多重PCR同时检测口蹄疫病毒、猪水疱病病毒和水疱性口炎病毒

根据基因库中的口蹄疫病毒(FM-DV),猪水疱病病毒(SVDV)和水疱性口炎病毒(VSV)各基因序列,设计了与FMDV,SVDV和VSV互补的3对特异性引物,对样品中的cDNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为189 bp,125 bp和300 bp。用这3对引物对病毒样品cDNA模板进行多次扩增,均能稳定得到与设计相符合的3条特异性条带。本试验能特异、敏感、快速地鉴定FMDV,SVDV和VSV。

多重RT-PCR检测猪口蹄疫病毒、猪水泡病病毒和猪水疱性口炎病毒的研究

建立了一种同时检测猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪水泡病病毒(SVDV)和猪水疱性口炎病毒(VSV)三种病原体的多重RT-PCR方法。参照文献报道的基因序列,设计合成了三对特异性引物;PCR扩增条件进行优化后,用这三对引物对同一样品中的FMDV、SVDV、VSVRNA模板进行扩增,结果同时得到了三条特异性条带,大小与试验设计相符:FMDV(208bp)、SVDV(862bp)、VSV(638bp),且对猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸扩增结果为阴性;三种病毒RNA模板检出的最小量均为10fg。试验证明,此方法经济、快速、敏感、特异,可用于FMDV、SVDV和VSV这三种猪水泡性疾病的鉴别诊断及流行病学调查。

稳定表达猪水疱病病毒P1基因的PK-15细胞系的建立

从猪水疱病全长感染性cDNA中,应用PCR技术扩增到SVDV结构蛋白P1基因,并在目的片段的5′端引入Kozak序列(Kozak,1987),定向克隆于逆转录病毒载体pBABE puro。经PCR、酶切和序列分析鉴定,获得阳性重组质粒。将该重组质粒与水疱性口炎病毒载体pVSV-G共转染GP2-293细胞,收获假型病毒,在Polybrene的介导下感染PK-15细胞,嘌呤霉素筛选阳性细胞克隆。免疫荧光连续检测阳性克隆传代细胞,发现在不同代次的细胞中均有SVDV P1蛋白表达,而且表达的蛋白可被SVD阳性血清所识别;同时应用PCR技术,可从体外反复传代阳性细胞基因组中扩增到SVD P1基因。表明本次所筛选的阳性细胞克隆不但能持续稳定地表达SVD P1蛋白,而且可携带外源基因进行传代,具有良好的遗传稳定性。

猪水疱病病毒研究进展

猪水疱病是猪的一种急性传染病,与口蹄疫和水疱性口炎等水疱类疫病具有同等的重要性,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类疾病。文章主要介绍了本病病原近年来在分子生物学方面的研究概况,主要包括RNA基因组的结构和功能的研究、结构蛋白功能的新发现、抗原结构的研究、病毒的诊断研究以及与柯萨奇病毒B5的关系等方面的研究现状。

实时荧光定量RT-PCR检测猪水疱病病毒的研究

按照猪水疱病病毒结构蛋白VP1基因序列,设计合成引物和探针,经各反应条件的优化,建立了实时荧光定量RT-PCR技术,对猪水疱病病毒进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,实时荧光TaqManRT-PCR可检测到每个反应相当于1×102拷贝病毒RNA;与FMDV、VSV等其他水疱性病毒不发生交叉反应;制作的标准曲线中各浓度范围内有极好的线性关系且线性范围宽,相关系数为0.993;与常规的RT-PCR比较,该方法具有快速、特异、敏感、重复性好、可同时检测大量样品等优点。

猪水疱病病毒外壳蛋白的二级结构和抗原表位预测

以SVDV外壳蛋白基因序列为基础,采用Chou-Fasman法、Garnier-Robson法和KarplusSchulz法预测蛋白质的二级结构。按KyteDoolittle方案、Emini方案和JamesonWolf方案预测SVDV外壳蛋白的B细胞表位。预测结果表明,SVDV外壳蛋白的二级结构较为复杂,含有较多的转角和无规则卷曲等柔性区域以及α螺旋和β折叠区段;SVDV外壳蛋白的VP1、VP2和VP3上均有多个区域为B细胞优势表位,其中VP1蛋白的B细胞表位优势区域比VP2和VP3蛋白的多,与已鉴定的B细胞表位相比较,该方法预测的结果有较高的准确度。为实验确定SVDV外壳蛋白的B细胞表位和反向疫苗学设计提供了理论基础。

复方二氯异氰尿酸钠对口蹄疫和猪传染性水疱病病毒的杀灭效力试验

以往对口蹄疫和猪传染性水疱病病毒及其流行区域,一般采用工业用烧碱或福尔马林药液消毒。但烧碱有极强的腐蚀性,福尔马林对人畜皮肤粘膜刺激性强,不能直接喷洒畜体,因此都不是很理想的消毒剂。而复方二氯异氰尿酸钠,对皮肤、粘膜无刺激性,对许多微生物有杀灭作用,并具有洗涤去污之功能,能直接喷洒畜体,经试验对以上两种病毒亦有良好的杀灭效力,现报告如下。

猪水疱病病毒致病和免疫的分子基础

猪水泡病病毒（Swinevesiculardiseasevirus，SVDV）属于小RNA病毒科（Picornaviriclae）肠道病毒属（Enterovirus），其抗原特性与柯萨奇病毒B5（CoxsackievirusB5，CVB5）关系密切，被认为是CVB5的一个猪变种或亚种。SVDV只有一个血清型，但对其分离株进行系统发生分析可进一步分为4个抗原群或基因群。

