猪气喘病实验猪模型的建立

目的研究建立猪气喘病人工发病模型。方法将分离得到的一株猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)Js株进行各种试验鉴定,证实其为Mhp强毒株。每头猪肺内接种Js株培养物2ml,15～25d后观察临床症状和病理变化,采集病变组织,经冻干制成攻毒用组织毒。安检合格,批号为20000324。给15头小梅山二元杂交猪分别气管内注射以KM_2培养基作10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)和10^(-5)稀释的强毒,每头猪5ml,对照组注射培养基。攻毒后25d观察试验猪临诊症状,X线透视,记录病理变化。结果10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)稀释的强毒试验组猪均出现了典型的猪气喘病临床症状和病理变化。结论人工发病试验测得Mhp Js株组织强毒接种气管内注射最小发病剂量为10^(-4)稀释5ml,正式试验人工发病可用100个最小发病剂量即强毒冻干物1:100稀释气管内注射5ml,可确保攻毒成功。

脊髓损伤猪模型建立的一般过程

脊髓损伤（SCI）的发病率随着现代交通和建筑事业的发展而逐年上升,给患者及患者家属带来极大的精神及经济负担。尽管对于SCI患者的临床处理已经有一定提高且可采用多种手段限制继发性损伤,但患者神经功能的恢复依旧有限,众多患者依然长期伴随神经功能不全或丧失。因此,科研工作者们尝试从多方面找寻SCI治疗的方式和方法,例如干细胞移植〔1〕、MicorRNA调节通路〔2〕、神经再生〔3〕、低温〔4〕、电刺激〔5〕、

高肺血流致肺动脉高压幼猪模型中血清内皮素水平的变化

目的研究高肺血流幼猪模型肺动脉血流动力学及组织学变化与血清内皮素的关联性。方法采用生后2-3月龄的幼猪,体重10-12kg,分为两组,每组12只。正常对照组(control group,n=12):即假手术组,只开胸无手术处理;高肺血流组(shunt group,n=12):全部行左侧开胸,降主动脉与左肺动脉搭桥术。所有动物正常饲养3个月。然后正中开胸,检测肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR),观察肺动脉标本的结构和组织学变化。Elisa检测血清内皮素水平。结果高肺血流组,肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR)显著升高(P<0.01);左肺动脉出现平滑肌细胞显著增生,部分血管中膜及内膜增厚,官腔狭窄;血清内皮素水平升高。结论在幼猪动物模型中,高肺血流可导致肺动脉结构重塑,可导致肺动脉压力的升高,与血清内皮素变化呈正相关。

猪链球菌2型在小型猪模型体内的动态分布

实验采用SPF小型猪建立猪链球菌2型的动物模型,将14头SPF小型猪随机分为实验组和对照组,实验组肌肉注射2 mL的1×109 CFU.mL-1菌液,对照组注射2 mL无菌培养基。攻毒后利用细菌培养和PCR技术定期检测体内血液和组织中的细菌动态分布情况。实验发现SS2侵入血液的速度很快;扁桃体是该菌的定植器官,SS2对肝脏、肾脏等实质器官的黏附性无明显差异;只有出现神经症状及死亡仔猪,才能从脑组织中分离到SS2,说明细菌突破血脑屏障,进入大脑可能是引发脑膜炎的前提。试验为研究该病的致病机理提供了依据。

高肺血流幼猪模型的建立及其肺动脉血流动力学和肺组织学变化

目的研究高肺血流幼猪动物模型的建立的方法及探讨肺动脉血流动力学与结构关系。方法采用生后2-3月龄的幼猪,体重8-10kg,分为两组,每组6只。对照组(Control-group,n=6):即假手术组,只开胸无手术处理;高肺血流组(shunt-group,n=6):全部行左侧开胸,降主动脉与左肺动脉搭桥术。所有动物正常饲养3个月。然后正中开胸,检测肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR),观察肺动脉标本的结构和组织学变化。结果 高肺血流组肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR)显著升高(P<0.01);左肺动脉出现平滑肌细胞显著增生,部分血管中膜及内膜增厚,官腔狭窄。对照组无明显变化。结论在幼猪动物模型中,高肺血流可导致肺动脉结构重塑,可导致肺动脉压力的升高。为进一步研究高肺血流先天性心脏病肺动脉高压的形成过程,以期在治疗上提供新的方法。

用无菌小猪模型研究轮状病毒腹泻

实验无菌小猪作为轮状病毒 ( RV)腹泻研究模型 ,具有很多优点。建立起该腹泻模型 ,可以研究人轮状病毒的体内感染、RV致病机理、毒力和宿主限制性相关基因 ,评价不同种类疫苗的保护作用以及确定保护作用相关因素等 ,对 RV腹泻的防治有重要指导作用。

