512, 002与003批次免疫血清的效价为1∶256。3种方法测定3批次原液的效价结果与阳性对照Grafalon的活性水平相当, 不同方法检测的效价趋势基本一致。结论虽然3种方法测定免疫血清与原液的效价结果趋势基本一致, 但淋巴细胞毒流式检测方法操作更便捷, 且可定量测定半数效应浓度值。

人外周血TIM3基因敲除T淋巴细胞的制备及其抗肿瘤作用

目的:通过CRISPR-Cas9基因编辑技术及质粒电转染技术制备T细胞免疫球蛋白黏液素3(TIM3)基因敲除的人外周血T淋巴细胞,探讨敲除TIM3基因后能否增强T细胞免疫功能及其抗肿瘤作用。方法:通过电转染法将hTIM3 sgRNA/Cas9双质粒共转染EBV阳性胃癌患者外周血T淋巴细胞,电转24 h后流式细胞术检测转染效率并利用荧光显微镜观察;体外培养过程中观察基因敲除后T细胞增殖活性,流式细胞术验证TIM3基因敲除效率以及细胞表型的变化。用肿瘤抗原肽活化T细胞检测TIM3基因敲除后T细胞分泌细胞因子水平及体外杀伤胃癌AGS-EBV细胞的能力。结果:电转染法能够有效地将hTIM3 sgRNA/Cas9双质粒敲除体系转入人外周血T淋巴细胞,其转染效率平均达(41.5±3.6)%,基因敲除效率波动在40.0%～50.0%(均P<0.01);经抗原活化后的基因敲除组T细胞的增殖活性和免疫表型未见明显变化,表面活化分子中仅见HLA-DR较对照组明显提高(P<0.05);TIM3基因敲除T细胞分泌TNF-α、IFN-γ的水平显著增高(P<0.01或P<0.05),体外杀伤胃癌AGS-EBV细胞的能力也明显增强(均P<0.05)。结论:用CRISPR-Cas9基因编辑及质粒电转染技术制备人外周血TIM3基因敲除T淋巴细胞的方法简易可行,在体外的扩增活化中保持TIM3基因水平下调并具有更高的免疫应答水平以及更强的抗肿瘤作用。这一新技术的研发为基因工程化细胞免疫治疗提供了新的思路。

ATG/ALG方案治疗再生障碍性贫血的临床效果及对T淋巴细胞的影响

目的:探讨采用以抗胸腺免疫球蛋白(ATG)/抗淋巴细胞球蛋白(ALG)为主的免疫抑制方案治疗重度再生障碍性贫血(SAA)的临床效果及对T淋巴细胞的影响。方法:选取52例SAA患儿的临床资料进行回顾性分析,根据临床治疗方案不同分为观察组32例和对照组20例,两组患儿均给予环孢菌素A、雄激素、造血因子等基础治疗,观察组加用了ATG/ALG。结果:观察组患儿的治疗总有效率(81.25%)显著的高于对照组(60.00%)(P<0.05);治疗后两组患儿的白细胞(WBC)、血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)水平较治疗前均显著的提高(P<0.05),观察组较对照组提高效果更加显著(P<0.05);治疗后两组患儿的CD3+、CD+、CD8+、CD3+/CD8+水平较治疗前均显著的降低(P<0.05),治疗后观察组的CD3+、CD4+、CD3+/CD8+水平显著的低于对照组(P<0.05);观察组和对照组在治疗过程中发生发热、皮疹、血清病、肝损害、肾损害的发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ATG/ALG为主的免疫抑制方案治疗SAA患儿效果显著,且安全性较高。

异体手移植术后ATG治疗过程中T淋巴细胞亚群的监测(附3例报告)

目的探讨异体手移植中使用抗胸腺细胞球蛋白(ATG)治疗时T淋巴细胞亚群监测对于指导药物用量、减少并发症和减少治疗费用的意义。方法通过流式细胞仪测定我院完成的3例异体手移植患者外周血中T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD28、CD4/CD8)的变化。结果使用ATG治疗期间CD3、CD4、CD8均明显下降,3例患者无明显差异;ATG治疗后外周血中淋巴细胞长期持续改变。结论通过T淋巴细胞亚群的监测了解患者应用ATG后免疫状态,有利于调整ATG用量,预防并发症的发生。

传代人淋巴细胞免疫猪的免疫效果初探

目的用传代人淋巴细胞替代人T淋巴细胞进行猪的免疫,用于试制抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,P-ATG)免疫猪血浆,并评价其免疫效果。方法大量培养传代人淋巴细胞至免疫所需浓度及数量,采用常规猪免疫程序进行2次基础免疫及1次加强免疫,获得免疫猪血浆,用E玫瑰花环形成抑制试验和淋巴细胞毒试验进行效价检测。结果3批免疫猪血浆的E玫瑰花环形成抑制试验结果均达到1∶1000(花环形成率均小于对照组平均花环形成率的75%),淋巴细胞毒试验结果均达到1∶500(淋巴细胞死亡率均大于20%),效价均达到《中华人民共和国药典》2015版(三部)中生产用免疫猪血浆的效价标准。结论传代人淋巴细胞可作为人T淋巴细胞的替代免疫原进行猪的免疫,获得了效价合格的免疫猪血浆,用于P-ATG的制备。