猪水疱性口炎病毒基因及其疫苗的研究进展

猪水疱性口炎是由水疱性口炎病毒引起的高度接触传染性的病毒性疾病。其临床特征为猪的唇部，鼻及口腔等处发生水疱，并从口中不断向外流涎，有时常常还发生在蹄冠和趾间皮肤上，其症状主要以水疱为主。该病在全球许多地区造成广泛流行。近年来，由于产品贸易量的增加，猪水疱性口炎病毒也陆续的传人我国。由于该病与猪水疱病、猪口蹄疫和猪水疱性疹等病毒性疾病容易混淆，因此对该病做出准确地诊断与防制显得尤为重要。在VsV疫苗的研究方面，主要是灭活疫苗和弱毒疫苗的研究，而在新型疫苗的研究方面很少。

猪水疱病自杀性DNA疫苗的初步研究

利用RT-PCR技术,用保真酶扩增获得猪水疱病病毒外壳蛋白1BCD基因,克隆于DNA复制子载体pSCA1中,获得重组质粒pSCA/1BCD。将重组质粒转染BHK-21细胞,RT-PCR法和间接免疫荧光法检测显示,猪水疱病病毒外壳蛋白基因在转染细胞中表达。豚鼠免疫试验表明,自杀性DNA疫苗pSCA/1BCD可诱导SVDV特异性抗体和T淋巴细胞增殖。

猪塞内卡病毒研究进展

塞内卡病毒属小RNA病毒科塞内卡病毒属,可感染各个年龄段的猪群引发猪自发性水疱病,临床表现与口蹄疫、猪水疱病、水疱性口炎、猪传染性水疱病相似,但感染发病率较低,临床症状较轻。2015年以来,塞内卡病毒相关猪自发性水疱病的流行区域迅速扩大,包括巴西、美国、加拿大、中国、泰国和哥伦比亚都相继暴发疫情。另外还出现临床症状加重、新生猪病死率升高等新变化,这些变化给生猪养殖业带来了不小的恐慌,也引起了研究人员的高度重视。为充分了解和掌握塞内卡病毒的最新信息,认清研究的重点和方向,论文对病毒生物学与流行病学特征、临床特性、实验室诊断技术等方面进行了综述。

A型猪塞内卡病毒流行病学、致病性、诊断研究进展

为了进一步了解A型猪塞内卡病毒的特征,通过查阅并总结A型猪塞内卡病毒文献,对A型猪塞内卡病毒流行病学、致病性、诊断方法等方面进行综述,以期提高人们对A型猪塞内卡病毒的认识和防控意识。

猪水疱病及其研究概况

猪水疱病(Swine vesicular disease,SVD)是由猪水疱病毒引起的一种急性传染病,以口鼻腔粘膜、蹄部等出现水疱或溃烂为特征.本病于1966年10月首先发现于意大利Lombardy的猪群,以后在欧洲的许多国家相继发生猪水疱病的流行蔓延,引起严重的经济损失并导致世界肉食市场的混乱.1973年1月国际兽疫局专门召开会议,研究措施并制定条例.现就本病的研究概况作一综述.

猪传染性水疱病的常见类型及防治

猪水泡病（SVD）又称猪传染性水疱病，是由猪水泡病病毒引起猪的一种急性、热性、接触性传染病。以蹄冠、趾间、蹄踵以及偶见唇、舌、鼻镜和乳头等部位周围皮肤或黏膜上发生水泡为特征。笔者在多年的实践中，采用中西医结合的办法防治本病取得了较好的效果，现介绍如下：

猪水疱病重组蛋白P1的豚鼠免疫试验

目的:研究重组猪水疱病病毒(SVDV)P1蛋白的免疫活性。方法:将自制的猪水疱病抗原经佐剂乳化免疫豚鼠,并应用T淋巴细胞增殖试验、阻断ELISA及微量细胞中和试验检测了所制备的免疫原免疫豚鼠后在体液免疫和细胞免疫方面进行了全面的评价。结果:前期制备的抗原免疫豚鼠后具有良好的免疫原性。结论:对该亚单位疫苗可做进一步的开发应用。

详解猪水疱病

猪水疱病（Swine vesicular disease, SVD）,又称猪传染性水疱病，是猪水疱病病毒（SVDV）引起的一种急性、热性接触性传染病。1966年10月该病首先发现于意大利Lombardy的猪群，以后在欧洲的许多国家相继发生猪水疱病的流行蔓延，引起严重的经济损失并导致世界肉食市场的混乱。

猪水疱病的综合防治

猪水泡病（swinevesiculardiseaseSVD）又称猪传染性水疱病，是由猪水泡病病毒引起猪的一种急性、热性、接触性传染病。以蹄冠、趾间、蹄踵以及偶见唇、舌、鼻镜和乳头等部位周围皮肤或黏膜上发生水泡为特征。

浅谈猪水疱病

一、病原学猪水疱病病毒（Swine vesicular disease virus,SVDV）属于小RNA病毒科、肠道病毒属。该病毒只有1个血清型,大约有4种不同的基因型。该病毒与人的库克萨基病毒B5型有共同抗原病毒经56℃条件下1小时即可灭活,在pH2.5~12.0环境下可以稳定存在。

猪塞尼卡病毒A感染

在兽医临床上猪常发生水疱病（VD），一般都认为是由口蹄疫病毒（FMDV，小RNA病毒科口疮病毒属）、水疱性口炎病毒（VSIV．弹状病毒科水疱病毒属）、猪传染性水疱疹病毒（VESV，杯状病毒科水疱疹病毒属）与猪水疱病病毒（SVDV，小RNA病毒科肠病毒属）等4种RNA病毒所引起的。