低剂量氯吡格雷在冠状动脉再狭窄家猪模型中应用的初步探讨

目的评价低剂量氯吡格雷在冠状动脉再狭窄家猪模型中的应用效果。方法选取健康家猪6头,抽取静脉血测定ADP(Adenosine Diphosphate,二磷酸腺苷)诱导的血小板聚集率作为基础值,然后开始喂食氯吡格雷(25mg/d)和常规剂量的阿司匹林,开始给药后第4天行介入手术构建冠状动脉过度扩张再狭窄模型并行支架植入术,同时在给药后第4、8﹑14天再次抽血测定ADP诱导的血小板聚集率,评价氯吡格雷对血小板聚集率的抑制效果,记录术后压迫止血情况及术中、术后的安全性,14天时处死动物并血管取材评价支架内血栓情况。采用SPSS10.0进行统计学分析。结果家猪平均体重为(23.1±4.4)Kg,ADP诱导的血小板聚集率基础值为(43.08±5.06)%。用药后第4天,血小板聚集率值较基础值明显下降[(29.05±9.26)%:(43.08±5.06)%,P=0.008],用药后8天血小板聚集率值进一步下降,用药后14天,血小板聚集率值趋于稳定,达到并维持抗血小板聚集的效果,术中和术后24小时均未发生冠状动脉事件,14天时血管取材病理切片未见支架内血栓形成。结论在冠状动脉再狭窄家猪模型中,低剂量氯吡格雷可以达到抑制ADP诱导的血小板聚集的效果,同时低剂量氯吡格雷联合常规剂量的阿司匹林可以保证冠状动脉再狭窄家猪模型的安全性,并降低实验费用。

先天性心脏病室间隔缺损幼猪模型手术配合体会

猪的生物学特性和解剖生理特点与人类十分接近 ,使用幼猪制备先天性心脏病的动物模型非常合适。本文就幼猪先天性心脏病模型制备的各种工作 ,如 :动物选择、手术室及人员准备、麻醉、术前术后配合以及手术动物的实验管理等方面进行了阐述。笔者认为 ,一个动物模型的成功制备 ,与各方面的配合工作密不可分。

高肺血流幼猪模型中肺动脉血流动力学及组织学变化对血清基质金属蛋白酶的影响

目的研究高肺血流幼猪模型肺动脉血流动力学及组织学变化与血清基质金属蛋白酶的关联性。方法采用生后2-3月龄的幼猪,体重7-10kg,分为两组,每组12只。对照组(control group,n=12):即假手术组,只开胸无手术处理;高肺血流组(shunt group,n=12):全部行左侧开胸,降主动脉与左肺动脉搭桥术。所有动物正常饲养3个月。然后正中开胸,检测肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR),观察肺动脉标本的结构和组织学变化。Elisa检测血清基质金属蛋白酶水平。结果高肺血流组肺动脉收缩压(PASP)、肺血管阻力(PVR)显著升高(P<0.01);左肺动脉出现平滑肌细胞显著增生,部分血管中膜及内膜增厚,官腔狭窄;血清基质金属蛋白酶水平升高。结论在幼猪动物模型中,高肺血流可导致肺动脉结构重塑,可导致肺动脉压力的升高,与血清基质金属蛋白酶变化呈正相关。为进一步研究高肺血流先天性心脏病肺动脉高压的形成过程提供实验依据以及实验平台,以期在治疗上提供新的方法。

肺的热消融:通过猪模型大体病理和CT表现比较射频和微波消融

目的比较正常猪肺模型相同大小电极的射频消融和微波消融的疗效。方法所有实验均经动物保护和使用委员会批准。共对18只活体猪肺进行消融。在CT透视引导下，9只经皮放置17G可冷却三轴微波电极，9只经皮放置17G可冷却射频消融电极。使用阻抗脉冲方法获得消融能量，微波消融能量为125W，射频消融能量为200W，消融进行10min。在监控消融灶增长过程中．每分钟都获得CT影像。消融结束后，动物被处死。切下消融区并行垂直于电极的切层，层厚5mm。

慢性增强体外反搏猪模型的建立

目的初步建立猪慢性体外反搏模型。方法12头猪,戊巴比妥钠(≤30mg/kg·b.w.)和速眠新Ⅱ(≤0.1ml/kg·b.w.)联合麻醉,取侧卧位,0.025～0.04MPa/cm2的压力进行反搏,2h/次,隔日1次,共计36h。结果所有动物均成功完成了反搏,联合应用戊巴比妥钠和速眠新Ⅱ取得了良好麻醉效果,减少了各自的用量,且对动物的脏器功能没有产生不良影响。结论成功建立了猪慢性体外反搏模型,在猪慢性体外反搏时我们推荐戊巴比妥钠与速眠新Ⅱ联合麻醉。

从“智猪模型”看团队激励机制

"智猪模型"是博弈论中较为经典的纳什均衡的例子,这个例子被广泛地应用于经济学、人力资源管理等领域。本文根据"智猪模型"分析在团队激励中存在的"搭顺风车"的现象,并以模型的构建为基本出发点,通过改变三个变量,即增加食物投放量、改变按钮与食槽的位置、增加惩罚机制,探讨如何改良"智猪模型"使得在团队激励中更加有效果。并且结合"智猪模型"对于团队激励的启发,进而研究建立包括改变激励——收益规则、加强精神激励、使用目标管理、引入竞争机制、增加培训在内的团队激励机制。