抗人T淋巴细胞猪免疫球蛋白对小鼠再生障碍性贫血的影响

目的探讨抗人T淋巴细胞猪Ig对再生障碍性贫血小鼠骨髓象及骨髓粒系、红系和巨核系的影响。方法 ICR小鼠60只,雄性,3～4周龄;体质量16～18g;随机分为A组(1000mg·kg-1受试品)、B组(500mg·kg-1受试品)、C组(250mg·kg-1受试品)、D组(1000mg·kg-1阳性对照组)、E组(模型组)、F组(9g.L-1盐水组),每组10只。小鼠皮下注射2.5g.L-1苯玉米油溶液复制再生障碍性贫血模型,骨髓涂片Wright染色,光镜大体观察;油镜下进行骨髓涂片分类计数、骨髓细胞混悬液有核细胞计数。结果 1000mg·kg-1受试品组骨髓片有核细胞多数呈增生活跃状态,部分呈增生减低趋势;500mg·kg-1受试品组骨髓片有核细胞增生减低;250mg·kg-1受试品组骨髓片有核细胞增生明显减低,骨髓小粒造血细胞减少;模型组骨髓片有核细胞增生极度减低,骨髓小粒造血细胞明显减少,但500mg·kg-1、250mg·kg-1受试品组和模型组的淋巴细胞数量较9g.L-1盐水组稍增多,纤维细胞等非造血细胞增加;1000mg·kg-1阳性对照组结果与1000mg·kg-1受试品组结果相同。骨髓有核细胞计数显示,与模型组比较,高、中剂量的受试品组及阳性对照组骨髓有核细胞数明显增加。结论抗人T淋巴细胞猪Ig可明显改善再生障碍性贫血动物的骨髓象。

ATG用于异体造血干细胞移植前预防移植物抗宿主反应

目的分析异体造血干细胞移植前加用抗T淋巴细胞球蛋白（ATG）预防移植物抗宿主反应（GVHD）的疗效。方法27例白血病患者分为两组，每组移植供体来源及病种类似，分别有同胞兄妹、无关供体和人类白细胞抗原（HLA）半相合供体。A组（n=12）：采用经典的CsA＋MTX预防GVHD；B组（n=15）：采用CsA＋MTX＋ATG预防GVHD。结果B组15例患者全部存活，除4例出现Ⅱ°急性GVHD（aGVHD）外，其余11例均在移植后30d左右仅出现Ⅰ°GVHD，并很快控制。A组12例患者中，3例HLA半相合移植患者分别在移植后第7、9和10天即出现Ⅳ。超急性GVHD，另有1例无关供体患者出现Ⅲ°aGVHD，该4例患者由于重度GVHD继发肺部感染而死亡；其余8例同胞之间的移植分别出现Ⅱ°～Ⅲ°aGVHD。结论在异体造血干细胞移植前应用ATG可以有效预防GVHD的发生或减轻GVHD的严重度，明显减少移植相关死亡率。

抗人T淋巴细胞猪免疫球蛋白急性毒性实验研究

目的观察拟生产药物抗人T淋巴细胞猪免疫球蛋白(ALG)对小鼠的急性毒性作用。方法 ICR小鼠,体质量18～22g,雌雄各半,分别采用腹腔注射限度试验和尾静脉注射最大受试药量试验法,连续观察14d后处死全部小鼠,并进行尸体解剖、大体肉眼观察,发现异常的组织或器官进行病理切片送检。结果两种试验方法结果均显示:所有试验动物存活,供试品的LD50>5g/kg,但尾静脉注射最大给药量试验时,发现给药2d内动物的一般情况较差,处死并解剖后发现用药组有少数小鼠出现肝、肾的感染性侵害。结论 ALG的LD50值大于5g/kg,约相当于临床用量的250～333倍,提示该药物比较安全,但在过量静脉注射后短期内对小鼠仍有一定毒性。

猪抗人淋巴细胞球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血

目的 评价猪抗人淋巴细胞球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血的疗效及安全性,并分析影响疗效的相关因素。方法 回顾性分析2002年1月至2012年3月本院32例应用抗人T细胞猪免疫球蛋白（第1～5日,20～30 mg·kg^-1·d^-1）联合环孢素（起始量3～5 mg·kg^-1·d^-1）治疗的重型再生障碍性贫血患者资料。评价治疗3、6、12个月末的临床疗效及不良反应发生情况,并分析患者性别,年龄,治疗前中性粒细胞、淋巴细胞、网织红细胞计数与疗效的关系。结果 治疗12个月末,32例患者中14例基本治愈（44%）、7例缓解（22%）,3例明显进步（9%）,8例无效（25%）,总有效率为75%。主要不良反应为发热（56%）、皮疹（44%）、血清病（19%）、肝功能损害（25%）。单因素分析表明诊断至治疗的时间〈30 d、治疗前中性粒细胞≥0.2×109·L^-1及治疗前无合并感染的患者有效率高于诊断至治疗的时间≥30 d、治疗前中性粒细胞〈0.2×10^9·L^-1及治疗前合并感染的患者（P〈0.05）,患者性别、年龄、治疗前网织红细胞计数对疗效影响不大;Logistic回归分析表明诊断至治疗的时间是影响疗效的唯一因素（P〈0.05）。结论 猪抗人淋巴细胞免疫球蛋白联合环孢素治疗重型再生障碍性贫血疗效理想,不良反应可耐受。诊断至治疗的时间、治疗前中性粒细胞水平及是否合并感染是影响疗效的主要因素。