慢性发绀型肺血减少先天性心脏病幼猪模型的建立与病理学观察

目的:采用人工血管肺动脉(PA)-左心房(LA)分流与肺动脉环缩的方法建立慢性发绀型肺血减少先天性心脏病(先心病)幼猪模型。方法:将6～8 w龄幼猪分2组,肺血减少组7只,行人工血管PA-LA分流及PA远端环缩;对照组6只,仅开胸。饲养4 w后行二次手术,评估建模效果。结果:对照组均存活,肺血减少组存活6只。肺血减少组跨肺动脉环缩处收缩压差由(10.33±6.09)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)增至4 w后的(19.67±4.76)mmHg,P=0.011。与对照组比较,肺血减少组动脉血氧饱和度(SaO2)、动脉氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、血红蛋白含量(Hb)和血细胞比容(Hct)差异均有统计学意义(P<0.05)。2组幼猪肺脏、心脏组织比较有明显的病理学特征差异。结论:应用人工血管PA-LA分流与PA环缩的方法成功建立慢性发绀型肺血减少先心病动物模型,创伤小、可重复性高。

利用CRISPR/Cas9系统构建Tiki1基因修饰猪模型

Tiki1基因是哈佛大学儿童医学院贺熹教授实验室发现的一个对蛙头部的诱导起到决定性作用的新基因,但Tiki1基因在小鼠等啮齿类动物中缺失,因此无法利用小鼠等小动物来研究其在哺乳动物中的作用.本文利用CRISPR/Cas9系统结合体细胞克隆技术构建Tiki1基因修饰猪模型,研究Tiki1基因在猪发育中的作用.我们利用贺熹教授团队提供的人Tiki1基因序列,在猪的基因组数据库中比对出与其同源性最高的一段序列设计2个靶位点(g1和g2).以设计的靶位点构建打靶质粒转染猪胎儿成纤维细胞,经细胞筛选、PCR扩增及测序共鉴定了52个单细胞克隆株.最终选择靶位点g1为纯合双敲的5个单细胞克隆株和靶位点g2为纯合双敲的3个单细胞克隆株作为构建Tiki1基因敲除猪的核供体.我们共计构建了720个重组胚胎,分别植入3头代孕母猪,其中有1头经B超检测成功怀孕并妊娠到期产下13头发育正常的克隆猪,经测序鉴定其中12头为Tiki1基因双敲除猪模型,Tiki1基因敲除克隆猪健康存活至今.结果表明Tiki1基因对于猪早期发育的作用机理不同于蛙,其在猪早期发育的过程中的具体作用机理有待后续进一步的深入研究.

全身炎症反应综合征／多器官功能障碍综合征的肠-淋巴假说在猪模型中的确认

以往的研究中，曾有学者根据大鼠模型的实验结果，提出创伤／出血性休克（T／Hs）时中性粒细胞和内皮细胞活化诱发器官损伤最初可能由肠系膜淋巴系统病变引起的假说。为了证实这一假说。最近美国研究人员在猪T／HS模型中进行了相似的实验。出血性休克的复制方法为抽血、维持平均动脉压40mmHg（1mmHg=0．133kPa）3h或碱缺失（BD）为-5mmol／L。然后给予液体复苏。实验中研究者将导管插入一条肠主要淋巴管。

谈西昌出土的陶猪模型

在四川西昌市城区配合基本建设几年来陆续清理了一些残坏的东汉至魏晋时期的砖室墓葬,出土了不少的陶猪模型,是我们今天研究当时畜牧业生产的珍贵实物资料。这些陶猪模型所塑造的形象有明显的两种不同的形状。它说明了当时的西昌饲养的猪种是有不同的品种,这是值得我们研究和重视的。第一种陶猪模型,它的基本形状与我们今天所饲养的猪大体相同,即“凉山黑猪”。它的特点是,嘴大耳大,前足短而粗壮(见图一);有的颈项上还长有高高的一行鬃毛(见图二)。

异种移植相关功能蛋白人源化基因修饰猪模型的建立

随着临床上器官衰竭及功能缺陷等疾病的日益增多，器官移植一直是医生及科学家们努力尝试解决的问题，包括肝脏、肾脏、心脏等重要器官的移植和重建，因此合适的移植供体就显得尤为重要。由于人与人之间移植供体资源匮乏，且找到同型合适匹配的脏器来源更为稀缺.

糖尿病转基因猪模型建立

日本研究人员日前利用转基因技术在猪身上再现了糖尿病及视网膜病和肾衰竭等并发症。在大型哺乳动物身上再现这些疾病，将有助于研究引起并发症的机制及相应的治疗方法。

几内亚猪模型中新的巨细胞病毒疫苗可预防先天性感染

据Medscape．com2月23日报道（原载J Infect Dis2007；195：767—769，782-798），在一个感染巨细胞病毒（CMV）的几内亚猪模型内，一种新的疫苗可预防先天性CMV感染，并引导出细胞介导的免疫反应。预先注射疫苗可以降低与CMV有关的死产率。